Hsp70 对低氧大鼠海马DG 区神经细胞p53、p-p38 表达的研究

目的:探讨热休克蛋白70(HSP70)高表达对低氧大鼠海马DG区神经细胞p53、p-p38表达的影响。方法:将大鼠海马DG区神经细胞在41℃温浴1h诱导HSP70高表达,然后低氧培养,Western-blot检测细胞HSP70、p53、p-p38的表达。结果:温浴可以诱导HSP70高表达;HSP70高表达可抑制p53和p-p38表达。结论:HSP70保护低氧诱导的细胞凋亡可能与抑制p53和p-p38表达有关。     

小麦叶绿素酶基因家族的鉴定及其叶绿素降解过程中的功能预测

叶绿素酶(CLH)是植物叶绿素降解过程中的关键酶,在植物生长发育过程中发挥着重要作用.为了解小麦CLH基因家族成员在叶绿素降解过程中的功能差异,本试验采用生物信息学分析方法和实时荧光定量PCR(qRT-PCR)技术对小麦CLH基因家族进行鉴定和初步功能分析,结果表明:小麦中共鉴定到13个CLH成员(TaCLH1～TaC...     

HSP70 高表达保护低氧诱导的大鼠海马DG 区神经细胞凋亡

目的:研究诱导HSP70高表达对低氧引起的大鼠海马DG区神经细胞凋亡的保护作用。方法:大鼠海马DG区神经细胞分别在41℃温浴2h和加入砷酸钠诱导HSP70高表达。对照低氧而不预热,并用HSP70反义寡核苷酸链抑制HSP70合成,观察HSP70与低氧大鼠海马DG区神经细胞凋亡的关系。DNA碎片法检测细胞凋亡,Western Blotting检测HSP70。结果:预热和砷酸钠都可以诱导细胞HSP70高表达;HSP70高表达可以明显减少低氧诱导的细胞凋亡。在预热前导入HSP70反义核酸,可以降低HSP70抑制细胞凋亡的作用。结论:HSP70高表达可以保护细胞由于低氧引起的细胞凋亡。     

丙型肝炎病毒核心蛋白基因真核表达质粒的构建和表达

目的:构建丙型肝炎病毒(HCV)核心蛋白真核表达质粒,并在HepG2细胞中稳定表达.方法:采用RT-RCR方法从丙型肝炎患者血清中得到HCVC区的cDNA序列,然后克隆入pcDNA3.0载体,构建真核表达质粒pcDNA-HCV,并进行酶切鉴定和测序鉴定;采用脂质体转染技术将pcDNA-HCV稳定转染于HepG2细胞系,并用G-418进行筛选;采用Western Blotting方法和免疫细胞化学方法检测HepG2细胞中HCV核心蛋白表达情况.结果:从HCV感染者血清中扩增得到的503bpHCV cDNA序列.属于HCV 1型基因C区,并成功构建了真核表达质粒pcDNA-HCV.经Western blotting和免疫细胞化学检测,稳定转染的HepG2细胞中有HCV核心蛋白的表达.结论:成功构建HCV核心蛋白真核表达质粒pcDNA-HCV,并可以在真核细胞HepG2中稳定表达.     

虫草素对786-O和ACHN肾癌细胞系增殖、迁移和凋亡机制探究

探究肾癌细胞系经虫草素给药刺激后,细胞凋亡及迁移的机制。体外培养肾癌786-O细胞系和肾癌ACHN细胞系,采用MTT法、细胞迁移实验、HE染色、免疫荧光染色及蛋白免疫印记法;检验不同浓度虫草素处理肾癌细胞系增殖抑制率、细胞迁移情况、细胞形态变化和细胞核形态差异,检验凋亡相关基因蛋白表达情况,探究虫草素诱导肾癌细胞的凋亡机制。随着浓度剂量提高,虫草素能够显著促进肾癌细胞系凋亡,抑制迁移。形态学研究表明,HE染色观察发现癌细胞数量明显降低,并且细胞核明显变大。免疫荧光染色发现MMP-2、MMP-9和BCL-2蛋白表达显著降低,Bax、Casepase-3和Casepase-7蛋白表达显著增加,肾癌细胞可通过AKT/mTOR信号通路诱导肾癌细胞凋亡。     

西安地区空军老干部患病现况及其相关因素研究

目的:调查西安地区老年空军人群慢性病患病情况及其生活评价的现况,分析其相关因素的影响。方法:采用整群抽样的方法对西安地区310名老年空军进行体格检查和使用生活综合评价调查表进行问卷调查。结果:在本次研究的老年空军人群中,慢性病患病率100%。同时患两种病及以上的占91.29%。患病率由高到低排名前10位的慢性病依次为高血压、冠心病、高脂血症、老年性白内障、脑血管疾病、前列腺疾病、糖尿病、慢性支气管炎、慢性胃肠道疾病、胆囊和胆道疾病。舒张压异常、体检白细胞指标异常的人群患脑血管疾病的优势比分别是2.16、3.95(P<0.05);甘油三脂异常的人群患高脂血症的优势比是4.74(P<0.001);在健康自评和心理卫生评定中、差的人群患冠心病的优势比分别是1.85、1.64(P<0.001);体能检查中、差的人群惠老年性白内障的优势比是1.48(P<0.05);生活功能、社会交往和活动强度中、差的人群患脑血管疾病的优势比分别是3.40、2.22、2.92(P<0.001)。结论:应有针对性、有重点地开展危险因素的早期干预,促进预防和医疗两大系统的协作,才能有效地控制老年人慢性病的发生。     

