抑制剂在mTOR和IIS信号通路及老年相关疾病中的研究进展

衰老是机体各组织、器官功能随年龄增长而发生退行性变化的过程。衰老将降低机体在面对环境胁迫时维持机体动态平衡的能力,从而使机体患病和死亡的风险增加。近年来,抑制剂在抗衰老和治疗老年疾病方面的研究取得了很大进展,通过抑制衰老经典通路中mTOR、IIS信号通路可延长模式动物寿命,通过抑制剂的干预能够延缓或治疗某些老年疾病。本文重点综述了抗衰老抑制剂在衰老主要信号通路中的应用以及在老年相关疾病,如肿瘤、阿兹海默症、糖尿病中的治疗作用,并对下一步研究进行了展望。     

髋关节撞击征的诊断和治疗

髋关节撞击综合征（femoroacetabularimpingement,FAI）是以髋关节解剖结构异常而引发的股骨近端和髋臼间发生异常碰撞,从而导致髋关节孟唇和关节软骨的退行性变化,引起髋关节慢性疼痛的疾病。髋关节活动范围特别是屈曲和内旋受限,最终发展为髋关节骨关节炎。FAI在我国国内为一个较新的概念,临床能得到诊断的病例不多,但实际病例很多,相当一部分的髋关节疼痛是由撞击征造成,平常的药物止痛不能解除持续的撞击,最终会发生骨关节炎。由此早期的诊断及手术干预,可以消除疼痛,防止骨关节炎的发生。进而推迟或消除关节置换手术是有巨大的经济和社会价值。     

凋亡和周期基因芯片研究As2O3对NB4细胞凋亡相关基因表达谱的影响

目的:利用细胞凋亡和周期基因芯片研究As₂O₃作用前后NB4细胞基因表达谱的差异性,寻找As₂O₃诱导NB4细胞凋亡的相关基因并分析其可能机制。方法:流式细胞仪检测细胞凋亡率,抽提对照及诱导组细胞的mRNA,通过逆转录将As₂O₃处理前后的NB4细胞cDNA进行生物素标记,用含269个目的基因的细胞凋亡和周期基因芯片进行杂交,GEArray软件分析,筛选出As₂O₃诱导前后表达有差异的基因。芯片结果用荧光定量聚合酶链反应(realtimepolymerasechainreaction)进行验证。结果:筛选出As₂O₃作用前后表达有差异的基因共100条(占芯片基因总数的37.2%),其中97条(97/100,97%)基因表达上调,3条(3/100,3%)基因表达下调。表达上调的基因主要包括肿瘤坏死因子配体和受体家族、bcl2家族、半胱氨酸家族、DNA损伤检测和P53途径以及细胞分裂周期蛋白和激酶等基因。结论:As₂O₃主要通过上调促凋亡基因表达来诱导NB4细胞凋亡,其中TNFSF15、Apaf1、Caspase3和p16等基因可能参与As₂O₃诱导的NB4细胞凋亡,As₂O₃诱导NB4细胞凋亡的可能机制主要涉及TNF途径、线粒体途径、Caspase途径、细胞周期抑制途径和P53途径等。     

酵母朊蛋白Sup35NM的寡聚化过程研究

本文研究了与神经退行性疾病相关蛋白有类似聚集行为的模型蛋白质酵母朊蛋白Sup35NM的错误折叠过程,特别是初始的寡聚化过程.为了延缓和阻止朊蛋白Sup35NM在磷酸盐缓冲液中(体外条件)的聚集以利研究,在Sup35NM的N结构域第31位点处突变并修饰了一个聚合物分子PNIPAM(即蛋白质-高分子结合物Sup35NM-31m-PNIPAM).硫代黄素T荧光光谱实验显示,修饰延缓了Sup35NM的寡聚化,并给出了研究寡聚化的时间窗口:25℃时,修饰前后分别是~10和24 h.激光光散射实验进一步证实了修饰阻碍Sup35NM寡聚化聚集.运用Smoluchowski模型公式,拟合了激光光散射实验数据,定量地给出并对比了修饰前后两个样品在聚集初期(6 h内)的寡聚体分布.结果显示,在引发聚集6 h后,未修饰样品中的蛋白质单体仅剩13%,而在PNIPAM修饰后的样品中蛋白质单体则仍占46%.本工作为可控、定量研究朊蛋白寡聚化提供了新思路.     

柚皮苷和木犀草素联合应用对大鼠BMSCs诱导成骨过程中Wnt/β-cantein通路相关基因表达的影响

摘要 目的：探讨柚皮苷和木犀草素联合应用对大鼠骨髓间充质干细胞（BMSCs）诱导成骨过程中Wnt/β-cantein通路相关基因表达的影响。方法：取大鼠股骨中提取的BMSCs,分别建立A组（空白组）、B组给予柚皮苷溶液10 μmol/L,C组给予木犀草素溶液5 μmol/L;D组给予骨碎补总黄酮溶液10 mg/mL;E组给予柚皮苷-木犀草素混合溶液配伍比为10 μmol/L：5 μmol/L,并诱导其向成骨细胞分化。应用碱性磷酸酶（ALP）染色及分光光度法检测第7 d各组细胞ALP活性。应用实时荧光定量聚合酶链反应（qRT-PCR）检测第7 d各组细胞Wnt/β-cantein通路相关基因及成骨基因的表达。结果：B组、C组、D组、E组细胞562 nm波长下光密度（OD）值显著高于A组,E组细胞562 nm波长下OD值最高,显著高于B组、C组、D组（P＜0.05）。B组、C组、D组、E组细胞ALP、骨钙素（OCN）、Runt相关转录因子2（RUNX2）基因表达水平显著高于A组,E组ALP、OCN、RUNX2基因表达水平最高,显著高于B组、C组、D组（P＜0.05）。B组、C组、D组、E组细胞β-catenin、Cyclin D1基因表达水平显著高于A组;B组、E组LEF-1基因表达水平显著高于A组;E组β-catenin、LEF-1、Cyclin D1基因表达水平最高,显著高于B组、C组、D组（P＜0.05）。结论：柚皮苷和木犀草素均具有促进大鼠BMSCs增殖和诱导其成骨向分化的作用,柚皮苷和木犀草素联合应用诱导大鼠BMSCs增成骨作用最强,其主要机制与Wnt/β-cantein通路激活有关。     

