荧光定量PCR技术评价亚甲蓝光化学法病毒灭活效果的研究

本研究探讨利用荧光定量PCR技术评价Sindbis病毒经亚甲蓝光化学处理后灭活效果的可行性。研究采用不同光照强度对Sindbis病毒进行亚甲蓝光化学灭活处理,并用SYBR Green I荧光定量PCR对Sindbis病毒的cDNA进行扩增,同时以细胞病变法做平行对照以测定病毒残余滴度。结果显示在亚甲蓝光化学处理过程中,随着光照强度的增强,病毒残余滴度由6.50 LgTCID50/mL逐渐降低至检测限以下,同时病毒核酸的拷贝数显著下降(P<0.05),并与病毒感染性的降低呈线性相关(R2>0.98)。以上结果表明,亚甲蓝光化学灭活法对Sindbis病毒核酸有破坏作用,病毒核酸损伤程度随光照强度的增强而增加,且与病毒感染性的降低存在相关性,提示荧光定量PCR技术评价亚甲蓝光化学法的病毒灭活效果具有可行性。     

输血可能传播的新发或再现传染病有哪些?如何防控?

近年来,由于西尼罗热、严重急性呼吸综合征(severe acute respiratory syndrome,SARS)、禽流行性感冒(简称禽流感)及2009甲型H1N1流行性感冒(简称2009甲型H1N1流感)在全球或局部地区暴发流行,新发或再现传染病(emerging infectious     

血源肝炎病毒筛查试验结果的分析

目的 探讨血筛酶免疫试剂的质量以及2次化验试剂的合理搭配,最大限度地避免漏检和减少假阳性。方法 对随机抽取的73份HBsAg和99份抗-HCV检测不合格的献血标本分别采用与常规筛查相同的2种进口试剂和另1种国产酶免试剂进行复检,并对复检中至少1种试剂为反应性的标本进行HBsAg中和试验或抗-HCV重组免疫印迹试验确证。结果 73份HBsAg不合格标本中,20份确证阳性,11份可疑,42份阴性;99份抗-HCV不合格标本中,29份确证阳性,70份阴性。针对研究范围内特定的标本,进口试剂的漏检率可达13.79%～27.59%,且也存在不同程度的假阳性。2种进口试剂间检测结果互补,而国产试剂无法查出进口试剂的漏检。结论 无论是进口还是国产血筛酶免试剂,都存在不同程度的漏检和假阳性情况,应选择2种检测结果互补的试剂对血液进行筛查,以保障血液安全。     

基因芯片分析干扰素对乙型肝炎病毒转染细胞基因表达的影响

乙型肝炎病毒 (HepatitisBvirus ,HBV)的持续性感染是影响人类健康的重大问题 ,而α 干扰素 (IFN α)和γ 干扰素(IFN γ)分别具有抗HBV的作用。为了研究HBV持续存在对IFN效应基因表达的影响 ,将HepG2细胞和来源于HepG2细胞并整合有HBV基因组的HepG2 .2 .15细胞经IFN α或IFN γ处理 6h后 ,用含 14 112个靶基因的人cDNA基因芯片检测了各组基因表达谱的差异。结果证实 ,许多与细胞周期、增殖、凋亡相关的基因及部分EST和功能未知基因受IFN调节 ;IFN诱导后 ,一些与激酶和信号转导、转录调节、抗原递呈和处理相关的基因在两株细胞间表达存在差异 ,提示HBV影响IFN诱导的细胞基因的表达。进一步挑选部分显著差异表达的基因 ,研究其对HBV复制的影响 ,结果发现在两个细胞株中IFN诱导后基因表达差异的双遍在蛋白 (Diubiquitin)和髓样细胞分化蛋白 (MyD88)均可显著降低HBV抗原表达 ,并证实MyD88能抑制HBV复制。这有助于揭示IFN抗病毒效应及HBV持续性感染机制 ,为分子水平寻找新型抗HBV药物的靶点打下基础。     

BA-25菌株碱性纤维素酶产酶条件优化研究

试验研究了分离自烟草调制过程中的产芽孢细菌Bacillussp.BA-25菌株碱性纤维素酶产生的优化条件.结果表明:麸皮是最佳碳源,豆饼粉是最佳的氮源,且当碳氮比为2∶1时产酶活性最高;NaCl和KH2PO4对纤维素酶的合成具有重要作用,其适宜用量分别为0.5%～1.0%和0.1%;培养液的初始pH会极大地影响产酶活性,其最适pH为10.最优化的发酵工艺参数为:种子菌龄为24h,在300mL摇瓶中,装入30mL培养基培养温度为37℃,摇床转速为160r/min,在发酵24h后补充1%的葡萄糖,培养48h,该菌产碱性纤维素酶活力可以达到68.4U/mL.     

