人胃癌BGC-823细胞中去甲斑蝥素抑癌作用机理的蛋白质组学研究

去甲斑蝥素是我国自行研制的抗肿瘤药物,在临床上主要用于消化道肿瘤的治疗．实验表明,去甲斑蝥素可引起人胃癌BGC-823细胞发生 M期阻滞及细胞凋亡．进一步利用双向电泳和质谱技术,筛选出了去甲斑蝥素抑癌作用相关蛋白．研究显示,线粒体热休克蛋白CH60、线粒体ATP合酶d亚单位、内质网葡萄糖调节蛋白GRP78、线粒体Hsp70的辅助因子GRPE1、SH3L3以及染色质组装因子1小亚基RBBP4参与了去甲斑蝥素的抑癌作用．研究提示,去甲斑蝥素可能通过促进线粒体热休克蛋白及p53的表达进而激活caspase-3依赖的凋亡通路,并且去甲斑蝥素在引发内质网协迫之后,可通过抑制胞外信号调节激酶(extracellular signal regulated kinase, ERK)的活性促进肿瘤细胞的凋亡．进一步分析了去甲斑蝥素与线粒体ATP合酶抑制剂寡霉素A的联合用药对人胃癌细胞生长的影响,结果表明,联合用药的抑瘤效果比单独用药的抑瘤效果显著,提示去甲斑蝥素可能通过抑制线粒体ATP合酶功能抑制BGC-823生长．上述结果为优化去甲斑蝥素的联合用药方案提供了新线索．     

泛素-蛋白水解酶复合体通路对SD大鼠卵母细胞排极过程的影响

泛素-蛋白水解酶复合体通路对SD大鼠卵母细胞排极过程的影响@谭信$北京师范大学生命科学学院!　中国 北京100875　首都医科大学　中国北京100054 @彭安$北京师范大学生命科学学院!　中国 北京100875 @王永潮$北京师范大学生命科学学院!　中国 北京100875 @何大澄$北京师范大学生命科学学院!　中国 北京100875 @唐永政$北京师范大学生命科学学院!　中国 北京100875     

超排SD大鼠卵母细胞减数分裂中期Ⅰ的阻滞和恢复

超排SD大鼠卵母细胞减数分裂中期Ⅰ的阻滞和恢复@谭信$北京师范大学生命科学学院!　　中国北京100875中国科学院动物学研究所计划生育生殖生物学国家重点实验室　中国北京100080 @彭安$北京师范大学生命科学学院!　　中国北京100875 @王永潮$北京师范大学生命科学学院!　　中国北京100875 @孙青原$中国科学院动物学研究所计划生育生殖生物学国家重点实验室!　中国北京100080 @何大澄$北京师范大学生命科学学院!　　中国北京100875 @陈大元$中国科学院动物学研究所计划生育生殖生物学国家重点实验室!　中国北京100080…     

cAMP和卵丘细胞对大鼠卵母细胞的GVBD,p90rsk和MAPK磷酸化的调节作用

cAMP和卵丘细胞对大鼠卵母细胞的GVBD,p90rsk和MAPK磷酸化的调节作用@谭信$中国科学院动物研究所计划生育生殖生物学国家重点实验室!　中国北京100080北京师范大学生命科学学院　中国北京100875 @孙青原$中国科学院动物研究所计划生育生殖生物学国家重点实验室!　中国北京100080 @王永潮$北京师范大学生命科学学院!　中国北京100875 @彭安$北京师范大学生命科学学院!　中国北京100875 @陈大元$中国科学院动物研究所计划生育生殖生物学国家重点实验室!　中国北京100080 @何大澄$北京师范大学生命科学学院!　中国北京1008…     

抗白血病药物三尖杉酯碱对L1210细胞着丝粒蛋白含量及CenpB基因表达的影响

以小鼠白血病细胞系L1210为对象,探讨了抗白血病药物三尖杉酯碱(Harringtonine,HT或Har)对细胞内着丝粒蛋白含量及着丝粒蛋白CenP基因表达的影响。间接免疫荧光(IIF)检测结果显示,随HT作用时间延长,L1210细胞着丝粒荧光斑点减弱;免疫印迹(Western blot)检测结果显示,所用的抗着丝粒抗血清(ACA 血清)能够识别8种不同分子量的着丝粒蛋白：140、80、70、56、37、34、32和17kD。受HT作用,细胞中这些着丝粒蛋白的含量不同程度地降低。在L1210细胞中识别17、80 and l40kD蛋白质的ACA抗体也分别与分子量相当的已知为CenpA、CenpB和CenpC的3种蛋白发生交叉反应。Northern和Dot blot显示,HT的抑制作用使细胞中CenpB mRNA表达水平较之对照细胞下降。结果表明,HT可(通过抑制基因mRNA的表达)降低细胞中某些着丝粒蛋白的含量;HT对细胞的杀伤及诱导凋亡作用可能与CenpB等着丝粒蛋白基因的表达抑制有关。     

环境中富啡酸对小麦吸收利用亚硒酸钠及其毒性的影响

利用小麦水培安验,研究了从土壤中提取的富啡酸（Ｆｕｌｖｉｃａｃｉｄ,ＦＡ）对亚硒酸钠生物有效性及毒性的影响。结果表明,富啡酸对小麦吸收利用亚硒酸钠有明显的影晌,并且对高浓度亚硒酸钠的毒性有一定的抑制作用,富啡酸可提高小麦对硒胁迫的生态适应性。     

高效率提取λ噬菌体DNA离体包装抽提物

λ噬菌体DNA在与被克隆的DNA片段结合成重组体后,需进行体外包装才能形成侵染性的噬菌体颗粒。这里仅就如何提取高效能人噬菌体DNA包装抽提物（包装蛋白）谈谈体会。（1）菌落的选择从BHB2688和BHB2690的不同菌落中提取的包装抽提物的包装效率（讨U小g／＊＊A）可相差10倍以上。因此在大量制备以前,有必要先挑选多个菌范小批量制备抽提物并测定其包装效率,取优良者进行制备。（2）热诱导后的培养时间文献所载,在热诱导后培养至细菌可被氛仿裂解时即可停止。但我们的经验是12”IX10’养一段时间可明显提高抽提物的效价（见图1）…     

蛋白水解酶复合体抑制剂lactacystin对小鼠卵母细胞减数分裂和初次卵裂的作用

为探讨泛素-蛋白水解酶复合体通路(UPP)在小鼠卵母细胞减数分裂和卵裂中的作用, 使用蛋白水解酶复合体特异性抑制剂lactacystin作用于减数分裂不同时期的卵母细胞和受精卵, 结果发现, lactacystin对GVBD的发生无明显影响, 但可明显抑制随后的减数分裂进程, 使极体排放受阻, 引起超排卵母细胞的孤雌激活率下降, 并抑制第一次卵裂. β-tubulin免疫荧光染色显示lactacystin抑制减数分裂微管的组装和纺锤体的形成; 对已进入中期的卵母细胞使用lactacystin, 则对中期纺锤体形态无影响. lactacystin还可使受精卵阻滞于间期或第一次有丝分裂中期. 免疫荧光染色还显示蛋白水解酶复合体催化亚单位PA700在GV期定位在GV及其周围区域, 在中期定位于纺锤体区域. 以上结果表明UPP对小鼠卵母细胞减数分裂和早期卵裂是必需的, 且对减数分裂的作用是多方面的, 在前期与纺锤体的正常形成有关, 而在中期则为染色体的分离和进入后期所必需.