柑橘大实蝇觅食高峰期成虫量与产卵痕率的关系模型研究

【目的】通过研究柑橘大实蝇Bactrocera minax觅食高峰期成虫发生量与产卵痕率的关系,为柑橘大实蝇的预测预报和综合防治提供理论指导。【方法】通过调查柑橘大实蝇觅食高峰期在全田、橘园、杂树林、橘园与杂树林交界带和橘园中心的诱虫量和产卵痕率,建立二者在不同观测区域上的回归方程,为根据柑橘大实蝇觅食高峰期成虫发生量来预测产卵痕率,进而根据产卵痕率确定成虫期防治指标提供理论基础。【结果】除了果园周边杂树林中柑橘大实蝇觅食高峰期成虫诱捕量的线性回归与非线性回归的分析均不理想,不适宜用于产卵痕率的预测外,其他观测区域柑橘大实蝇觅食高峰期成虫诱捕量与果实产卵痕率建立的线性回归与非线性回归方程的拟合效果好,可以作为产卵痕率的预测模型。但不同区域的拟合效果存在差异,其中橘园中心成虫量与产卵痕率回归方程拟合效果(R~2=0.957 5,RMSE=1.623)最好,其他依次分别是:整个橘园成虫量(R~2=0.945 4, RMSE=1.859),全田成虫量(R~2=0.898 2,RMSE=2.535),交界带成虫量(R~2=0.851 5,RSME=3.038)。【结论】这些回归方程均能够较好的预测产卵痕率。考虑到防治需要,可以在橘园中心设置诱捕点,以觅食高峰期的成虫量(x)预测产卵痕率(y),y=0.031 3x~3-1.306 5x~2+17.206 0x-17.036,达到为柑橘大实蝇预测预报和综合防治提供理论指导的目的。     

定点突变改变近平滑假丝酵母SCRⅡ催化苯乙酮衍生物底物谱

【目的】通过定点突变技术,改变近平滑假丝酵母短链羰基还原酶Ⅱ(SCRⅡ)催化苯乙酮衍生物的功能,为数种手性芳香醇的生产提供一种高效、安全的新型制备方法。【方法】通过氨基酸序列和蛋白结构比对的方法,选择SCRⅡ的底物结合域中关键氨基酸位点E228实施突变,构建相应的突变株Escherichia coliBL21/pET28a-E228S;以苯乙酮衍生物为底物,对突变株的酶活和生物转化功能进行了分析。【结果】酶活测定结果表明:突变株E.coli BL21/pET28a-E228S催化原始底物2-羟基苯乙酮的酶活仅为原始酶活的25%左右;而催化苯乙酮、4’-甲基苯乙酮、4’-氯苯乙酮的酶活是突变前的7-20倍。突变株E.coli BL21/pET28a-E228S生物转化2-羟基苯乙酮,获得产物(S)-苯基乙二醇的得率不超过10%,而以苯乙酮、4’-甲基苯乙酮、4’-氯苯乙酮为底物时,生物转化产物光学纯度维持在99%,得率高达80%以上。【结论】对底物结合域中的关键氨基酸实施突变,提高了SCRⅡ催化苯乙酮衍生物的底物广谱性,拓展了该酶的生物功能,为理性改造短链羰基还原酶的不对称还原催化功能和手性芳香醇的制备提供了新型途径。     

mRNA翻译起始区二级结构优化提高(R)-羰基还原酶的表达及催化效率

为了提高近平滑假丝酵母(Candida parapsilosis CCTCC M203011)的(R)-羰基还原酶在大肠杆菌中的表达水平及催化效率,对酶编码基因mRNA翻译起始区中+1～+78区进行二级结构的优化,并构建了相应的突变体。优化后mRNA翻译起始区的发夹结构明显减少,自由能显著下降(由原始的?9.5kcal/mol降至?5.0kcal/mol),使酶蛋白的表达水平及粗酶比活力分别比优化前提高了4～5倍和61.9%。在高底物浓度(5.0g/L2-羟基苯乙酮)下,优化突变株不对称转化效率较高,产物(R)-苯基乙二醇的光学纯度和产率分别为93.1%e.e.和81.8%,比优化前提高了27.5%和40.5%。研究结果表明:优化mRNA翻译起始区的二级结构,克服蛋白翻译启动的空间位阻,不仅能促进翻译的顺利进行,使目标蛋白得到高效表达,而且有利于蛋白空间结构的正确折叠,有效提高酶蛋白活力及生物催化功能。     

