Gs蛋白alpha亚基与毒性多结节性甲状腺肿自主功能性的研究

目的：检测TMG (毒性多结节性甲状腺肿：Toxic Multinodular Goiter) 患者甲状腺细胞中的Gs琢基因突变情况,讨论其与 TMG 细胞自主功能性的关系。方法：将16 例TMG 患者手术切除标本中甲状腺结节组织及其作为对照组的结节周围正常的甲状 腺组织,分别于光镜电镜下观察细胞行为,提取DNA,对目的基因片段进行扩增聚合酶链反应(PCR)反应及DNA测序分析。结果： 于光镜及电镜下可观察到TMG细胞的滤泡大小不等,滤泡上皮呈高柱状,增生明显,粗面内质网高度扩张,高尔基体发达,核糖 体丰富,呈高功能状态。16 例TMG 标本中,5 例发现第10 外显子点突变,其中：2 例为第274 位的赖氨酸密码子AAG的第一个 碱基A的缺失,使对应赖氨酸表达异常,3 例为第279 位的天冬酰胺的密码子AAC 的第一个碱基A 的缺失,对应天冬氨酸表达 异常。对照组未发现Gs琢基因突变。结论：TMG 患者Gsalpha基因突变可导致Gs琢/TSHR/cAMP 信号通路异常,使细胞产生自主高功 能状态,是导致TMG 自主功能性发生的重要因素。     

伴海马硬化的颞叶癫痫患者海马组织内BDNF 表达变化

目的:研究伴海马硬化的难治性颞叶癫痫(TLE)患者海马组织内脑源性神经营养因子(brain derived neurotrophic factor,BDNF)的表达变化,探讨其在难治性颞叶癫痫发病机制中的作用。方法:采集5例伴海马硬化的难治性TLE患者手术中切除的海马组织,用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法检测BDNF mRNA表达,并与3例非海马硬化TLE患者对照。结果:与非海马硬化组比较,伴海马硬化的难治性TLE患者海马组织中的BDNF mRNA表达明显增加(P<0.01)。结论:伴海马硬化的难治性TLE患者海马组织中BDNF mRNA表达表达增高,可能在海马硬化和难治性颞叶癫痫发生、发展中具有重要作用。     

辛伐他汀对IFN-y诱导的人外周血单个核细胞OX40L表达的影响

目的：探讨经IFN-y刺激后,人外周血单个核细胞OX40L表达的变化,以及辛伐他汀对单个核细胞OX40L表达的影响。方法：将实验标本随机分为2组,分别干扰素-y（IFN-y）刺激组、辛伐他汀干预组。应用RT—PCR及Western blotting技术,观察IFN-y诱导的人外周血单个核细胞OX40L表达情况及辛伐他汀对人单个核细胞OX40L表达的影响。结果：1．1000U／ml IFN-与人单个核细胞共同培养24h后,OX40LmRNA和蛋白水平的表达明显增加。2．预先给予10mol／L的辛伐他汀干预1h可以明显降低IFN-诱导的OX40L表达。结论：IFN-可诱导人单个核细胞OX40L表达。辛伐他汀可以抑制IFN-诱导人单个核细胞OX40L表达的增强,从而可能抑制了OX40L信号通路介导的与炎症有关的血管损伤,延缓动脉粥样硬化的进程。     

脑源性神经生长因子对齿状回miR-132表达及抑制性电流的影响

目的:探讨脑源性神经生长因子(BDNF)对海马mi R-132的表达及齿状回颗粒细胞抑制性突触后电流(sIPSCs)的影响,明确BDNF对颞叶内侧癫痫(MTLE)发病机制的作用。方法:选取哈医大一院神经外科2008年4月-2010年10月手术治疗的MTLE患者12例海马组织。RT-pcr技术检测BDNF孵育后mir-132表达,脑片膜片钳技术检测BDNF对sIPSCs的影响。结果:BDNF升高了颞叶癫痫海马mi RNA-132的表达(P0.01),减弱了颗粒细胞sIPSCs的频率和幅度(P0.01)。结论:BDNF升高了海马mir-132的表达,减弱颗粒细胞sIPSCs的频率和幅度,可能对MTLE的发展有促进作用。     

毒性多结节性甲状腺肿的手术术式探讨

目的:探讨毒性多结节性甲状腺肿的手术切除范围,为临床手术治疗毒性多结节性甲状腺肿提供理论依据。方法:收集2006年12月至2011年12月哈尔滨医科大学附属第一临床医学院普外科确诊且进行手术的52例双侧毒性多结节性甲状腺肿患者的临床资料,并按照术式分为次全切除组(24例)和近全/全切除组(28例)。术后通过病理检查观察其合并甲状腺癌的情况,临床观察其是否出现声音嘶哑(喉返神经损伤)和低钙血症(甲状旁腺损伤)情况,并随访患者甲状腺结节和(或)甲状腺功能亢进的复发情况。结果:次全切除组甲状腺癌的检出率为4.2%(1/24),近全/全切除组检出率为7.1%(2/28),两者比较差异无统计学意义(x2=0.02,P0.05);两组患者术后暂时性声音嘶哑发生率分别为4.2%(1/24)、3.6%(1/28),差异无统计学意义(x2=0.37,P0.05),术后暂时性低钙血症发生率分别为4.2%(1/24)、7.1%(2/28),差异亦无统计学意义(x2=0.02,P0.05)。近全/全切除组患者术后无甲状腺结节和(或)甲状腺功能亢进复发,次全切除组患者有5例复发,复发率为20.8%(5/24),两组比较差异有统计学意义(x2=4.28,P0.05)。结论:甲状腺近全/全切除术比次全切除术更能减少毒性多结节性甲状腺肿的复发。     

