pcDNA3.1(-)-Bcr-Abl及pcDNA 3.1(-)-Bcr-Abl T3151突变质粒真核表达载体的构建

目的:将Bcr-Abl及Bcr-Abl T3151突变克隆入pcDNA3.1(-)真核表达载体,为研究靶向降解受体型酪氨酸激酶BCR-Abl,抑制肿瘤细胞生长提供研究基础.方法:pcDNA3.1 (-)-Bcr-Abl质粒构建:分别设计引物,通过分段PCR将BCR-ABL克隆入pcDNA3.1(-).首先通过PCR扩增出Bcr-a片段,将其克隆入pcDNA3.1(-)的NheⅠ/XhoⅠ之间;接着将PCR扩增出的Abl-c片段克隆入KpnⅠ/ HindⅢ之间,最后XhoⅠ/KpnⅠ双酶切pGD210,将酶切下片段插入pcDNA3.1(-)的相应位点即可.酶切鉴定及测序正确后,转染293T细胞,Western blot验证质粒的表达.pcDNA 3.1(-)-Bcr-Abl T3151的突变质粒:首先设计引物,第一步以pcDNA3.1(-)-BCR/ABL为模板,以Abl-c-u和ba-M1为引物扩增出A-1:560 bp.第二步,相同模板,以ba-M2和ba-M-down为引物扩增出A-2:870 bp.第三步,以扩增出的A-1和A-2为模板,以Abl-c-u和ba-M-down为引物,扩增出1434 bp的片段A-l+2,以Bcl和Kpn Ⅰ分别酶切pcDNA3.1 (-)-BCR/ABL以及A-1+2,将突变后的A-l+2置换入pcDNA3.1 (-)-BCR/ABL.结果:PCR结果显示3.1(-)-Bcr-Abl及3.1 (-)-Bcr-Abl T3151突变质粒条带大小符合,重组质粒经酶切鉴定和测序结果正确,转染后可见融合蛋白的表达.结论:成功构建pcDNA3.1 (-)-Bcr-Abl及pcDNA 3.1(-)-Bcr-Abl T3151的真核表达载体,并且转染293T细胞后证实其能够正确表达,为后续研究奠定了基础.     

参芪扶正注射液对急性淋巴细胞白血病化疗患者造血和免疫功能的影响

目的:观察参芪扶正注射液对急性淋巴细胞白血病化疗患者造血及免疫功能的影响。方法:收集96例处于初治诱导缓解治疗阶段的急性淋巴细胞白血病患者,并将其随机分为治疗组和对照组。治疗组48例患者在进行常规化疗的同时给予参芪扶正注射液250 m L,1次/天,共28天;对照组48例患者仅接受常规化疗,两组患者均给予相同的支持对症治疗。治疗结束后,观察两组患者的疾病缓解率、治疗前后造血系统、T和B淋巴细胞亚群的变化情况。结果:化疗结束后,治疗组患者的疾病缓解率为89.6%,对照组为83.3%,两组比较无统计学差异(P0.05);化疗14天及化疗结束后1周,治疗组患者的白细胞、红细胞计数和血红蛋白水平明显高于对照组(P0.05);且化疗结束后1周,治疗组患者的CD3+、CD4+及CD4+/CD8+含量均明显高于对照组(P0.05)。而两组患者治疗前后的血小板计数、CD3-CD19+含量比较均不具有统计学差异(P0.05)。结论:参芪扶正注射液辅助治疗不仅能够改善化疗所致的急性淋巴细胞白血病患者的骨髓抑制,而且能够提高其细胞免疫功能,有助于患者化疗后的恢复。     

参麦注射液对于白血病骨髓抑制期的治疗作用

目的:探讨参麦注射液对于白血病骨髓抑制期的治疗作用。方法:选取我院2011年1月至2012年12月收治的白血病的患者47例,随机分为两组,观察组24例化疗的同时给予参麦注射液,观察组患者23例只给予化疗,比较两组患者化疗后的骨髓抑制情况和感染发生情况。结果:两组患者化疗效果显示总有效率分别为66.7%和65.2%,无显著差别(P0.05)。两组患者化疗骨髓抑制后WBC,Hb,PLT的恢复时间分别为(6.32±2.75)天,(9.32±2.12)天和(7.31±3.21)天,明显低于对照组(11.34±4.34)天,(12.54±3.21)天和(12.41±4.32)天,差异显著有统计学意义(P0.05);观察组患者中性粒细胞ANC0.5×109/L持续的时间明显少于对照组,差异明显有统计学意义(P0.05);观察组患者发生感染的比例明显低于对照组,差异显著有统计学意义(P0.05)。结论:参麦注射液可以明显减轻白血病化疗后的骨髓抑制现象,有效保护骨髓的造血功能,缩短骨髓受抑制时间,和降低感染率,明显提高患者生活质量。     

