环氧树脂固定化的Bacillus sp.DL-2胞外蛋白酶在拆分(±)-乙酸苏合香酯中的应用

环氧基是一个非常活跃的基团,它能与酶、蛋白质和核酸等生物分子发生反应形成共价键,有利于生物分子的固定化。经共价结合法固定化的酶其稳定性及重复使用性可得到显著提高。用环氧树脂ES-103B为载体采用共价结合法对海洋细菌Bacillus sp. DL-2的胞外蛋白酶进行固定化,经过单因素实验优化条件得出最优固定化条件为:p H 8. 0的胞外蛋白酶溶液,25 g/L的ES-103B,45℃下反应8h。采用此最优条件下的固定化酶拆分(±)-乙酸苏合香酯制备出了e. e. p=97. 5%的(R)-1-苯乙醇(产率为45. 0%)和e. e. s=99. 2%的(S)-乙酸苏合香酯(产率为83. 9%)。该固定化酶拆分(±)-乙酸苏合香酯在重复使用8次后制备出的(R)-1-苯乙醇的e. e. p仍大于90%,且固定化胞外蛋白酶在4℃下具有较好的储存稳定性。     

一种蛋白质等电聚焦银染色方法

等电聚焦是蛋白质分析的一种常用方法。在实际工作中,常因一些生物材料蛋白含量太低,常规的考马斯亮蓝染色不能显示区带,给研究工作带来困难。人们曾考虑聚焦后用超敏感的硝酸银染色法克服之,但因聚焦后凝胶上含有Ampholine而往往不能得到满意的结果。我们经过一段时间的摸索,染色获得成功。现简介如下。 一、固定与浸泡     

双向电泳中一向胶条的一种简易保存方法

做双向电泳常遇到第一向胶条(等电聚焦后的凝胶)的保存问题。有介绍将一向胶条低温保存,通常是普通冰箱冰格层,但若放不好,胶条会变形且很难恢复。有介绍将一向胶条存于液氮中,这代价较大,也较烦,在一般实验室做不到。把一向胶条长期放在水中保存也不好,一则容易长菌,二则胶条多了不易保管。 我们试将一向胶条(这里仅指平板聚焦电泳后的     

水稻根际固氮菌与水稻根愈伤组织联合固氮体系的研究初报

组织培养法应用在豆科和非豆科共生体系的研究中已有报道,但应用于水稻与根际固氮菌联合共生的研究中至今还未见。我们在探讨水稻根际联合固氮体系的植物细胞与细菌的关系中,采田了水稻根组织培养的方法,建立了愈伤组织水平上的联合固氮体系。初步结果表明这种方法用在水稻的联合固氮研究中是可行的,并取得了有意义的结果,现报道如下。     

中国石蕊科地衣研究之——筛蕊属的订正研究

本文对产于中国的筛蕊属地衣在形态与化学方面进行了比较研究,订正了文献中一些错误鉴定及分布方面的错误记载。 研究结果表明,筛蕊属地衣在中国只有一种,即聚筛蕊：Cladla aggregata(Sw·)Nyl。其主要特征为拟果柄不肿胀,分棱多,筛孔少而排列不整齐以及只含有巴巴酸等。至于云南的变种stramiuea实际上为一生态型,无分类学意义。浙江的Cetraria aculeata Fr 为聚筛蕊的错误鉴定。根据现有知识,本种分布区的北界在朝鲜为北纬38。,在日本为北纬37。,在中国为北纬31。,而非北纬44。(黑龙江虎林)。     

水稻的氮素利用效率与品种类型的关系

分蘖末期测定,90个稻品种氮利用效率(地上部于重mg/mgN)有明显差异。最大差异达77.4％。氟利用效率的总趋势为:古老地方品种>现代有成品种,高秆品种>矮秆品种,但有例外。籼、粳稻间无规律性差异。高氮效品种的叶绿素含量明显较低,而光合速率则下降不显著。株高、叶色和叶绿素含量可作为预测水稻品种氮利用效率的指标。     

华东植物区系成分与日本植物间的联系

华东和日本两地为东亚地区重组成部分,同属于中国－日本森林植物亚区。两地植区物系成具有较高的相似性。两地共有连香树科（Ｃｒｃｉｄｉｐｈｙｌｌａｃｅａｅ）、三尖杉科（Ｃｅｐｈａｌｏｔａｃｅａｅ）、领春木科（Ｅｕｐｔｅｌｅａｃｅａｅ）、旌节花科ǎ樱簦幔悖瑁酰颍幔悖澹幔澹┑榷翘赜锌啤;腿毡玖降毓灿惺粼迹叮福岸嗍簟Ｈ缌迹ǎ茫颍穑簦铮恚澹颍椋幔⑺荆ǎ模椋螅幔睿簦瑁酰螅⑿」炊ǎ拢澹颍悖瑁     

t-PA cDNA在CHO细胞中的高效稳定表达

我们曾报道t-PA mRNA非翻译区序列对其表达有明显的抑制作用,在此基础上,通过对5′-UTR及3′-UTR的改造,使t-PA在COS-7细胞中的表达水平提高30倍左右。将t-PA表达质粒用电击法转染中国仓鼠卵巢细胞二氢叶酸还原酶缺陷株(CHO-dhfr),经过混合加压及筛选,在CHO细胞中高效表达了t-PA,表达水平达到5000～6000 IU/10~6细胞/24hr。重组t-PA具有与天然t-PA相同的分子量及酶活性。经过8个月连续传代,表达水平未下降,表明细胞株是稳定的,其主要指标均符合工程细胞株的要求。     

粘红酵母产L—苯丙氨酸解氨酶的条件和酶法合成茶丙氨酸的研究

研究了粘红酵母中Ｌ－苯丙氨酸解氨酶的产酶条件及用此酶把反式肉桂酸转化成苯丙氨酸的条件。结果表明,在下列培养基及培养条件下ＰＡＬ的活力较高,酵母膏１０．０蛋白胨１０．０,ＮａＣ１５．０,ＫＨ２ＰＯ４０．５,苯内氨酸０．５,（ｎｈ４）２ＳＯ４１．０,葡萄糖５．０,ｐＨ６．０－６．５,培养温度为３０℃。转化过程中,（ＮＨ＾＋４）对初速度的影响符合米氏方程,其Ｋｍ和Ｖｍａｘ分别为１６．８５ｍｏｌ／Ｌ和５．