伴海马硬化的颞叶癫痫患者海马组织内BDNF表达变化

目的：研究伴海马硬化的难治性颞叶癫痫（TLE）患者海马组织内脑源性神经营养因子（brain derivedneurotrophic factor,BDNF）的表达变化,探讨其在难治性颞叶癫痫发病机制中的作用。方法：采集5例伴海马硬化的难治性TLE患者手术中切除的海马组织,用逆转录-聚合酶链反应（RT—PCR）法检测BDNFmRNA表达,并与3例非海马硬化TLE患者对照。结果：与非海马硬化组比较,伴海马硬化的难治性TLE患者海马组织中的BDNFmRNA表达明显增加（P〈0．01）。结论：伴海马硬化的难治性TLE患者海马组织中BDNFmRNA表达表达增高,可能在海马硬化和难治性颞叶癫痫发生、发展中具有重要作用。     

不同剂量瑞舒伐他汀对ACI患者外周血淋巴细胞OX40L表达及血清OX40L和hs-CRP水平的影响

目的:探讨不同剂量瑞舒伐他汀对急性动脉硬化脑梗死(ACI)病人外周血淋巴细胞OX40L及血清OX40L和hs-CRP水平的影响.方法:选择40名动脉硬化性脑梗死病人,随机分为瑞舒伐他汀20 mg治疗组(A组)和瑞舒伐他汀10 mg治疗组(B组),应用QRT-PCR及酶联免疫吸附试验(ELISA)法分别检测外周血淋巴细胞OX40L及血清OX40L和hs-CRP的水平.结果:A组与B组外周血淋巴细胞OX40L下降幅度比较(P＜0.01)及血清sOX40L和CRP水平治疗后有明显降低(P＜0.05),A组与B组比较A组降低更加明显,有统计学意义.结论:动脉硬化性脑梗死病人急性期服用瑞舒伐他汀20 mg能更明显的降低患者外周血淋巴细胞OX40L及血清OX40L和CRP的水平,提示动脉粥样硬化性脑梗死病人早期服用较大剂量的他汀药物治疗效果可能更好.     

瑞舒伐他汀对OX-LDL诱导的人脐静脉内皮细胞PPAR-gamma表达的影响

目的：探讨经氧化低密度脂蛋白（OX-LDL）刺激后,人脐静脉内皮细胞（PPAR-gamma）表达的变化,以及瑞舒伐他汀对动脉粥样硬 化的影响。方法：将实验标本随机分为2 组,分为（OX-LDL）刺激组、瑞舒伐他汀干预组。应用RT-PCR及Western blot 技术,观察 OX-LDL 诱导的人脐静脉内皮细胞PPAR-gamma表达情况及瑞舒伐他汀对人脐静脉内皮细胞PPAR-gamma及浓度依赖的方式降低了人脐静脉内皮细胞PPAR-gamma的表达;2）瑞舒伐他汀可以逆转OX-LDL 对人脐静脉内细胞的影响 并可能与甲羟戊酸有关。结论：OX-LDL可降低人脐静脉内皮细胞PPAR-gamma的表达。瑞舒伐他汀可以抑制OX-LDL诱导人脐静脉 内皮细胞PPAR-gamma表达的增强,从而可能抑制了OX-LDL信号通路介导的与炎症有关的血管损伤,延缓动脉粥样硬化的进程。     

实时荧光定量PCR快速检测四种蛀果性害虫

苹果蠹蛾、香梨优斑螟、梨小食心虫及地老虎是危害新疆香梨等产品的重要害虫,前3种也属于国际上检验检疫重要虫害。目前,国内主要依靠虫体的形态特征对其进行鉴定,缺少分子生物学检测手段,这限制了我国香梨等产品的生产和出口贸易发展。首先得到这4种害虫的16S r DNA COI基因片段,在差异序列设计特异性的引物和探针,利用实时荧光定量PCR技术建立快速分子检测试验体系,依据标准曲线分析检测体系的重复性和灵敏性。结果表明,苹果蠹蛾、香梨优斑螟、梨小食心虫及地老虎最低检出限分别在1.605×10-2、0.729×10-2、0.475×10-2和0.818×10-2 ng/μL,满足检验检疫日常检测需求。为克服实际检测过程中经常会出现某一虫的残片样本或者几种虫聚集在一起的混合样本,使用了单头、多头DNA样本及4种害虫的混合DNA样本进行检测分析,进一步验证了该方法的特异性,可靠性和可适用性。