等离子体诱变灵芝选育高产纳米硒菌株

本研究应用介质阻挡放电（DBD）等离子体对一种富硒灵芝的原生质体进行诱变,并筛选出高产纳米硒菌株。通过实验,得到优化的等离子体放电条件,如：电压15.6kV、电流1.8mA、放电频率1.8kHz、处理2.5min等,在此条件进行诱变处理,通过随机扩增多态性DNA标记（RAPD）法鉴定,筛选出6株突变菌株。对突变菌株进行传代培养,富硒培养测定菌丝体中硒含量发现突变菌株（H10）与出发菌株相比,菌丝体中纳米硒含量提高了大约30%,从而得到富硒的优良突变菌株。本研究为灵芝提供了一种方便可行的诱变方法,并为灵芝纳米硒相关产品的开发和应用提供了优良菌株。     

不同分子分型乳腺癌患者血清IGFBP-3、Angptl-2表达水平及其与骨转移、预后的相关性

摘要 目的：分析不同分子分型乳腺癌患者血清胰岛素样生长因子结合蛋白3（IGFBP-3）、生成素养蛋白2（Angptl-2）表达水平及其与骨转移、预后的相关性。方法：选取2018年3月-2021年3月东南大学附属中大医院收治的128例乳腺癌骨转移患者进行研究,其中包括Luminal A型50例、42例Luminal B型（HER-2阴性）42例、HER-2过表达型16例、三阴性乳腺癌（TNBC）20例,并分析4种分子分型乳腺癌的临床病理特征,同时采用酶联免疫吸附法检测其血清IGFBP-3、Angptl-2表达水平;随访24个月后记录两组患者的预后情况,并采用多因素Logistic模型分析影响4种分子分型乳腺癌骨转移患者预后的独立危险因素,以及血清IGFBP-3、Angptl-2与不同分子分型乳腺癌骨转移患者预后的相关性。结果：Luminal A型、Luminal B型、HER-2过表达型、TNBC型TNM分期、淋巴结转移比较,差异有统计学意义（P＜0.05）。与Luminal A型、Luminal B型、TNBC型乳腺癌骨转移患者相比,HER-2过表达型乳腺癌骨转移患者的血清IGFBP-3表达水平较低,Angptl-2表达水平较高（P＜0.05）。Luminal A型、Luminal B型、HER-2过表达型、TNBC型乳腺癌骨转移患者的死亡率分别为13.46%、38.46%、23.08%、25.00%。多因素Logistic结果显示,TNM分期、淋巴结转移、血清IGFBP-3、Angptl-2均是影响不同分子分型乳腺癌骨转移患者预后的独立危险因素（P＜0.05）。血清IGFBP-3异常高表达提示4种分子分型乳腺癌骨转移患者的不良预后,而Angptl-2表达水平与4种分子分型乳腺癌的预后呈正相关性（P＜0.05）。针对不同分子分型乳腺癌骨转移患者的预后预测中,血清IGFBP-3、Angptl-2、IGFBP-3+Angptl-2均呈现AUC＞0.75。结论：血清IGFBP-3、Angptl-2可作为HER-2过表达乳腺癌骨转移患者的潜在生物标志物;同时还可根据血清IGFBP-3、Angptl-2表达水平预测不同分子分型乳腺癌骨转移患者的预后。     

rhBMP-2基因转染小鼠间充质干细胞的成骨活性和BMP-2的释放规律分析

通过pcDNA3.1-rh BMP-2质粒转染小鼠间充质干细胞C3H10T1/2研究其成骨能力和增殖效应,探讨BMP-2的释放规律。将预先准备好的重组rhBMP-2质粒转染至C3H10T1/2细胞,利用G418抗药性筛查转染成功的细胞。将研究实验细胞分为转染组、空载组、空白组。通过ELISA检测各组细胞上清液中的BMP-2含量,CCK-8试剂盒检测各组细胞的增值活性,通过测定ALP活性和进行ALP、钙茜素红染色,检测各组细胞成骨活性。结果显示转染组BMP-2浓度随着时间推移逐渐达到高峰并维持一段时间,各检测点均明显高于空白组和空载组(p0.05),转染组细胞较其余两组更具增殖活性、成骨活性(p0.05)。此结果表明C3H10T1/2细胞是pcDNA3.1/rhBMP-2重组质粒的良好宿主,转染后能在一定时间内平稳和持续地表达外源性BMP-2,有较强诱导细胞成骨分化能力。