miR-125b-5p促进分枝杆菌在宿主细胞和小鼠体内存活的研究

通过观察miR-125b-5p对分枝杆菌在宿主细胞和小鼠体内存活情况的影响,探究其在抗结核免疫过程中的作用。采用不同培养基对分枝杆菌进行培养并计数;以1640培养基加10%胎牛血清培养所有实验用细胞。将终浓度50 nmol/L的miR-125b-5p 模拟物、miR-125b-5p 抑制剂及磷酸盐缓冲液(PBS)对照加入细胞后,在不同时间点收集细胞。用分枝杆菌分别感染宿主细胞(A549、THP-1和RAW264.7)以及C57BL/6小鼠。采用定量聚合酶链反应检测miR-125b-5p的表达量。结果miR-125b-5p在分枝杆菌感染的多种宿主细胞及小鼠中都显著上调表达,其中小鼠肺部的表达量提高了约15倍。分别转染模拟物和抑制剂后,再用分枝杆菌感染细胞,结果发现miR-125b-5p可促进分枝杆菌在宿主细胞内的生长。当miR-125b-5p抑制剂注射到卡介苗(BCG)感染的小鼠体内时,小鼠体内的细菌载量显著降低(P<0.05)。本研究证明miR-125b-5p可调控分枝杆菌在宿主细胞及小鼠体内的生长,在抗结核免疫过程中发挥了重要作用。进一步对其作用机制的深入研究将为临床结核病的治疗提供理论指导。     

伤寒沙门氏菌SOD的提取及抗原性研究

经硫酸铵分级沉淀,ＤＥＡＥ纤维素柱层析提取了伤寒沙门氏菌ＳＯＤ。提取后酶的比活性为３２７０Ｕ／ｍｇ,经聚丙烯酰胺凝胶电泳,蛋白质染色及酶活性染色显示提取的ＳＯＤＣ达到了电泳纯。     

伤寒杆菌SOD抗体对小鼠腹腔吞噬细胞杀灭伤寒杆菌的影响

为了制备伤寒要直菌ＳＯＤ抗体,研究该抗体对小鼠腹腔吞噬细胞杀灭伤寒杆菌的影响,探讨ＳＯＤ与伤寒杆菌抗吞噬作用的关系。采用纯化的伤寒杆菌（Ｓｔｗｌ）Ｆｅ－ＳＯＤ免疫农兔制备兔抗Ｆｅ－ＳＯＤ抗体。利用ＥＡＬＩＳＡ法检测抗体的效价。免疫电泳、双向琼脂扩散试验和抗体对酶活性抑制试验分析抗体的特性。用不同浓度的抗体预先处理伤寒杆菌,然后进行小鼠腹腔吞噬细胞的吞噬杀菌试验。试验结果抗体的ＥＬＩＳ攻疚价为１：１     

鼻腔接种伤寒杆菌Fe-SOD对鼠伤寒杆菌攻击小鼠的免疫保护作用

为探讨鼻腔接种伤寒杆菌Fe-SOD对鼠伤寒杆菌攻击小鼠的交叉免疫保护作用,用IL－1作为佐剂,将伤寒杆菌Fe-SOD经鼻腔接种小鼠,再以不同剂鼠伤寒杆菌攻击,观察小鼠的存活情况,当用IL－1作为佐剂时,经鼻腔接种伤寒杆菌Fe-SOD的小鼠在2LD50鼠伤寒杆菌攻击后,3天和7天的存活率均明显高于对照组（P＜0．01或P＜0．05）,当以5LD50鼠直菌攻击时,小鼠7天的存活率明显高于对照组（P＜0．01）。结果说明伤寒杆菌Fe-SOD经鼻腔接种后对鼠伤寒杆菌的攻击可产生一定的免疫保护作用,也进一步说明了Fe-SOD是沙门氏菌的共同保护性抗原。     

结核免疫应答相关白细胞介素的作用机制研究进展

白细胞介素(简称白介素)能够调控免疫细胞的分化、增殖及效应功能。结核抗原特异性诱导的白介素的表达水平能够表征结核杆菌感染后的机体状态。在机体的抗结核免疫应答中,白介素可以直接调控吞噬细胞对胞内感染结核杆菌的杀菌活性;也能够调控效应性T细胞的增殖,并进一步激活吞噬细胞的杀菌功能。目前,部分白介素已被证明有望用于结核病的免疫辅助治疗,正在进行相关临床实验。本文对白介素调控免疫细胞抗结核免疫应答的研究进展进行综述,以期为制定结核病的白介素免疫辅助治疗方案提供指导。     

伤寒沙门氏菌SOD的提取及抗原性研究

经硫酸铵分级沉淀,ＤＥＡＥ纤维素柱层析提取了伤寒沙门氏菌ＳＯＤ。提取后酶的比活性为３２７０Ｕ／ｍｇ,经聚丙烯酰胺凝胶电泳,蛋白质染色及酶活性染色显示提取的ＳＯＤ达到了电泳纯。酶活性染色法和原子吸收分光光度法测定结果表明提取的ＳＯＤ为Ｆｅ－ＳＯＤ。双向琼脂扩散试验结果显示抗伤寒沙门氏菌Ｆｅ－ＳＯＤ血清与牛红细胞ＳＯＤ不形成沉淀线,提示伤寒沙门氏菌Ｆｅ－ＳＯＤ与牛红细胞ＳＯＤ无交叉反应,抗体对酶活性抑制试验结果显示抗Ｆｅ－ＳＯＤ血清可抑制伤寒沙门氏菌及鼠伤寒沙门氏菌的Ｆｅ－ＳＯＤ和Ｆｅ／Ｍｎ－ＳＯＤ活性,对Ｍｎ－ＳＯＤ活性无抑制作用,说明伤寒沙门氏菌和鼠伤寒沙门氏菌的ＳＯＤ之间有共同抗原,也提示ＳＯＤ的辅基似乎决定了其抗原特异性。