鸡腿蘑胞外多糖的形貌结构及分子量动态变化与抗氧化的相关性研究

对鸡腿蘑多糖的结构进行检测,并在此基础上探讨结构与活性的关系,对深度发掘鸡腿蘑多糖的功效具有重要意义。制备发酵时间为72 h、96 h和120 h的鸡腿蘑胞外粗多糖,采用PMP柱前衍生化-HPLC法分析其单糖组成,结果表明发酵72 h、96 h和120 h胞外多糖均由D-甘露糖、L-鼠李糖、D-葡萄糖、D-半乳糖、D-阿拉伯糖组成,但各单糖的相对摩尔比不同。采用扫描电子显微镜和原子力显微镜对不同发酵时间的多糖形貌结构进行分析,结果显示发酵120 h多糖的板状结构更加规则,多糖分子的聚集作用更强。采用高效凝胶过滤色谱法对不同发酵时间的鸡腿蘑胞外多糖的分子量分布情况进行分析,结果显示发酵120 h的多糖分子量更大,分布范围更广。体外抗氧化试验结果显示,在相同浓度下,发酵120 h多糖的抗氧化活性较发酵72 h和96 h的多糖强。研究结果表明鸡腿蘑胞外多糖的抗氧化活性可能与其形貌结构和分子量分布有关。     

炙甘草汤通过抗氧化抑制博莱霉素诱导的小鼠肺纤维化

摘要 目的：探讨炙甘草汤对特发性肺纤维化（Idiopathic pulmonary fibrosis,IPF）小鼠纤维化相关指标的影响,挖掘炙甘草汤治疗IPF的机制。方法：将60只SPF级ICR小鼠随机分为空白组、模型组、吡菲尼酮组和炙甘草汤组,除空白组外,其余组采用气管滴注博莱霉素（5 mg/kg)方法复制IPF小鼠模型,并给予相应的药物治疗。空白组和模型组小鼠灌胃生理盐水,吡菲尼酮组和炙甘草汤组小鼠分别灌胃吡菲尼酮(50 mg/kg)和炙甘草汤（25.4 g/kg）,各组均连续给药4周后取材,记录各组小鼠的死亡情况,计算各组肺系数;观察肺组织切片病理变化;碱水解法检测肺组织羟脯氨酸（HYP）含量;比色法检测肺组织丙二醛（MDA）含量、超氧化物歧化酶（SOD）和谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）的活性;免疫组化、荧光定量PCR检测α-SMA、COL1A蛋白和mRNA的表达水平。结果：炙甘草汤组小鼠死亡数减少,肺系数显著降低（P＜0.01）,炎性细胞浸润和胶原沉积面积大量减少,肺泡结构逐渐修复,HYP、MDA含量降低（P＜0.01）,SOD活性（P＜0.05）和GSH-Px活性（P＜0.01）显著增强;α-SMA、COL1A蛋白和mRNA表达均降低（P＜0.01）。结论：炙甘草汤通过抑制氧化应激反应,从而抑制成纤维细胞活化,减少细胞质基质沉积,从而减缓IPF疾病进程。     

穗醋栗种质资源表型多样性分析及鲜食资源评价

以国家果树种质(公主岭)寒地果树资源圃保存的88份穗醋栗资源为研究对象,分析21个表型性状多样性指数、标准差、变异系数和极值,分析资源表型多样性,并以百果重、可溶性固形物、风味为指标,结合口尝鼻嗅评价,筛选适宜鲜食资源。结果表明,88份资源非数值型性状的Simpson指数和Shannon-Weaver指数变化范围为0.13~0.74和0.46~2.10,数值型性状的Simpson指数和Shannon-Weaver指数变化范围为0.19~0.87和0.46~3.16,21个性状中,花序着生状态、果皮厚度、果肉颜色、果实风味、果实质地、百果重、可溶性固形物、花序长度、叶片宽度和叶柄长度的多样性指数较高,表明穗醋栗资源表型多样性较为丰富。筛选出5份鲜食资源:11C-18(实生后代)、Pigmei、11C-22(实生后代)、大粒甜(Bona)、布劳德(Brodrop)。     

微生物耐砷机理及其在砷地球化学循环中的作用北大核心CSCD

砷是一种无处不在的有毒类金属,其强致癌性引起了人类的广泛关注。在自然环境中,砷的转化存在物理化学过程和生物过程,其中微生物介导的砷转化是环境砷行为的主要影响因素。微生物的耐砷特性与砷吸收、氧化还原、甲基化、区隔化和外排等过程密切相关。砷在微生物体内的转运转化主要与砷解毒有关,但某些微生物可利用氧化还原过程产生的能量以维持其生长需求。本文综述了微生物介导的砷吸收、转化、区隔化和外排机制,这对阐明砷的地球化学循环过程及指导砷污染土壤和水体修复、阻控农作物砷吸收等方面具有重要意义。     