生物炭对玉米/大豆、玉米/花生间作系统土壤水肥热及产量的影响

于2019年5—9月在沈阳农业大学水利学院科研试验基地进行田间试验,设置2种种植模式MS、MP(玉米/大豆间作、玉米/花生间作)和3个生物炭施用量T0、T1和T2(0、15和30 t·hm^-2)的田间小区试验,研究施入生物炭对玉米/大豆、玉米/花生间作系统土壤水热、养分吸收和产量的影响。结果表明:施入生物炭对作物生育初期0~30 cm土壤储水量影响不显著,随着生育期的推进,由于受降雨等因素的影响,生物炭处理显著提高了0~30 cm土壤储水量,其中在抽雄期MPT2处理的增幅最大,达15.49%;在苗期与拔节期,由于降雨少,生物炭对30~60 cm土壤储水量的影响并不显著,从抽雄期开始至生育末期表现出显著性差异,但提升效果不如0~30 cm土层。生物炭可以显著提高苗期与拔节期土壤有效积温,在苗期MPT2处理下提升效果最为显著,增幅达20.97%,而在作物生育中后期,生物炭对土壤有效积温的影响减弱,在抽雄期和灌浆期的影响最小。生物炭施入土壤后虽然显著降低了作物生育前期土壤的矿质氮含量,但显著提高了作物生长发育中后期的矿质氮含量(25.19%~48.82%),因而增加了MS总产量(12.79%~13.71%)和MP总产量(15.86%~18.01%)。因此,生物炭有效调控了作物生长发育关键期土壤的水肥热状况,改善了间作系统的作物生长环境,使得间作这一本来就有着产量优势的种植模式产生了更大的增产效应。     

利用基因芯片对一高保守基因进行肿瘤相关分析

本对大规模人类cDNA测序过程中获得的一条高保守基因进行了初步功能研究,生物信息学研究发现该基因在人类、小鼠、果蝇、拟南芥和裂殖酶母中都有很高的保守性,其他分析预测该基因可能具有肿瘤相关性。RT－PCR分析表明,该基因在成人和胎儿组织中广泛谱表达。利用基因芯片分析该基因在7例肝癌、5例胰腺癌、2例喉癌和2例肺癌中表达情况,结果证实了该基因的肿瘤相关性,并且提示该基因在不同类型中可能处于不同的地位。     

利用基因芯片对一高保守基因进行肿瘤相关分析

本文对大规模人类cDNA 测序过程中获得的一条高保守基因进行了初步功能研究,生物信息学研究发现该基因在人类、小鼠、果蝇、拟南芥和裂殖酵母中都有很高的保守性,其他分析预测该基因可能具有肿瘤相关性。RT-PCR分析表明,该基因在成人和胎儿组织中广谱表达。利用基因芯片分析该基因在7例肝癌、5例胰腺癌、2例喉癌和2例肺癌中表达情况,结果证实了该基因的肿瘤相关性,并且提示该基因在不同肿瘤类型中可能处于不同的地位。 Abstract:Preliminary function research of a highly conserved human gene,which was cloned from human fetal cDNA library during large-scale cDNA sequencing,is illustrated in this article.Bioinformatics analysis indicates that this gene is highly conserved in human、mouse、fruit fly、thaliana and fission yeast.Other bioinformatics analysis implies its relevance with tumors.RT-PCR analysis shows its wide-ranging expression patterns.Its expression in 16 cancer cases(including 7 liver cancer cases、5 pancreas cancer cases、2 larynx cancer cases and 2 lung cancer cases) is studied by using gene microarray analysis.The result shows its relevance with tumors and implies it may have different status in different classification of tumors.     

一种用于正常和恶性造血祖细胞克隆培养的无血清培养基

最近,我们研制了一种可用于正常和恶性造血祖细胞半固体克隆培养的无血清培养基,不仅可用于正常和恶性淋巴祖细胞,而且可用于其他种类的造血祖细胞。这种无血清培养基称之为SFM-1,由IMDM(Iscove's modifiedDulbecco's medium)补充以牛血清白蛋白10mg/ml、转铁蛋白1μg/ml、胰岛素8μg/ml、胆固醇20μg/ml和过氧化氢酶20μg/ml组成。通过CFU-ALL、CFU-ANLL、BL-CFU、TL- CFU和GM-CFU测定对SPM-1和SCM进行全面比较后显示,SFM-1和SCM对上述造血祖细胞的生长支持作用没有显著性差异,而且SFM-1优于另外2种无血清培养基(SFM-2和SFM-3)。未发现SFM-1对细胞形态、表型和结构有明显影响。     

抗草甘膦转基因大豆对非靶标节肢动物群落多样性的影响

在田间自然条件下,用直接观察法和吸虫器研究了抗草甘膦转基因大豆对豆田节肢动物群落的影响.结果表明,种植抗除草剂转基因大豆的豆田节肢动物群落和非转基因亲本大豆豆田节肢动物群落的物种数,优势集中性指数、多样性指数相似程度较高,它们之间差异不显著,说明抗除草剂转基因大豆对节肢动物群落多样性无明显影响.