甜蛋白基因MBLⅡ对番茄的遗传转化

以5～7d龄的“丽春”番茄无菌苗子叶作为外植体,研究了子叶外植体对抗生素卡那霉素的敏感性,抗生素卡那霉素对番茄筛选的适宜浓度为70mg／L。通过根癌农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)介导,成功地进行了马槟榔甜蛋白基因MBLⅡ对番茄的遗传转化,获得转化番茄抗性植株,组织化学法有阳性表现、PCR特异扩增及Southern杂交检测出现特异条带,表明MBLⅡ基因已顺利整合到转基因番茄植株的基因组。     

恶性疟原虫多抗原表位基因表达载体的构建及其在大豆幼胚中的表达

疟疾是当今最需要研究有效疫苗的主要传染病之一。AWTE基因编码恶性疟原虫多种抗原表位基因 ,CTB基因编码霍乱毒素 B亚基 ,是一种既能引起细胞免疫又能引起体液免疫的免疫载体和佐剂。把 AWTE- CTB融合基因构建到植物表达载体 p BVG- ny2上 ,通过基因枪导入法 ,转化大豆幼胚分生组织。 X- glu染色检测到 GUS基因的表达 ;抗原性分析实验结果表明 ,特异表达的融合蛋白可与 CTB和 AWTE抗体结合 ,具有 CTB抗原性。这个实验结果 ,表明疟疾多抗原表位基因首次在转基因大豆幼胚中得到瞬时表达     

中国白菜RAPD分子遗传图谱的构建

A molecular genetic map of Brassica campestris L. (syn. B. rapa) was constructed based on the segregation of 99 RAPDs (random amplified polymorphic DNAs) markers from eighty-four 10-base random primers using DNA samples extracted from F2 population of turnip (B． campestris L. ssp. rapifera Metzg) × Chinese cabbage (B． campestris L. ssp. pekinensis Lour. Olsson). This genetic map covered 1 632.4 cM (centiMorgan) genome (Kosambi Function) with 16.5 cM mean intervals between flanking markers and defined thirteen linkage groups, in which the longest linkage group is 267.5 cM with 20.6 cM mean interval and the shortest linkage group is 62.2 cM with 15.6 cM mean interval. The size and distribution of linkage groups in this map is similar to other RFLP maps and karyotype data in B. campestris.     

西瓜抗枯萎病育种分子标辅助选择的研究

将西瓜野生种质ＰＩ２９６３４１抗枯萎病生理小种１的抗性基因连锁的ＲＡＰＤ标记ＯＰＰ０１．７００进行克隆、测序,Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交证明此标记为１个单拷贝,并转化为ＳＣＡＲ标记,简化了ＳＣＡＲ扩增产物的检测技术。上述技术在抗病转育后代造反中得到了很好的应用,初步建立了西瓜抗枯萎病育种分子标记辅助选择技术系统。     

杏褪绿卷叶植原体新疆分离物核糖体蛋白基因的克隆与序列分析

【目的】了解杏褪绿卷叶植原体新疆分离物的系统发育关系及遗传分化,确定其分类地位。【方法】利用植原体核糖体蛋白(rp)基因的特异性引物rpF1/rpR1对新疆轮台县托克逊县杏褪绿卷叶病植株总DNA进行PCR扩增,并对部分扩增片段克隆、测序及序列分析。【结果】获得杏褪绿卷叶植原体新疆分离物rp基因片段大小为1196 bp,该片段包含部分rpS19以及rpL22和rpS3基因的全部序列。序列相似性和系统进化分析表明,杏褪绿卷叶植原体新疆分离物与16SrⅤ-rp亚组中的各代表性植原体的rp基因核苷酸序列相似性达到95.7%~99.3%,其中与rpⅤ-C亚组的甜樱桃绿化植原体和枣疯病植原体的相似性最高,核苷酸及氨基酸相似性分别达到99.2%~99.3%和98.3%~98.4%。进一步虚拟RFLP分析,发现杏褪绿卷叶植原新疆分离物rp基因的酶切图谱与rpⅤ-C亚组成员相似性最高,但在MseⅠ、SspⅠ和TaqⅠ的酶切位点上存在差异。综上初步判断其可能属于16SrⅤ组(榆树黄化组)中的一个新rp亚组。【结论】本研究首次报道了杏褪绿卷叶植原体新疆分离物的rp基因序列,确定了其分类地位,为杏褪绿卷叶病的早期诊断和检测提供了基础。     

NAA对胡萝卜（Daucus carota）悬浮细胞茄红素合成的影响

通过对胡萝卜新透心红 DaucuscarotaCV.XinTouxinhong 细胞悬浮系单位鲜重细胞的茄红素含量、细胞总产量以及茄红素总产量的分析比较,研究了培养基中不同NAA浓度对胡萝卜细胞悬浮系茄红素代谢的影响.结果表明,NAA具有增强细胞茄红素代谢水平、提高单位鲜重细胞中茄红素的含量的作用,但对细胞的生长具有抑制作用.从茄红素单产和总产量综合评价,培养基中加入3.0mg·L-1NAA效果最佳.     

疟疾多抗原表位基因表达载体的构建及其在烟草中的表达

本文首次报道疟疾多表位抗原基因在转基因烟草中表达成功。疟疾是当今最需要研究有效疫苗的主要传染病之一。过去的研究表明,ＡＷＴＥ基因编码的疟疾多种抗原表位是有效的抗疟表位,ＣＴＢ基因编码的霍乱毒素Ｂ亚基,是一种既能引起细胞免疫又能引起体液免疫的免疫载体和佐剂。本研究把ＡＷＴＥ－ＣＴＢ融合基因构建到植物表达载体ｐＢＶＧ－ｎｙ１上,采用共转化的方法,通过基因枪导入转化烟草。经ＰＣＲ扩增ＡＷＴＥ－ＣＴＢ基因片段检测,证实了疟疾多表位抗原基因在转基因烟草中的整合。ＳＤＳ－ＰＡＧＥ蛋白电泳结果显示转基因烟草中表达了ＡＷＴＥ－ＣＴＢ融合基因分子量相同的特异蛋白。经抗原性分析实验和Ｗｅｓｔｅｒｎ免疫印迹实验结果表明,特异表达的融合蛋白可与ＣＴＢ和ＡＷＴＥ抗体结合,具有ＣＴＢ和ＡＷＴＥ抗原性。     

番茄种子人工老化前后吸湿-回干处理的生理生化变化

番茄种子在人工老化前后进行吸湿—回干处理能有效地保持种子活力并改善老化种子的性能。种子内溶质渗漏及MDA含量减少,吸水后 SOD、CAT和 POX活性提高,呼吸强度和ATP含量增加.这些指标均显示老化前后两次处理比只进行一次处理的效果好。而RQ则没有明显变化。     

甜蛋白基因MBLII对番茄的遗传转化

以5～7d龄的 丽春 番茄无菌苗子叶作为外植体,研究了子叶外植体对抗生素卡那霉素的敏感性,抗生素卡那霉素对番茄筛选的适宜浓度为70mg/L.通过根癌农杆菌 Agrobacteriumtumefaciens 介导,成功地进行了马槟榔甜蛋白基因MBLII对番茄的遗传转化,获得转化番茄抗性植株,组织化学法有阳性表现、PCR特异扩增及Southern杂交检测出现特异条带,表明MBLII基因已顺利整合到转基因番茄植株的基因组.