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目的建立大肠埃希菌(Escherichia coli,E.coli)蛋白指纹图谱,为Ecoli感染快速诊断奠定基础。方法收集临床分离E.coli88株,提取细菌DNA,PCR检测Ecoli 16S rRNA。蛋白提取液提取细菌蛋白,干化学法测蛋白浓度,应用表面增强激光解析电离飞行时间质谱技术(SELDI-TOF-MS)检测Ecoli蛋白,采用Ciphergen Pro-teinchip软件自动采集数据。重复测定20次Ecoli混合标本,评价SELDI检测Ecoli蛋白分子量的重复性。结果E.coil标准菌株ATCC 25922和临床分离株均可检出16S rRNA。AU芯片能捕获近30个E.coli蛋白峰,其中19个蛋白峰构成E.coli特征性蛋白指纹图谱,各蛋白峰在临床分离E.coli间分子量变异系数≤0.2%。SELDI重复检测20次E.coli混合标本显示同一蛋白峰的分子量变异系数≤0.05%。结论E.coli在分子量3~20kD范围内具有特征性蛋白指纹图谱,为快速诊断E.coli感染提供了新思路。 相似文献
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