Pfu DNA聚合酶的表达条件优化及纯化研究

Pfu DNA聚合酶是分子生物学研究中最常用的高保真DNA聚合酶之一。本研究对重组菌株的Pfu酶基因表达条件进行优化,以提高Pfu DNA聚合酶的表达效率。通过在菌液深度OD600=0.87时加入1.5 mmol/L的IPTG进行诱导培养,诱导培养时间为11.03 h,用酶溶法对重组菌株进行破胞提取粗酶液,经热变性法与盐析沉淀法对杂酶进行纯化,最后经过透析后得到纯酶。采用考马斯亮蓝G-250法对酶进行含量测定及SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)检测纯度,最后使用PCR反应检测提纯后的Pfu酶的活性。结果表明优化处理后制备的Pfu DNA聚合酶,其纯度、酶活性和酶特异性均达到市售的Pfu DNA聚合酶水平。本研究为Pfu DNA聚合酶的开发和利用奠定了基础。     

以工作过程为导向的《食品微生物学实验》课程设计及教学实践

基于现代职业教育和我国应用型高校转型发展的大背景,探讨了"工作过程导向"的实验课程教学改革在应用型本科院校实施的适用性。以广东石油化工学院食品科学与工程系开设的《食品微生物学实验》课程为例,论述了本门课程开展"工作过程导向"的课程改革的重要性和必要性,具体介绍了课程设计和教学实践的教改经验。结果显示,实施教学改革后,本课程的教学效果得到了较大改善,学生就业普遍受到用人单位认可;改革实施过程中还存在诸多问题,后续教学过程中将寻求一切可能的解决办法,坚持不懈继续完善以"工作过程为导向"的课程改革和建设。