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目的:为了研究赖氨酰氧化酶(Lysyl Oxidase,LOX)及其相互作用蛋白质在乳腺癌中的功能,构建带StrepⅡ/FLAG串联亲和标签的重组LOX蛋白慢病毒表达载体并在乳腺癌细胞MDA-MB-231中表达。方法:设计引物通过聚合酶链式反应获得带StrepⅡ/FLAG串联亲和标签的LOX蛋白(LOX-SF)的亲本质粒,双酶切后鉴定测序克隆至GV303表达载体,连同慢病毒包装质粒共同转染293T得到GV303/LOX-SF慢病毒,将其转染MDA-MB-231细胞,使用荧光定量PCR和蛋白质印迹实验对细胞中重组蛋白LOX-SF进行检测。结果:通过串联亲和纯化获得LOX-SF重组蛋白,使用标签抗体成功鉴定到LOX-SF重组蛋白在MDA-MB-231细胞内稳定表达。结论:GV303/LOX-SF的构建,使带StrepⅡ/FLAG融合标签的LOX蛋白在MDA-MB-231中成功表达及纯化,为筛选和研究LOX及其相互作用蛋白在乳腺癌细胞内的功能奠定了实验基础。 相似文献
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目的探讨改良微格教学法对临床护理实习生操作培训中自我效能感的影响。方法选择2013年11月~2014年2月在我院实习的临床护理实习生100名,采用便利取样法分为对照组和干预组各50名,对照组采用传统教学法,干预组采用改良微格教学法,比较两组实习护生在生命体征、壁式氧气吸入法、肌肉注射及静脉输液四项操作培训干预前后的成绩,并采用中文版一般自我效能感量表(GSES)评价培训前后两组实习护生的自我效能感。结果两组实习护生在生命体征测量、壁式氧气吸入法的成绩差异无统计学意义(P0.05);干预组实习护生在肌肉注射、静脉输液及自我效能感分值较对照组高,差异有统计学意义(P0.05)。结论改良微格教学法有助于提高临床护理实习生的自我效能感及操作能力。 相似文献
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