用去掉免疫球蛋白IgG的腹水提高体外培养的单克隆抗体产量(英文)

发展了一种在实验室大幅度提高抗体产量的方法,即采用添加2%的去免疫球蛋白IgG的腹水于无血清培养基中的方法,培养杂交瘤细胞,获得了高达3.55 ×10⁶/ml的细胞密度,纯化后获得了135μg/ml的单克隆抗体产量,比通常的用无血清培养的单位体积培养液抗体产量高4倍。对于体外生产单克隆抗体而言,这种方法经济并且易于推广,它的成功是抗体产量提高的一个巨大进步。     

胃肠道黏膜免疫的一些研究进展

本文主要综述了在胃肠道黏膜免疫中起重要作用的黏膜相关淋巴组织、小肠黏膜上皮内淋巴细胞和分泌型IgA的性能,并就胃肠道黏膜对食物抗原的作用以及其在预防疾病方面功能进行了讨论。     

人红细胞生成素单克隆抗体的制备、鉴定及应用研究

用rhEPo作为抗原,免疫BALB／c小鼠,取其脾细胞与x63Ag8．653小鼠骨髓瘤细胞融合,再碱性PAGE方法进一步分离并纯化的rhEpo,包被Pvc板,对杂交瘤用ELlSA方法进行筛选,获得两株稳定分泌抗hEPO单抗的杂交瘤细胞株。经鉴定分别属于IgG1、IgG2b,轻链均为k链,Kd分别为5．53×10^-10mol／L和1．34×1O^-10mol／L．用western blot方法证明两者对hEPO具有高度韵专一性．能特异地识别rhEPO和尿源hEPO。所制备单抗可作为亲和层析的配体,用于再生障碍性贫血病人尿中EPO及哺乳类工程细胞所表达的hEPO的分离、纯化,并可用于hEPO的定量检测．     

天花粉蛋白及其与抗体的复合物对蛋白质合成的抑制作用(简报)(英文)

天花粉蛋白在无细胞系统中显示强烈的抑制蛋白质生物合成的能力,其活性与经巯基试剂还原开裂的蓖麻毒蛋白相当。天花粉蛋白对BEL-7402人肝癌细胞的毒性甚低,但当它通过二硫键与抗肝癌单抗Hepama-1偶联后,其毒性增强五十倍。张学军和王家槐不久前发现天花粉蛋白与蓖麻毒蛋白A链的一级结构有很大的相似性~[5]。我们的实验结果与他们的发现互相印证。天花粉蛋白与抗体偶联后,可能通过抗体与细胞表面抗原的结合而内化,从而增强了它的细胞毒性。考虑到天花粉蛋白与其他植物单链致核糖体失活蛋白(RIPs)有不少特性十分相似,我们推断天花粉蛋白是RIP家族中的一员。天花粉蛋白与抗体偶联过程中,双功能试剂SPDP的修饰使天花粉蛋白的活性降低一个数量级,似乎意味着天花粉蛋白上的某些氨基可能对其活性至关紧要。发展新的偶联方法的工作正在进行。如能在双功能试剂修饰后保留其大部分活性,天花粉蛋白作为免疫毒素的“弹头”药物可能颇具潜力。     

CD44与肿瘤转移

透明质酸受体CD44是一类重要的粘附分子,与肿瘤转移密切相关,。早期认为CD44可促进肿瘤细胞的转移,但近来发现CD44与肿瘤志移之间的关系十分复杂,与CD44的分子类型及肿瘤组织类型皆有关。因此,尚需深入了解CD44在肿瘤转移过程中的分子机制,目前的研究发现CD44可能影响了肿瘤细胞的粘附,运动和胞外基质的降解等过程,临床上CD44有可能成为新的诊断指标和治疗靶点。     

端粒与细胞分裂

端粒与细胞分裂的最新研究进展表明，端粒长度本身不能作为决定细胞分裂能力的指标。本文介绍了Blackburn提出的关于端粒功能的全新模型，在这一模型中以端粒的戴帽状态作为确定端粒是否具有功能的指标，端粒长度和端粒酶活性等因素对端粒功能的影响则通过对端粒诉影响来评价。这一模型可以很好地解释有关端粒与细胞分裂之间的关系，即无论端粒长短如何，只要处于戴帽状态细胞均可继续分裂，反之细胞则退出周期发生衰老和死亡。     

端粒酶研究的若干进展

端粒酶是一种ＲＮＡ依赖的ＤＮＡ聚合酶。它的生物学功能在于以自身的ＲＮＡ为模板,合成端粒序列,解决了线性染色体的末端复制问题,维持了染色体的稳定性。本文介绍一些新进展：如端粒酶蛋白的ｃＤＮＡ已被克隆;端粒酶活性检测中出现误差的可能原因;端粒酶活性的调控因子ＴＲＦ１及新发现的ＴＲＦ２;端粒酶活性同肿瘤诊断及预后间的关系;端粒酶的激活同肿瘤发生间的关系;反义核酸抑制端粒酶活性的可能性及其可能发生的问题等。     

甲胎蛋白在体外对人肝癌细胞生长的影响

本文用MTT比色法观察了甲胎蛋白(AFP)在体外对人肝癌细胞生长的影响。结果表明,AFP能促进SMMC-7721人肝癌细胞的生长。当AFP与AFP抗体合用时,AFP抗体能减弱AFP对SMMC-7721细胞生长的促进作用;AFP抗体单用对此种细胞的生长亦有抑制作用。另一方面,在相同的实验条件下,AFP和AFP抗体对HL-60人白血病细胞的生长无明显影响;提示AFP的促生长作用具有一定的肿瘤细胞特异性,并非一种蛋白质对培养细胞的非特异性营养作用。此外,AFP亦能促进MCF-7人乳腺癌细胞的生长,AFP抗体对此种细胞的生长有抑制作用。由于MCF-7细胞存在功能性AFP受体,也能合成和分泌AFP。这就提示,人肝癌细胞中的AFP很可能与其受体特异性结合,产生促生长效应。确切机制尚待进一步阐明。     

端粒酶激活机制研究进展

随着对端粒和端粒酶在衰老和肿瘤中重要性认识的不断深入,端粒酶的激活途径已日益成为这一研究领域的热点.已发现,MYC原癌蛋白(myelocytomatosis virus oncoprotein, MYC)在端粒酶的激活中起关键作用.它可以与TERT基因启动子区域内的E盒结合反式直接激活端粒酶,还可能介导了细胞内其他分子如人乳头瘤病毒E6癌蛋白(human papillomavirus E6 oncoprotein, HPV-E6)和雌激素等对端粒酶的激活.雌激素也可与雌激素受体形成复合物,直接与TERT基因启动子区域内的退化雌激素反应元件结合反式激活端粒酶.此外,腺瘤样结肠息肉癌蛋白(adenomatous polyposis coli protein,APC)、p53及调节蛋白质磷酸化和去磷酸化过程的酶类等亦可能参与了端粒酶活性的激活.