PAD方案治疗75例初诊多发性骨髓瘤疗效观察

目的:PAD方案已成为目前多发性骨髓瘤(MM)治疗的一线方案,国内外就其疗效和不良反应发生均有报道,本实验旨在观察并探讨PAD方案治疗我中心初诊多发性骨髓瘤患者的疗效和不良反应,为临床工作提供参考。方法:我科75例初诊多发性骨髓瘤患者给予PAD方案4-6疗程,评估疗效及不良反应。结果:75例患者接受PAD方案化疗,四疗程后总有效率(CR+VGPR+PR)为73.3%,其中CR 5例,占6.7%,VGPR 12例,占16%,PR 38例,占50.7%;无效例数为20例,占26.7%,其中SD 17例,占22.7%,PD 3例,占4%;1年总生存率为75%,2年总生存率为62.7%。血液学不良反应有白细胞降低34例(45.3%),血小板降低10例(13.3%);非血液学不良反应有周围神经系统症状25例(33.3%),疱疹病毒感染7例(9.3%),消化系统症状15例(20%),乏力14例(18.7%),呼吸系统症状29例(38.7%),激素相关症状3例(4%)。绝大部分患者可以耐受且完成相应化疗疗程。结论:我中心PAD方案疗效令人满意,不良反应可耐受,同国内外报道的疗效反应率相近,不良反应发生率更低,是治疗多发性骨髓瘤的首选方案。     

骨髓瘤细胞中阿霉素诱导的ATP变化与自噬的关系

目的：检测用阿霉素（doxorubicin DOXO）处理的骨髓瘤细胞株NCI-H929中ATP与自噬表达水平的变化,探讨两者之间的关联。方法：分别以DOXO 2umol/l 24h、DOXO 2umol/l联用自噬抑制剂3MA 10mmol/l 24h处理H-929细胞后,采用MTT法检测细胞存活率;ATP生物发光法检测ATP表达量;Western Blot检测靶细胞自噬标志分子LC3蛋白的表达。结果：各组相对未处理组存活率分别为54%、35%;相对未处理组%ATP分别为400%、150%;DOXO 24h LC3表达显著上调。结论：经DOXO处理H-929细胞系自噬形成,进而ATP上升以保护细胞。     

26例新西兰白兔正常骨髓像观察

检测了第四军医大学实验动物中心提供的 2 6只成年健康新西兰白兔的骨髓像 ,对国内不同品种兔骨髓像资料加以补充和丰富。1　材料和方法　按照施新猷所著医学动物实验方法中健康兔的判断标准 ,取 2 6只健康新西兰白兔 ,年龄 8～ 18个月 ,体重1 85～ 3 4 5ｋｇ。常规 3 %戊巴比妥钠 ( 3 0ｍｇ ｋｇ)腹腔内麻醉 ,剪去术区毛发 ,无菌条件下在每只兔左侧胫骨前内侧骨面距胫骨平台 (即胫骨近侧关节面 ) 0 8～ 1 5ｃｍ范围内用骨穿针穿刺抽取 0 2～ 0 4ｍｌ不抗凝骨髓 ,立即涂片 3张做瑞氏染色 ,油镜下计数 5 0 0个有核细胞 ,并鉴定细胞种类及…     

