鼠伤寒沙门菌VI型分泌系统效应因子Rhs生物学特性分析

【背景】细菌的Ⅵ型分泌系统作为杀死真核捕食者或原核竞争对手的“武器”,其杀伤作用是通过释放有毒物质即效应因子来实现。尽管已发现一些效应因子,但大多数效应因子的功能仍然未知。【目的】研究rhs基因编码的效应因子Rhs对鼠伤寒沙门菌生物学特性的影响。【方法】利用Red同源重组的方法构建鼠伤寒沙门菌rhs基因缺失株及相应的基因回补株。通过试验分析比较亲本株与缺失株、回补株在生化特性、生物被膜形成、耐药性、细菌间竞争、抗血清补体杀菌能力、组织载菌量及感染小鼠后炎症因子IL-18、IL-1β释放量上的差异。【结果】效应因子Rhs不影响鼠伤寒沙门菌的生化代谢、生物被膜形成、耐药性及抗血清补体杀菌能力。细菌种间竞争试验中,基因缺失株CVCC541Δrhs1、CVCC541Δrhs2和CVCC541Δrhs1-2的竞争指数(competition index,CI)值分别为0.85、0.77和0.87,毒力均被轻度致弱。体内组织载菌量试验中,CVCC541Δrhs1、CVCC541Δrhs2和CVCC541Δrhs1-2基因缺失株在小鼠肝脏和脾脏中的细菌数均较亲本株明显下降(P<0.05);机体...     

人细胞间粘附分子1基因功能区Ⅰ、Ⅱ的克隆及高效表达

近几年的研究已表明,鼻息肉是一种以嗜酸性细胞浸润为主的鼻粘膜慢性炎症,如果抑制了嗜酸性细胞浸润,也就抑制了鼻息肉的生长。因而对嗜酸性细胞的生物学作用研究受到重视。在嗜酸性细胞选择性粘附、游走和聚集局     

鼠伤寒沙门氏菌Ⅵ型分泌系统相关基因敲除及其功能特性

Ⅵ型分泌系统(T6SS)是大多数革兰氏阴性细菌中都存在的一种重要的分泌系统,能介导细菌与细菌之间以及细菌和宿主细胞之间的相互作用,溶血素共调节蛋白(Hcp)和缬氨酸甘氨酸重复蛋白G(VgrG)是组成T6SS穿刺装置的重要组分。但鼠伤寒沙门氏菌Ⅵ型分泌系统的Hcp与VgrG在该菌入侵宿主细胞及抗吞噬过程中发挥的作用尚不十分清楚。【目的】本研究旨在利用基因敲除技术构建的鼠伤寒沙门氏菌hcp及vgrg基因缺失株体外接种真核上皮细胞和巨噬细胞,并以其亲本株作为对照,以研究Hcp及VgrG在该菌粘附、侵入上皮细胞及抗吞噬过程中所发挥的作用。【方法】通过优化Red同源重组系统操作过程中各个条件,建立一套快速敲除鼠伤寒沙门氏菌Ⅵ型分泌系统相关基因的操作系统,成功构建鼠伤寒沙门氏菌CVCC541的hcp及vgrg单基因缺失株、双基因缺失株及三基因缺失株,并用Hela细胞接种试验和菌落计数试验,评估不同菌株的粘附和侵袭能力;用小鼠巨噬细胞RAW 264.7接种试验,评估不同菌株的抗吞噬能力。【结果】与亲本株CVCC541粘附侵袭Hela细胞相比,基因缺失株CVCC541Δvgrg、CVCC541Δhcp2Δvgrg和CVCC541Δhcp1Δhcp2Δhcp3的粘附率分别为17.17%±2.1%、14.73%±2.5%和82%±3.7%;CVCC541Δvgrg、CVCC541Δhcp2Δvgrg和CVCC541Δhcp1Δhcp2Δhcp3的侵袭率分别为7.05%±1.05%、6.21%±1.35%和87%±3.25%;与亲本株CVCC541在小鼠巨噬细胞RAW 264.7中的存活相比,基因缺失株CVCC541Δvgrg、CVCC541Δhcp2Δvgrg和CVCC541Δhcp1Δhcp2Δhcp3的存活率分别为15.67%±2.9%、14.47%±1.87%和56.12%±3.48%。【结论】鼠伤寒沙门氏菌Ⅵ型分泌系统VgrG和Hcp对该菌入侵细胞和抗吞噬方面具有重要作用,该研究为鼠伤寒沙门氏菌通过六型分泌系统与宿主细胞相互作用的机制研究奠定了基础。     

肾移植术后患者同型半胱氨酸、肾功能和血脂水平的变化及其相关性分析

目的:分析肾移植术后患者血清的同型半胱氨酸(Hcy)、肾功能和血脂水平的变化和相关性,探讨其在肾移植术后评价肾功能的应用价值。方法:将2013年10月~2016年9月就诊于我院确诊慢性肾衰并进行肾移植手术的300例术后随访患者作为观察组,选择同期健康志愿者100例作为对照组。检测并比较两组Hcy、总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)水平。根据观察组患者Hcy水平的不同将其分成Hcy正常组与Hcy异常组,并对比两组患者的血脂指标水平;测定半胱氨酸蛋白抑制剂C(CysC)的水平并计算肾小球滤过率(eGFR);对观察组血清Hcy与eGFR值、血脂指标水平进行相关性分析,并采用Logistic回归分析分析观察组肾移植术后eGFR下降的影响因素。结果:观察组患者的血清Hcy、TC、TG、HDL-C、LDL-C水平均明显高于对照组(P0.05)。Hcy异常组血清LDL-C水平明显高于Hcy正常组,而HDL-C水平明显低于Hcy正常组(P0.05)。观察组患者血清Hcy与eGFR、HDL-C水平呈负相关关系(r=-0.573、-0.414,P0.05);与TG水平呈正相关(r=0.432,P0.05),与TC、LDL-C无相关(P0.05)。多元Logistic回归分析显示,Hcy、TG、LDL-C水平均与患者eGFR下降有关(P0.05)。结论:在肾移植术后,慢性肾衰患者的TG、LDL-C、Hcy水平均升高,且伴有eGFR水平的降低;肾移植术后肾功能的改变与血清TG、LDL-C、Hcy水平相关;检测肾移植患者血脂指标、Hcy的水平可以评估移植肾功能受损情况。     

经咬肌颌后路治疗髁突中低位骨折的疗效分析

目的:研究观察经咬肌颌后路对髁突中低位骨折的临床疗效分析.方法:将我院从2008年1月至2012年1月收治的200例髁突中低位骨折患者按随机数表法均分为实验组100例(采用经咬肌颌后路进行治疗),对照组100例(采用耳颞部入路治疗).随访跟踪1年,观察统计骨折恢复情况和治疗疗效及并发症.结果:实验组手术时间、住院时间、术后并发症发生率均低于对照组,组间差异在住院时间和术后并发症上有统计学差异(P＜0.05);实验组总有效率达90.0％,对照组为74.0％,组间差异有统计学意义(P＜0.05);实验组复诊率为19.4％,低于对照组26.1％,满意度78.5％,高于对照组66.3％,后遗症发生少于对照组,组间差异有统计学意义(P＜0.05).结论:经咬肌颌后路能有效治疗髁突中低位骨折,疗效值得肯定.