兔防御素（MCP—1）cDNA的克隆与序列分析

从兔脾脏细胞中分离提取总ＲＮＡ,经反转录ＰＣＲ（ＲＴ－ＰＣＲ）扩增出兔巨嗜细胞阳离子多肽（ＭＣＰ－１）ｃＤＮＡ,插入经ＥｃｏＲ Ｉ和Ｘｂａ Ｉ双酶切的ｐＵＣＤ１９中,构建了党生质粒ｐＵＣＤＥＦ,进行了限制性酶切鉴定和序列分析,结果在扩增出的ｃＤＮＡ２８８个碱基中,在前片段中有一个碱基与发表的兔ＭＣＰ－１ ｃＤＮＡ序列不同,即第１５７位碱基由Ｇ变为Ａ,导致编码的氨基酸由丙氨酸变为苏氨酸。该ｃＤＮＡ全     

兔防御素(MCP-1)cDNA的克隆与序列分析

从兔脾脏细胞中分离提取总RNA,经反转录PCP(RT-PCR)扩增出兔巨嗜细胞阳离子多肽(MCP-1)cDNA,插入经EcoRI和XbaI双酶切的pUC19中,构建了克隆质粒pUCDEF.进行了限制性酶切鉴定和序列分析,结果在扩增出的cDNA288个碱基中,在前片段中有一个碱基与发表的兔MCP-1cDNA序列不同,即第157位碱基由G变为A,导致编码的氨基酸由丙氨酸变为苏氨酸.该cDNA全长288bp,编码94个氨基酸,由编码信号肽,前片段及成熟肽片段的序列组成.     

中央戈壁石下生物土壤结皮中细菌群落结构和多样性

【背景】戈壁石下生物土壤结皮(Biological soil crusts,BSCs)中的微生物在干旱、半干旱地区生态系统物质循环中起重要作用,其细菌群落结构和多样性因气候和地理环境的不同而存在较大差异。中央戈壁面积大,其石下BSCs中细菌群落结构和多样性却知之甚少。【目的】比较中央戈壁石下BSCs和周围裸土中细菌群落结构和多样性的异同,揭示环境因子对它们的影响以及细菌之间的相互作用关系。【方法】利用Illumina MiSeq对16S rRNA基因进行高通量测序,使用生物信息学分析方法分析细菌群落结构和多样性及其影响因素;基于CoNet软件绘制物种共现性网络图,利用Cytoscape 3.5.1软件将网络图可视化。【结果】石下BSCs的速效磷(Available phosphorus,AP)、速效氮(Available nitrogen,AN)和叶绿素a (Chlorophyll a,Chl a)的含量均明显高于周围裸土(最高高出471%),而pH则略低于周围裸土;石下BSCs中细菌的最优势菌门为Cyanobacteria(45.85%-53.77%),优势属(9.25%-18.42%)有Trichocoleus、Chroococcidiopsis和属于Cyanobacteria纲的1个未知属;临近裸土中细菌的最优势菌门为Actinobacteria (38.82%-44.69%),优势属(5%)有Arthrobacter、Rubrobacter和其它3个属于放线菌门或酸杆菌门的未知属;在土壤理化因子中,AP对石下细菌群落组成的影响最大;除Actinophytocola属和Cyanobacteria纲中的未知属外,其他微生物之间均存在较强的互作关系,其中以共存的互作关系为主(约占60%),点度中心性、接近中心性和中介中心性均较高的节点都属于Cyanobacteria门和α-Proteobacteria纲。【结论】中央戈壁石下BSCs中的细菌群落结构和多样性明显不同于临近裸土,Cyanobacteria门和α-Proteobacteria纲的细菌是该地区石下早期BSCs形成和发育最初及最重要的驱动力。     

泉州湾河口湿地生态系统服务价值的动态评价及驱动力分析

以泉州湾河口湿地为研究对象,结合服务指标分类和去重复计算,采用市场价值法、替代价值法及机会成本法等,对泉州湾河口湿地1997、2005、2013、2015年的生态系统服务价值进行了动态评价,并采用逐步回归分析法、通径分析方法探讨服务价值变化的主要驱动因子及其作用途径和强度.结果表明: 泉州湾河口湿地的主导服务为调蓄洪水、气候调节及食物供给服务;对泉州湾河口湿地生态系统主导服务价值变化直接影响最大的因子分别为供水量、海水养殖量和地区生产总值,其他驱动因子则通过间接影响作用于服务价值的变化.     

瘤体内注射凋亡素基因诱导人骨肉瘤S180细胞株凋亡研究

观察瘤体内注射凋亡素基因诱导人骨肉瘤S180细胞株凋亡的效果。利用脂体介导将重组质粒pCDNAVP3转染至荷瘤裸鼠肿瘤结节内。PCR和RT PCR检测结果表明 ,质粒可存在和持续表达 14d以上。抑瘤试验结果证实 ,凋亡素可抑制S180细胞的生长 ,抑瘤率达 2 7.2 %。TUNFL染色法检测结果表明 ,试验组的TUNEL阳性细胞率明显高于对照组。上述结果显示 ,所注射的凋亡素基因可诱导人骨肉瘤S180细胞株凋亡。     

