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Epstein-Barr病毒诱导永生化人上皮细胞恶性转化 总被引:3,自引:1,他引:2
为了使EB病毒能直接感染人上皮细胞,将pSG-CR2-Hyg载体转入永生化人上皮细胞(293细胞)中。通过间接免疫荧光法测定发现,转化的细胞表达EB病毒受体。用EB病毒感染CR2-293细胞后,23%的细胞可表达EB病毒抗原。用TPA作用于这些细胞后,表达病毒抗原的细胞数增加。用PCR法从EB病毒感染细胞DNA中扩增出EB病毒DNAW片段。在TPA持续作用下,EB病毒感染细胞的形态特征发生改变。把EB病毒感染细胞接种在裸鼠皮下,每周注射TPA,可诱导细胞在裸鼠体内形成肿瘤。经组织病理检查确诊,肿瘤为低分化上皮细胞癌。杂交试验证明,肿瘤组织细胞中有EB病毒EBERs存在。上述结果表明,EB病毒在TPA协同作用下,可诱导永生化上皮细胞恶性转化。 相似文献
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Epstein-Barr病毒潜伏膜蛋白(LMP)基因在哺乳动物传代细胞中的表达 总被引:2,自引:0,他引:2
EB病毒潜伏膜蛋白(LMP)是由病毒编码的主要的与病毒致宿主细胞潜伏感染有关的蛋白之一。我们用基因重组技术,把含有LMP基因(BNLF1)3个外显子(exon)开放阅读框架(ORF)的长1.80kbp的DNA片段,和能分解HygromycinB的含有SV40早期启动子和HgryomycinB磷酸转移酶全基因(长1025bp)的DNA片段(长1.60bp),同时重组于亚克隆载体pBluescriptSK(pBS)中,并使该重组质粒pBS-LMP-Hyg(长5767bp)在乳地鼠肾传代细胞(BHK)中获得表达。BHK细胞在经此重组质粒转染后,LMP阳性细胞是2%,在HygromycinB的持续压力下,LMP表达细胞率可达20%。3个月后,LMP表达细胞逐渐减少。5个月后,不能测到LMP表达细胞。经免疫荧光和蛋白印迹(Westemblot)实验证实,人鼻咽癌、风湿性关节炎和正常人血清中不含有抗LMP抗体。 相似文献
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应用基因重组技术,把编码EB病毒早期蛋白的BCRF1基因重组于真核表达载体pSG5中,并使该基因在乳地鼠肾(BHK)传代细胞中获得良好表达,表达率为0.5%。血清学实验证实,鼻咽癌、类风湿性关节炎病人和正常人血清中均不同程度地含有IgG/BCRF1抗体,抗体阳性率分别为92%、86%和77%,几何平均滴度(GMT)分别是1:16.35、1:14.72和1:10.15。两组病人和正常人血清中IgA/BCRF1抗体阳性率和滴度之间有较大差别,它们的阳性率分别是74%、71%和12%,GMT分别是1:12.32,1:10.56和1:2.35。还证实,鼻咽癌和类风湿性关节炎病人血清中IgA/BCRF1和IgA/EA(早期抗原)抗体阳性率和滴度间有很好的相关性,此为首次报导。重组表达质粒pSG5-BCRF1的构建和表达为进一步研究BCRF1基因在病毒感染和肿瘤免疫中的作用创造了条件。本文就质粒的构建和3组血清中IgA/BCRF1、IgA/BCRF1、IgA/EA和IgG/BCRF1抗体间的关系和有关问题进行了讨论。 相似文献
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Epstein—Barr病毒反义LMP1基因对鼻咽癌细胞CNE2株生长的抑制 总被引:3,自引:0,他引:3
将0.6kbLMP1前段基因反向插入逆转录病毒载体(pZIP)中,构建成pZIP-反义LMP1载体,再转入PA317包装细胞中,用G418筛选性克隆,获得产生1.7×10^5(CFU/ml)反杂交实验证实pZIP-反义LMP1载体基车整合到CNE2细胞的DNA中,并且有载体基因RNA的表达,观察反义LMP1基罟对CN#2细胞生长的影响,发现反义LMP1基因可降低细胞生长速度,减弱CNE2细胞在这果 相似文献
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Epsten—Barr病毒诱导永生化人上皮细胞恶性转化 总被引:3,自引:0,他引:3
为了使EB病毒能直接感染人上皮细胞,将PSG-CR2-Hyg载体转入永生化人上皮细胞(293细胞)中。通过间接免疫荧光法测定发现,转化的细胞表达EB病毒受体。用EB病毒感染CR2-293细胞后,23%的细胞可表达EB病毒抗原。用TPA作用于这些细胞后,表达病毒抗原的细胞数增加,。用PCR法从EB病毒感染细胞DNA中扩增出EB病毒DNAW片段。在TPA持续作用下,EB病毒感染的形态特征发生改变。把E 相似文献
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