稻纵卷叶螟(Cnaphalocrocis medinalis Guene'e)种群生命系统模型的研究

经过五年来对稻纵卷叶螟自然种群生命表的研究,组建了预测种群动态的生命系统模拟模型。本模型为一变维矩阵组合模型。除能随环境温度而改变矩阵维数外,采用生理年龄为矩阵步长。每一虫期内各个体的发育不一致,矩阵中各元素均为某些环境因素的函数,共组建有18个子模式。在输入起始日期,预测期限,水稻生育期,环境温、湿度和初始种群各年龄向量后,即可自动打印出逐日种群年龄向量及总虫量。计算机模拟曲线与实测曲线基本吻合。本模型可用来预测南京地区稻纵卷叶螟二代迁入峰后种群的发展以至第三代种群各虫态的起始虫量和发生期。     

土木香内酯对C6脑胶质瘤细胞迁移侵袭及凋亡的影响

目的观察土木香内酯对大鼠C6胶质瘤细胞迁移侵袭及凋亡的影响及探讨可能的作用机制。方法体外培养大鼠C6胶质细胞瘤株,采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测土木香内酯(AL)对C6细胞活力的影响;通过划痕实验、Transwell小室实验检测AL对C6细胞迁移侵袭的影响;流式细胞仪检测AL对C6细胞诱导凋亡情况的影响,以及JC-1荧光探针检测AL对C6细胞线粒体膜电位变化的影响;采用免疫印迹(Western blot)方法检测经AL处理后,C6细胞中各相关蛋白的表达情况。结果 AL显著抑制C6细胞的增殖,且呈时间及剂量依赖性;AL处理24 h后,C6细胞的迁移侵袭能力明显受到抑制,N-cadherin蛋白显著下降而E-cadherin蛋白明显上升;凋亡细胞数明显上升而线粒体膜电位明显下降,细胞色素C/cleaved PARP/cleaved caspase-3/cleaved caspase-9蛋白均显著上调。结论 AL抑制C6细胞的作用机制,一方面可能是通过调节钙粘素(cadherin)蛋白抑制其迁移侵袭,另一方面可能通过调节细胞色素C/caspase信号通路诱导其凋亡发生。     

粪菌移植对高原环境下SD大鼠体质量、血常规指标及肠道菌群的影响

目的 探究粪菌移植对低海拔动物的高原适应性的影响。方法 将30只雄性SD大鼠随机分为3组，每组10只，即模拟高原环境组（H组）、模拟高原环境+抗生素预处理组（HA组）及模拟高原环境+抗生素预处理+高原鼢鼠粪菌组（HAM组）。粪菌移植结束，持续饲养3周后，将所有组大鼠转移至模拟海拔6 000 m环境低压氧舱饲养30 d。测定粪菌移植对SD大鼠体质量、血常规指标及肠道菌群的影响。结果 HAM组、HA组和H组3组大鼠间平均日采食量比较差异无统计学意义（F=2.928,P>0.05）,H组大鼠平均日增重显著低于HA组、 HAM组（F=3.951, P<0.05）; HA组大鼠中性粒细胞数量较H组、HAM组分别上升7.85%和51.27%,HA组大鼠单核细胞数、单核细胞百分比显著高于H组、HAM组（F=5.131、4.325，均P<0.05）;HAM组、HA组和H组大鼠肠道菌群的优势菌门以拟杆菌门（Bacteroidetes）、厚壁菌门（Firmicutes）为主。HAM组大鼠肠道菌群的毛螺菌科（Lachnospiraceae）的相对丰度显著高于HA组、H组（F=8.545, ...