2018年河南省肠道病毒环境监测结果分析

通过对2018年河南省环境污水中肠道病毒(Enterovirus,EV)的持续监测,了解河南省环境污水中脊灰病毒(PV)和非脊灰肠道病毒(NPEV)的血清型分布及流行情况.选取了河南省东、西、南、北、中部的五个城市,对每个城市有10万～30万人共同使用的下水管网的地区进行污水采样,每两个月采集1次,每次采集两份污水样品,采集持续1年,对污水样品进行浓缩,将浓缩液接种至RD细胞、L20B细胞和HEp-2细胞进行病毒分离.对病毒分离物进行VP1区核苷酸序列测定分析,采用最大似然法构建系统进化树对EV进行分子定型,并进行核苷酸相似性分析.共采集污水样品60份,分离到EV阳性毒株16株(26.67％),分别为8株CVB5、3株E7、3株E11、1株CVB5+E11混合株;1株PVIII;环境监测标本与急性弛缓性麻痹(Acute flaccid paralysis,AFP)病例标本,在济源市和周口市分离到的CVB5比例有一致性,郑州市和济源市分离到的E7比例有一致性;污水标本中阳性毒株的检出时间要早于AFP病例标本中同种毒株型别的检出时间1～3个月.来源于AFP病例监测和环境监测的CVB5之间的核苷酸相似性为94.7％～99.6％,来源于AFP病例监测和环境监测的E7之间的核苷酸相似性为92.5％～100.0％.来源于AFP病例监测和环境监测的CVB5属于同一个基因型,E7也是同一个基因型,甚至是同一个病毒传播链.河南省2018年建立了环境监测方法,是AFP病例监测的有益的补充,也可对人类肠道病毒病流行或暴发进行预测和预警.     

肽N-糖苷酶的动力学分析方法

肽N-糖苷酶(peptide N-glycanase,PNGase，在人体中称为NGLY1)几乎存在于所有的活细胞中，可以催化切断糖蛋白或糖肽上天冬酰胺与N-糖链之间的糖苷键，被作为工具酶，广泛应用于糖蛋白组学研究中。同时，NGLY1在内质网相关的降解过程中是必不可少的，NGLY1缺乏可能会导致先天性糖基化障碍。酶促反应动力学的研究有助于发现或定向进化更丰富的工具酶以用于不同的分析策略，研究NGLY1突变型与疾病的关系，探索相关疾病机制或治疗策略。本文介绍了PNGase的发现、生理病理功能及其在糖蛋白组学中的应用，重点阐述各种PNGase动力学分析方法，包括比色法、高效液相色谱法、毛细管凝胶电泳法和液相色谱-质谱联用法，并总结了这些分析方法的优势和不足，为今后开发更简便、灵敏度更高的PNGase的动力学分析方法提供启发。