检测SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳中家蝇蛋白的新方法——海波银染法

介绍一种检测SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳中家蝇幼虫蛋白的新方法-海波银染法。该方法对传统银染方法中的试剂与步骤加以改进,省略了乙醇固定与洗涤步骤,只需20 min即可完成全部染色过程,且仅在国产分析纯试剂及普通操作条件下,灵敏度可达毫微克级水平。     

家蝇幼虫抗菌相关蛋白/多肽的诱导及抗菌活性分析

对家蝇Musca domestica 3龄幼虫进行针刺、带菌针刺、热激和超声4种处理,并于处理后不同时间分别收集提取家蝇幼虫体内耐热总蛋白,比浊法测定其抗菌活性,经逐步回归分析确定抗菌相关蛋白/多肽。结果表明,4种处理均能诱导家蝇幼虫产生抗菌物质,其中表观分子量为22 kD的蛋白对藤黄微球菌和大肠杆菌均有抗菌作用,50 kD,13 kD,26 kD,7 kD的蛋白抗菌活性具有专一性。还发现一种37 kD的蛋白对抗菌活性有负作用,推测它可能是促进细胞生长的物质。     

家蝇攻击素(Attacin)基因的克隆与表达

通过同源克隆策略并结合cDNA末端快速扩增(RACE)技术,克隆到了编码家蝇攻击素(Attacin)基因的全长cDNA序列(GenBank登陆号：AY460106),并对相应的氨基酸序列进行了序列比对,对系统关系等进行了生物信息学分析。家蝇Attacin的cDNA全长778bp,其中包括627bp的开放式读码框(ORF),44bp的5’末端非编码区(5’UTR)和107bp的3’末端非编码区(3’UTR),相应的蛋白产物含208个氨基酸,与其他双翅目昆虫的Attacin具有很高的相似性,约50％-70％。以邻接法(Neighbor-Joining,NJ)所构建的系统关系表明,家蝇的Attacin与其他双翅目昆虫的Attacin起源于共同的祖先。应用半定量RT-PCR的方法,研究家蝇幼虫在受到外源刺激后Attacin基因的表达,结果表明,在家蝇幼虫体内Attacin基因呈诱导型表达,表达水平随诱导时间和诱导源的不同而变化。     

昆虫抗菌肽的结构和功能研究现状

昆虫抗菌肽是昆虫血淋巴中的一类活性肽。在昆虫感染病菌或体壁受到损伤的情况下其脂肪体能迅速合成一系列抗菌活性物质并释放到血淋巴中发挥作用,抑杀多种致病菌、真菌、病毒等,但不破坏生物体的正常细胞。对昆虫抗菌肽的结构特征、生物活性及抗菌肽分子的作用模式的最新研究进展作了综述。     

不同提取工艺对家蝇幼虫蛋白粗提液抗菌活性的影响

利用不同条件提取诱导过的家蝇Musca domestica 3龄幼虫的总蛋白,并用平板扩散法测定所得蛋白粗提液的抗菌活性。结果表明,收集幼虫时的处死温度、沸水浴时间及提取液的pH值均对家蝇幼虫粗提液的抗菌活性有明显的影响。     

血清AFP、FT3联合NLR对人工肝治疗乙型肝炎病毒相关慢加急性肝衰竭患者短期预后的评估价值研究

摘要 目的：探讨血清甲胎蛋白（AFP）、游离三碘甲腺原氨酸（FT3）联合中性粒细胞/淋巴细胞比值（NLR）对人工肝治疗乙型肝炎病毒相关慢加急性肝衰竭（HBV-ACLF）患者短期预后的评估价值。方法：选取2018年1月~2021年7月期间我院收治的97例HBV-ACLF患者,均成功实施人工肝治疗,作为人工肝治疗组。将人工肝治疗组的患者根据入院后90 d是否生存分为生存组69例和死亡组28例。同期选取在我院行体检的健康志愿者70例作为对照组。对比人工肝治疗组、对照组AFP、FT3、NLR。对比生存组和死亡组血清AFP、FT3、NLR。多因素Logistic回归分析短期预后的影响因素,采用预测概率值的受试者工作特征（ROC）曲线分析血清AFP、FT3联合NLR比值对人工肝治疗HBV-ACLF患者短期预后的预测价值。结果：人工肝治疗组AFP、NLR高于对照组,FT3低于对照组,组间对比差异有统计学意义（P<0.05）。死亡组AFP、NLR高于生存组,FT3低于生存组,组间对比差异有统计学意义（P<0.05）。人工肝治疗HBV-ACLF患者的短期预后与感染、国际标准化比值（INR）、终末期肝病模型（MELD）、白细胞计数（WBC）、红细胞分布宽度（RDW）、总胆红素（TBIL）、肌酐（Cr）、血清钠、C反应蛋白（CRP）有关（P<0.05）。多因素Logistic回归分析显示,RDW、AFP、INR、NLR、TBIL均为人工肝治疗HBV-ACLF患者短期预后的危险因素,而FT3则为人工肝治疗HBV-ACLF患者短期预后的保护因素（P＜0.05）。AFP、FT3、NLR联合预测人工肝治疗HBV-ACLF患者短期预后的曲线下面积（AUC）大于AFP、FT3、NLR的单独预测。结论：RDW、AFP、INR、FT3、NLR、TBIL均为人工肝治疗HBV-ACLF患者短期预后的影响因素,且AFP、FT3、NLR联合预测此类患者短期预后转归的预测价值较高。