γ辐射引起花生和水稻种胚非按时DNA合成效应的研究

用~3H-胸腺嘧啶核苷渗入法,研究受~(60)Co-γ射线各种剂量(10、20、30、40千伦,剂量率836伦/分)照射的花生和水稻种胚萌发早期DNA合成率的变动。结果表明,受γ辐射的花生和水稻种胚出现非按时的DNA合成,用咖啡碱能够抑制这种合成,这种非按时的DNA合成与γ辐射剂量有一定的关系。本研究工作证明了:在上述两种植物的细胞中具有修复DNA损伤的功能。     

金鱼草（Antitthinum majus L．）下胚轴外植体不定芽的高频再生

本文发展的技术可以使金鱼草下胚轴外植体不定芽高频再生。添加有２ｍｇ／ｌＢＡＰ和０．５ｍｇ／ｌＮＡＡ的ＭＳ培养基上再生芽出得又快又多，淡黄色愈伤组织易于形成并存活。但主要依赖的是６－ＢＡＰ。ＭＳ培养基中含有０．１ｍｇ／ｌ或６ｍｇ／ｌ浓度的６－ＢＡＰ均能刺激芽的发育，最适浓度为２－３ｍｇ／ｌ．仅加２，４－Ｄ，也能形成正常的黄色愈伤组织。但这样形成的愈伤组织在只含有０．１－６ｍｇ／ｌ６－ＢＡＰ或含有２ｍｇ／ｌ６－ＢＡＰ和０．５ｍｇ／ｌＮＡＡ的ＭＳ培养基上均不能分化生出再生芽来。仅加ＮＡＡ，能够刺激下胚轴形成根。加入ＡｇＮＯ＿３，则抑制不定芽的再生，并导致整个外植体变成棕色而死亡。组织化学分析结果表明：不定芽的再生源于下胚轴外植体表皮细胞。在不含有任何生长调节剂的ＭＳ培养基上，再生苗均能形成根。再生植株移栽至花盆可开花结实。     

利用农杆菌系统将超甜定基因导入烟草

由pUR528构建中间载体pEHT9,再构建超甜定植物表达载体pBIT7。通过直接转化法将pBIT7导入农杆菌,然后利用农杆菌系统转化烟草。经PCR、PC R-S outhern和Southern杂交证实,超甜定基因已整合到烟草基因组中。 Abstract:pEHT9 was constructed from pUR528,and used for the construction of plant thaumatin expression vector pBIT7.Then pBIT7 was introduced to Agrobacterium through direct transformation.Subsequently tobacco was transformed through Agrobacterium-mediated system.It has been confirmed that thaumatin gene has integrated into the genome of transgenic tobacco by PCR,PCR-Southern and Southern blot analyses.     

一个新的粗糙脉孢霉基因组DNA制备方法

粗糙脉孢霉基因组DNA的制备多数费工费时,并且需要液氮研磨。而一般实验室没有液氮设备。本文提供了一个不需要液氮研磨就可以快速制备粗糙脉孢霉基因组DNA的方法,使用裂解液、石英砂和苯酚振荡裂解细胞壁,然后用苯酚／氯仿抽提DNA。利用PCR从基因组扩增出粗糙脉孢霉Ⅰ号染色体右臂上的校孔转运蛋白基因片段。     

霍乱肠毒素B亚单位在转基因番茄中表达的研究

将霍乱肠毒素B亚单位（CT－B）基因及内质网引导序列（SEKDEL）克隆到质粒pRTL2和pBI121中,分别构建植物双元表达载体pBI-CTB和pBI-CTBK,CT-B基因由Ca35S启动子控制表达。采用叶盘法经根癌农杆菌介导转化番茄（金丰1号,Jinfeng1)各表达载体得到一批转基因植株。经PCR和Southern blot分析表明CT－B基因整合到了番茄基因组中;ELISA和Western blot分析表明pBI-CTB和pBI-CTBK的转基因植株能够有效表达CT－B多肽,分别占番茄叶片可溶性蛋白的0.055%和0.084%。     

快速制备酵母质粒和基因组DNA PCR模板

发展了一个利用煮沸法快速制备酵母质粒和基因组DNA PCR模板的程序,成功地从低拷贝的ARSCEN酵母质粒和酵母基因组扩增到了相应基因。     

转多基因水稻植株的获得

将2-3个外源目的基因与筛选标记基因hpt连在同一个载体上,用基因枪法对1个粳稻品种和4个籼稻品种进行了转化,粳稻中花8号转化频率最高为56.4%,灿稻七丝软占、特青、奇妙香、九六零转化频率分别为6.4%,2.5%,2.8%和1.7%,分子杂交实验证明,通过两次潮霉素抗性筛选的T0代再生植株100%含有hpt基因,其中70%以上含有外源目的基因的完整表达结构。遗传分析表明,大部分T1代植株中潮霉素抗敏比符合盂德尔3：1的分离规律。     

均匀设计法优化灰树花深层培养基配方

系统研究了碳源、氮源、无机盐、维生素等培养基因素对灰树花深层发酵菌丝体产量的影响 ,并通过均匀设计法优化了发酵培养基配方。结果表明 :4 6 %玉米粉、3 5 %豆饼粉、0 1%葡萄糖、0 32 %KH2 PO4 、0 0 1%MgSO4 、少量VB1的培养基配方可使菌丝体产量达到最大。采用此配方试验 ,菌丝体产量平均值达 1 77± 0 0 6g/10 0mL。     

花色素苷生物合成的遗传和发育调控

概述了高等植物花色素苷生物合成过程的遗传和发育调控的研究进展。重点介绍花色素苷生物合成的结构基因和调控基困的分子克隆,调控基因对结构基因的调控功能。