人类免疫缺陷病毒阴性的阴道残端浆母细胞淋巴瘤一例并文献复习

目的:浆母细胞淋巴瘤(PBL)为罕见的、侵袭性极强的B细胞淋巴瘤,好发于HIV阳性患者的口腔,本文报道了目前国内外首例HIV阴性的原发于阴道残端的PBL,并通过文献复习总结了PBL的临床病理学特征、诊断及鉴别诊断、治疗及预后。方法:回顾分析该病例的临床病理学资料,并结合国内外相关文献进行讨论。结果:该患者诊断明确,HIV阴性,以阴道残端起病,免疫组化示MUM-1阳性,不表达CD20、CD79a和PAX-5,Ki-67阳性率73%。EBER原位杂交阴性。分子学诊断结果示:样品免疫球蛋白基因发生克隆性重排,未检到TCR基因克隆性重排。CHOP样方案疗效不佳,部分缓解后疾病快速进展。该患者从确诊至死亡时间为10.3个月。结论:PBL罕见,病情进展迅速,预后差,生存期短,在进行阴道残端肿瘤的诊断及鉴别诊断时,阴道残端PBL应纳入鉴别范围。     

参麦注射液对于白血病骨髓抑制期的治疗作用

目的：探讨参麦注射液对于白血病骨髓抑制期的治疗作用。方法：选取我院2011 年1 月至2012 年12 月收治的白血病的患者47 例,随机分为两组,观察组24 例化疗的同时给予参麦注射液,观察组患者23 例只给予化疗,比较两组患者化疗后的骨髓抑制情况和感染发生情况。结果：两组患者化疗效果显示总有效率分别为66.7%和65.2%,无显著差别（P〉0.05）。两组患者化疗骨髓抑制后WBC, Hb, PLT 的恢复时间分别为（6.32± 2.75）天,（9.32± 2.12）天和（7.31± 3.21）天,明显低于对照组（11.34± 4.34）天,（12.54± 3.21）天和（12.41± 4.32）天,差异显著有统计学意义（P〈0.05）;观察组患者中性粒细胞ANC〈0.5× 10^9/L持续的时间明显少于对照组,差异明显有统计学意义（P〈0.05）;观察组患者发生感染的比例明显低于对照组,差异显著有统计学意义（P〈0.05）。结论：参麦注射液可以明显减轻白血病化疗后的骨髓抑制现象,有效保护骨髓的造血功能,缩短骨髓受抑制时间,和降低感染率,明显提高患者生活质量。     

贞芪扶正颗粒对去甲氧柔红霉素联合阿糖胞苷方案治疗成人急性髓系白血病疗效及毒副反应的影响

目的:研究贞芪扶正颗粒对去甲氧柔红霉素联合阿糖胞苷方案治疗成人急性髓系白血病疗效及毒副反应的影响。方法:选取我院2006年2月~2012年8月期间收治的成人急性髓系白血病患者134例,并将其随机分为对照组与观察组。对照组采用去甲氧柔红霉素+阿糖胞苷方案规范诱导缓解治疗,观察组在对照组治疗方案上加用贞芪扶正颗粒,观察和比较两组的临床疗效及不良反应的发生情况。结果:对照组与观察组的完全缓解率(CR)分别为73.2%(41/56)和79.5%(62/78),中位OS分别为13.9个月和14.6个月,两组比较差异均无统计学意义(P0.05)。观察组III级以上的骨髓抑制现象的发生率显著低于对照组(P0.05),粒细胞最低值显著高于对照组(P0.05),粒细胞缺乏和血小板降低持续的总体时间均明显短于对照组(P0.05);观察组各主要感染部位的发生率及感染总体发生率均显著低于对照组(P0.05);观察组各种主要非血液学毒副反应包括呕吐、腹泻、肝毒性、肾毒性、神经毒性、心率失调、口腔炎症、皮疹及发热等的发生率显著低于对照组(73.1%vs.100%,P0.05)。结论:贞芪扶正颗粒能够有效改善去甲柔红霉素联合阿糖胞苷方案治疗成人急性髓系白血病的毒副反应,且不影响其临床疗效。     

急性白血病细胞中抗凋亡蛋白bcl－2及其mRNA的表达

采用免疫组织化学与原位杂交方法检测了２５例急性髓系或淋巴系白血病骨髓活检组织及６种白血病细胞株中ｂｃｌ－２蛋白及其ｍＲＮＡ水平。结果２１例白血病标本中存在ｂｃｌ－２蛋白及其ｍＲＮＡ的一致性高表达;５种白血病细胞株（ＣＥＭ、Ｒａｊｉ、ＨＬ－６０、Ｕ９３７及Ｋ５６２）均能表达一定水平的ｂｃｌ－２蛋白及其ｍＲＮＡ（Ｍｏｌｔ－４例外）。提示ｂｃｌ－２基因的功能状态与淋巴造血系统肿瘤密切相关。