IL-2与金黄色葡萄球菌肠毒素A和B融合基因的克隆及表达

目的：IL-2与金黄色葡萄球菌肠毒素A和B融合基因的克隆及表达。方法：分别在金黄色葡萄球菌肠毒素A227Ala、B基因的两端克隆上两个酶切点Hind Ⅲ,Kpn Ⅰ。将IL-2基因突变,设计一段linker使之分别与SEA227Ala和SEB相连并克隆到PET表达载体中,在大肠杆菌DH5a（DE3）-Pass中表达。结果：表达的蛋白占总蛋白15%。结论：IL-2与金黄色葡萄球菌肠毒素A和B融合蛋白能在大肠杆菌中有效表达。     

金黄色葡萄球菌肠毒素B基因的克隆和在大肠杆菌中高效表达

利用PCR方法从金黄色葡萄球菌TSTw基因组DNA中扩增出约700bp的DNA片段,将之克隆到pGEM7Zf(+)载体上并转化大肠杆菌 DH5α菌株。重组质粒的测序结果表明克隆到了seb基因,它含有717bp（不包括N端81bp的信号肽编码区）,其核苷酸序列与文献报道完全一致。将其连接于表达载体7ZTS上,转化到大肠杆菌JM109（DE3）内。表达的SEB占总蛋白33.5%。      

金黄色葡萄球菌肠毒素A Asp227Ala基因的克隆及表达

目的：金黄色葡萄球菌肠毒素A Asp227ala基因的克隆及表达。方法：利用错配PCR方法,从含有金黄色葡萄球菌肠毒素A（Staphylococcal enterotoxn A,SEA)基因的质粒中扩增出约720bp的DNA片段,将其克隆到表达载体7ZTS中,并转化于JM109（DE3）。结果：重组质粒的测序结果表明,它含有702bp（不包括N端72bp的信号肽编码区）,其核苷酸序列与文献报道完全一致,推导的氨基酸序列显示227位的天冬氨酸已突变为丙氨酸。结论：该基因所表达的蛋白为可溶性蛋白,表达量占总蛋白51.5%。表达的蛋白与天然肠毒素A产生的抗体能发生凝集作用,具有与天然SEA类同的抗原活性。     

广西含羞草科和云实科一些植物结瘤状况的调查

调查了广西一些地区含羞草科植物34种,云实科植物39种,发现有瘤的植物分别为27种和6种,其中格木是首次报道有瘤,电子显微镜切片表明这些瘤是根瘤菌侵入所形成。     

改造稀有密码子提高SEA蛋白表达量

利用重叠PCR技术突变了sea基因上一个稀有密码子簇,将此段中稀有密码子全部更换成E.coli最常用密码子,得到sea^m。将sea和sea^m分别克隆于7ZTS表达载体上,并转化JM109（DE3）菌株。结果表明,sea基因的表达十分微弱,而sea^m基因的表达量十分高,约占菌体总蛋白的15 ％。表达产物在体内具有一定的抗肿瘤活性。     

金黄色葡萄球菌肠毒素A基因的克隆

利用PCR方法从金葡菌基因组DNA中扩增出约 80 0bp的DNA片段 ,将之克隆到pUC19 T载体上并转化E .coliDH5α菌株。重组质粒的测序结果表明 ,克隆到了sea基因 ,它含有 774bp的阅读框架 (包括N端 72bp的信号肽编码区 ) ,其核苷酸序列与文献报道完全一致。     

一株产絮凝剂的曲霉菌株的筛选

从排污沟的废水污泥中筛选到1株产絮凝剂的霉菌GXF9912.该菌株的最佳产絮凝剂时间为培养后72h;培养基的初始pH为6.0～6.5时,产生的絮凝剂活性较高;Ca     

罗汉松根瘤内生细菌的分离和特性

罗汉松Ｐｏｄｏｃａｒｐｕｓｍａｃｒｏｐｈｙｌｌｕｓ(Ｔｈｕｎｂ .)Ｄ .Ｄｏｎ是裸子植物亚门罗汉松科一种 ,在我国主产长江以南各省 ,为用材及园林绿化的优良树种 ,种子和根可入药。关于罗汉松根际微生物的研究 ,梁秀棠[1] 、花晓梅[2 ] 曾报道其根与菌根真菌共生形成外生或内生菌根。国外有学者发现 ,几种其它的罗汉松科植物Ｐ .ｎｕｂｉｇｅｎｕｓ等具有结瘤固氮现象[3～ 6] ,但对其与细菌共生形成根瘤以及根瘤内生细菌的分离鉴定至今国内外尚未见报道。作者在广西的南宁、桂林、扶绥及广东的佛山等地进行野外调查 ,证明罗汉松在自然界…