利用单基因组扩增法对马传染性贫血病毒疫苗株异质性的分析

前期研究发现,马传染性贫血病毒（Equine infectious anemia virus EIAV）中国弱毒疫苗株并非单一病毒,而是由多种准种（quasispecies）组成的种群。阐明该疫苗株的具体构成,对于确定优势疫苗株和分析其在体内的进化具有重要意义。本研究比较了传统RNA病毒测序法（即bulk PCR）和单基因组扩增法（Single-genome Amplification, SGA）在扩增EIAV疫苗株囊膜表面蛋白gp90基因 V3~V5区序列上的差异。结果发现,利用SGA法和bulk PCR法获得的序列在组内差异率分别为1.84%和1.88%。进一步序列比较发现,SGA法扩增的序列中除了含有与bulk PCR法中同源性较高的序列外,还存在bulk PCR法未检出的含强毒株LN40特异性位点,以及单个氨基酸缺失的序列。上述序列的存在为该疫苗株“多克隆构成”假说提供了佐证。此外,在对抽样偏差分析中发现,由于疫苗株中各种病毒准种在量上的差异,使得传统bulk PCR法不能有效的扩增组成比例较低的病毒准种,而导致测得的序列组成不能完全代表实际情况。SGA法通过对单基因组分的扩增和测序,可避免bulk PCR法的以上缺陷,在分析以准种形式存在的RNA病毒序列方面具有独特的优势。     

血糖波动对2 型糖尿病大鼠心肌组织形态的影响及机制研究

目的:观察血糖波动对2型糖尿病大鼠心肌组织形态的影响并探讨其可能机制。方法:选取45只雄性Sprague-Dawley(SD)大鼠,按随机数字法分成正常对照组(CON组)和糖尿病组(DM组)。DM组给予4周高糖高脂饲料喂养后,予小剂量链脲佐菌素35 mg/Kg腹腔注射建立2型糖尿病大鼠模型。将成模大鼠按随机数字法分成糖尿病对照组(CDM组)和波动血糖组(FDM组)。FDM组大鼠每天定时皮下注射短效胰岛素并错时给予葡萄糖,建立糖尿病血糖波动模型,CON组、CDM组予等量生理盐水皮下注射。每周测血糖值2天,4次/天,动态观测各组大鼠外形、进食量、饮水量等变化。造模成功12周后取腹主动脉血测定糖化血红蛋白(Hb Alc),取大鼠心脏组织行Masson染色观察心肌纤维化水平,免疫印记法分别检测心肌组织AKT、p-AKT蛋白的表达,免疫组织化学法分析各组大鼠心肌细胞中Caspase-3蛋白的表达。结果:(1)与CON组相比,FDM组、CDM组大鼠Hb A1c、血糖变异系数(CV)水平升高,差异具有统计学意义(P0.05);与CDM组相比,FDM组Hb A1c水平差异无统计学意义(P0.05),CV值进一步升高,差异具有统计学意义(P0.05)。(2)与CON组相比,CDM组、FDM组大鼠心肌组织形心肌纤维化水平升高,差异具有统计学意义(P0.05);与CDM组相比,FDM组心肌组织心肌纤维化水平进一步升高,差异具有统计学意义(P0.05)。(3)与CON组相比,FDM组、CDM组大鼠心肌p-AKT蛋白表达水平均减少,差异具有统计学意义(P0.05);与CDM组相比,FDM组p-AKT蛋白表达水平均进一步减少,差异具有统计学意义(P0.05)。而三组大鼠心肌组织AKT蛋白表达水平差异无统计学意义(P0.05)。(4)与CON组相比,FDM组、CDM组大鼠心肌Caspase-3蛋白表达水平均升高,差异具有统计学意义(P0.05);与CDM组相比,FDM组Caspase-3蛋白表达水平进一步升高,差异具有统计学意义(P0.05)。结论:血糖波动可加重2型糖尿病大鼠的心肌纤维化,其机制可能与抑制AKT活化有关。     

纤维素微球色谱介质制备、孔结构调控及聚合物改性

作为色谱技术的核心,高效色谱介质的研制与开发是提高生物大分子纯化效率的重要手段之一.纤维素微球是最早应用于生物分离的色谱介质之一.这主要是因为纤维素的基本结构为多糖化合物,表面含有大量羟基,易于修饰功能配基,且非特异性吸附弱,特别适合不稳定生物大分子的分离纯化.本文综述了纤维素微球色谱介质的研究新进展.首先简要介绍了纤...