HBsAb标记胶体金探针对HBV阳性血清感染HPT-8细胞的示踪研究

目的:为临床诊断提供HBV进入HPT-8的依据。方法:HBV阳性血清(1.5×10~8拷贝/毫升)体外感染HPT-8细胞48h,设感染组、阴性对照组和空白对照组,ELISA检测细胞培养上清中HBsAg、HBeAg,提取感染后传代的各代细胞中DNA用于PCR检测HBV DNA。免疫荧光定量PCR检测细胞培养上清中HBV DNA的滴度。采用乙肝表面抗原单克隆抗体标记的胶体金探针对感染的HPT-8细胞中的乙肝表面抗原进行标记示踪。结果:ELISA检测感染组细胞第1、2代培养上清中HBsAg阳性,PCR检测感染组第1、2代细胞HBV DNA,结果均阳性。免疫荧光定量PCR检测感染组细胞上清在第1、2代、3代48h的HBV滴度分别为8×10~4、4.6×10~3、<10~3(拷贝/毫升)。通过胶体金探针的标记:乙肝表面抗原存在于感染细胞的溶酶体内、细胞膜和绒毛上。结论:血清中的HBV病毒能进入胎盘滋养细胞,并可从感染滋养细胞的树脂切片中获得乙肝表面抗原的超微结构定位。     

婴幼儿重症肺炎潮气呼吸肺功能、D-二聚体水平的变化及盐酸氨溴索的干预效果研究

摘要 目的：探讨婴幼儿重症肺炎潮气呼吸肺功能、D-二聚体水平的变化及盐酸氨溴索的干预效果研究。方法：2016年1月至2019年12月期间我院收治的重症肺炎婴幼儿122例作为肺炎组,另选取同期来我院行健康体检的婴幼儿100例作为对照组,肺炎组患儿采用随机数字表法分为A组（n=61,常规治疗）和B组（n=61,常规治疗基础上联合盐酸氨溴索治疗）,对比对照组、肺炎组潮气呼吸肺功能、D-二聚体水平,对比A组、B组两组的疗效、潮气呼吸肺功能、D-二聚体、症状缓解时间及不良反应。结果：肺炎组呼吸频率（RR）、D-二聚体水平高于对照组,潮气量（VT）、达峰时间（TPTEF）、吸气时间（TI）、呼气时间（TE）短于对照组（P<0.05）。B组治疗1周后的总有效率高于对照组（P<0.05）。两组治疗1周后RR、D-二聚体水平均下降,且B组低于A组（P<0.05）,两组治疗1周后VT、TPTEF、TI、TE均升高,且B组高于A组（P<0.05）。B组退热时间、咳嗽缓解时间、气促缓解时间、啰音消失时间均短于A组（P<0.05）。A组、B组两组患儿不良反应总发生率对比未见差异（P>0.05）。结论：D-二聚体以及潮气呼吸肺功能检测可作为婴幼儿重症肺炎治疗效果、病情程度评价的重要指标,经盐酸氨溴索干预后患儿D-二聚体及潮气呼吸肺功能均可得到显著改善,临床症状可有效缓解,疗效肯定,且不增加不良反应发生。     

香蕉内生克雷伯氏菌KKWB-5强启动子片段的分离及鉴定

目的:旨在获得香蕉内生克雷伯氏菌KKWB-5的强启动子片段,以应用于香蕉内生工程菌的构建。方法: 利用以kan^r基因为报告基因的启动子探针载体pUCK在大肠杆菌Top10中克隆KKWB-5基因组DNA 的启动子片段;将筛选到的高抗Kan的质粒导入KKWB-5,分别于LB和香蕉杆浸汁培养基(BSM)平板上检测它们的抗Kan水平;选择在BSM上抗Kan水平最高的片段15,检测该片段的基因间隔区15P的启动子活性,最后以gfp为报告基因来验证片段15P的启动子活性。结果:有7个抗Kan 水平在2500μg/ml以上的Top10转化子;这7个质粒在导入KKWB-5后,它们在LB平板上的抗Kan 水平有不同程度的增加,但在BSM培养基上则大为减弱;片段15P具有启动kan^r 基因的活性,且与原片段15的抗Kan 水平相同;重组质粒pUCK-6-15Pgfp,以Top10和KKWB-5为宿主菌,在LB培养基上培养时,在荧光显微镜下均能发出绿色荧光;以KKWB-5为宿主菌,在BSM培养基上培养时,在荧光显微镜下也能发出绿色荧光。 结论:片段15不仅在Top10中具有较强的启动子活性,而且在其供体菌KKWB-5中具有更强的启动子活性,其基因间隔区15P为主要的启动子区域,在BSM培养基上也具有较好的启动子活性,该启动子片段15P可以应用于KKWB-5内生工程菌的构建。     

锰对PC12 细胞的增殖抑制与凋亡研究

目的:研究锰作用下PC12细胞的增殖抑制作用与凋亡相关的形态学、生化指标改变。方法:用200,400,600,800μmol/LMnCl2的培养液,分别作用对数生长期PC12细胞1,2,3,4d后,用MTT筛选锰的细胞毒性剂量;透射电镜观察细胞形态学变化;琼脂糖凝胶电泳检测MnCl2对PC12细胞基因组DNA的影响。结果:MTT实验显示200-800μmol/L MnCl2作用4天对PC12有显著的抑制作用,呈剂量和时间依赖趋势,600μmol/L MnCl2作用4d对PC12的抑制率可达50%以上。600μmol/L MnCl2作用4d电镜可见细胞凋亡,同样条件下细胞DNA碎片化。结论:PC12细胞在锰作用下发生增殖抑制,原因是锰诱导PC12细胞凋亡。