铜绿假单胞菌生物膜和浮游菌的毒力表达差异

目的探究铜绿假单胞菌生物膜和浮游菌状态下毒力因子的表达差异。方法使用铜绿假单胞菌标准菌株PAO1,分别在生物膜(静置)和浮游菌(摇床)状态下培养,收集上清液,检测总蛋白酶、LasA和LasB弹性蛋白酶、鼠李糖脂、绿脓素、溶血活性;通过荧光定量PCR检测群体感应(quorum sensing, QS)系统相关基因的表达;同时,通过活菌计数检测PAO1在生物膜和浮游菌状态下的生长曲线。结果生物膜状态下,铜绿假单胞菌PAO1的总蛋白酶、LasA、LasB弹性蛋白酶、鼠李糖脂、绿脓素表达均增高(均P0.05),溶血活性增高(P0.05),生物膜和浮游菌状态下细菌生长曲线差异无统计学意义,QS相关基因rhlI、rhlR、rhlA、lasI、lasR、pqsA、pqsR表达增高(均P0.05)。结论铜绿假单胞菌PAO1在生物膜状态下毒力因子表达较浮游菌状态下增高。     

TLR4mAb 对急性溃疡性结肠炎模型大鼠TLR4、TNF-alpha、IL-1beta 表达的影响

目的：探讨Toll 样受体4 单克隆抗体（TLR4mA）对溃疡性结肠炎（UC）模型大鼠肠TLR4、TNF-alpha、IL-1beta表达的影响及其对 UC 的可能作用机制。方法：30只SD 大鼠随机分为正常对照组、模型组、TLR4mAb 干预组。模型组及TLR4mAb 干预组采用三硝 基苯磺酸（TNBs）法造模,TLR4mAb 干预组给予TLR4mAb10 ug 腹腔注射,正常对照组及模型组以生理盐水代替TLR4mAb 腹 腔注射,剂量及频次相同,第8 天处死全部大鼠。分别进行疾病活动指数（DAI）评分及组织病理学（HPS）评分,采用免疫组化法检 测结肠组织TLR4 的原位表达,酶联免疫吸附试验（ELISA 法）检测血清肿瘤坏死因子-alpha（TNF-alpha）、白细胞介素-1beta（IL-1beta）的浓 度。结果：模型组DAI及HPS 评分均明显高于正常对照组（P<0.05）,TLR4mAb 干预组较模型组有所缓解（P<0.05）。TLR4、TNF- alpha、IL-1beta在模型组表达均明显高于正常对照组,差异有统计学意义（P<0.05）,在TLR4mAb 干预组的表达均明显低于模型组,差异 有统计学意义（P<0.05）。结论：急性溃疡性结肠炎的发病与异常免疫反应有关。TLR4mAb 可影响肠黏膜TLR4 及下游炎症因子 TNF-alpha、IL-1beta的表达,减轻急性溃疡性结肠炎大鼠的肠道炎症反应。     

红树植物秋茄类黄酮代谢及其抗氧化活性对高盐胁迫的响应

以红树植物秋茄为试验材料,设置不同浓度NaCl(0、200和500mmol·L-1)处理的砂培实验,应用qRTPCR分析秋茄叶片中类黄酮物质合成上游的4个关键酶基因——苯丙氨酸解氨酶基因(PAL)、肉桂酸羟化酶基因(C4 H)、4-香豆酰辅酶A连接酶基因(4CL)和查尔酮合成酶基因(CHS)的转录水平,并对关键酶活性进行了分析,同时测定了幼苗生物量、钾钠离子含量、类黄酮含量及其抗氧化活性,以探讨秋茄耐盐性与类黄酮物质的关系,为揭示木本植物耐盐机制奠定基础。结果显示:(1)在盐处理条件下,秋茄叶片中PAL、4CL、C4 H和CHS4个关键酶基因的转录水平显著上调,PAL、4CL、C4H酶活性和CHS含量随着盐浓度的增加而明显上升。(2)与对照相比,秋茄根、茎、叶干重在盐处理3d和15d后均无显著变化,而秋茄株高仅在200mmol·L-1盐处理15d后显著增加,其余浓度和时间均未发现有显著性变化。(3)随着盐浓度的升高,秋茄叶片类黄酮含量显著增加,K+/Na+明显下降,丙二醛含量显著降低,活性氧自由基清除率显著增加。研究表明,盐处理加强了秋茄叶片中类黄酮代谢过程中相关酶基因的表达,类黄酮物质的累积有助于其抗氧化能力的提高,进而提高秋茄的抗盐性,维持盐胁迫下秋茄的正常生长。     

泌乳母兔体重变化及相关因素的研究

21只泌乳母兔根据其产仔数分为5个小组,进行一个月的饲养试验,试验结果表明,泌乳期间母兔的体重变化与产仔数关系各组差异不显著（P＞0．05）,与仔兔的增重呈正相关（r＝0．898）。母兔产仔后20日龄体重降到最低点,以后母兔体重开始逐渐恢复,而窝产仔数与个体初生重呈负相关（r＝-0．849）。     

NaCl胁迫对秋茄幼苗根系抗氧化系统的影响

为探讨红树植物秋茄(Kandelia candel)幼苗根系抗氧化系统对盐胁迫的生理响应,以Hoagland完全营养液沙培秋茄幼苗60 d后,用不同浓度NaCl处理秋茄根系1、3、5、7 d,对其生理生化指标的变化进行研究。结果表明,胁迫相同天数,200和400 mmol L~(-1) NaCl处理的秋茄根系O_2~(-·)和H_2O_2含量保持较低水平,而600 mmol L~(-1) NaCl处理的则明显增加;MDA含量在200和400 mmol L~(-1) NaCl处理下保持稳定,而600 mmol L~(-1) NaCl处理的显著升高;SOD、POD、CAT、APX和GR活性随NaCl浓度升高总体上表现先上升后下降的趋势,处理3和5 d后的酶活性均显著高于对照,而600 mmol L~(-1) NaCl处理7 d后的酶活性明显低于对照;AsA和GSH含量总体上均明显高于对照。因此,秋茄幼苗是通过根系功能较强的抗氧化系统清除活性氧以提高植株的耐盐性。