藁本内酯的稳定性及其主要转化产物研究(英文)

藁本内酯是川芎和当归的主要有效成分,其化学结构的不稳定性限制了它的进一步研究和临床应用。本实验通过色谱方法对其室温静置一个月后的产物进行制备,得到了14个藁本内酯的转化产物,并通过ESIMS、NMR等光谱分析法确定了其结构,包括一个新化合物7'-carboxyl-wallichilide(1)。利用LC-MS峰面积归一化法,确定了藁本内酯及其转化产物的相对含量,阐明了藁本内酯的主要转化产物为其二聚体。     

藏波罗花中一个新的单萜环烯醚

从藏药藏波罗花的95%乙醇提取物中分离得到了1个新的单萜类环烯醚。采用1H NMR、13C NMR、EI及HR-EI等方法鉴定结构分别为(1R,6S,8R,9R)-1-ethoxy-8-methyl-1,5,6,7,8,9-hexahydrocyclopenta[c]pyran-4-carbaldehyde,该化合物为新化合物。     

200例下肢静脉造影分析

目的 分析下肢静脉疾病的分类,造影表现及造影对下肢静脉疾病的诊断价值。方法 对200例疑有下肢静脉疾病的患者进行常规或数字减影下肢静脉造影,根据造影表现进行分析。结果 200例307侧肢体下肢静脉造影结果：交通静脉瓣膜功能不全116侧肢体(37．8％),深静脉瓣膜功能不全39侧(12．7％),静脉阻塞性疾病85侧(27．7％),静脉瘤样病变6侧(1．9％),阴性61侧(19．9％);其中60岁以上老年患者124例197侧肢体中：静脉阻塞性疾病75侧(38．1％),交通静脉瓣膜功能不全69侧(35％),深静脉瓣膜功能不全21侧(10．7％),静脉瘤样病变3侧(1．5％),阴性29侧(14．7％)。结论 本组病例下肢静脉疾病中以静脉阻塞性疾病的比例较高(27．7％)与老年患者比例较高有关,其造影表现为各种治疗措施的选择提供可靠的依据。     

蛋白激酶B的PH结构域可溶性表达与纯化及其二级结构分析

蛋白激酶B(亦称为Akt)是一种蛋白质丝氨酸 苏氨酸激酶 ,因其与蛋白激酶A(PKA)和蛋白激酶C(PKC)具有相对高的同源性 ,而被命名为PKB .作为磷脂酰肌醇 3激酶 (PI3 kinase)的下游分子 ,它广泛参与细胞各种功能的调节 .PKB对代谢的影响主要表现为促进蛋白质的合成 ,促进糖原的转运[1] .同时 ,PKB还在细胞增殖与调控中发挥重要作用[2 ] .PH结构域 (pleckstrinhomologydomain)是一种存在于多种信号蛋白质和细胞骨架相关蛋白质中的功能性区域 .它通常由 7个反向平行的 β片层和C末端的一个α螺旋构成 .PH结构域的配体具有一定的多样性…     

OS-9基因的融合表达、纯化及多克隆抗体制备

OS 9基因广泛表达于人体多种组织 ,该基因的表达产物可能与肿瘤的发生相关 .为获得可溶性表达的OS 9蛋白 ,制备多克隆抗体 ,深入了解OS 9基因的功能 ,将OS 9基因片段克隆入组氨酸标签融合的表达载体pET2 8a中 ,IPTG诱导 ,利用金属螯合亲和层析 (MCAC)进行纯化 ,薄层扫描及Bradford法检测纯化蛋白的纯度与含量 .免疫家兔制备多克隆抗体 ,利用间接ELISA法检测抗体效价 ,Western印迹检测抗体特异性 .经表达形式分析证明 ,融合蛋白大部分可溶 .薄层扫描分析纯度可达 90 %以上 ,Bradford法检测蛋白浓度约 0 1mg ml.抗血清效价可达 1∶32 0 0以上 ,Western印迹检测证明抗体特异性良好 .经诱导表达及纯化制备出可溶的纯度较高的OS 9蛋白产物 ,并获得高效价特异性良好的多克隆抗体     

部分脾栓塞术对肝硬化脾功能亢进的介入治疗

目的:探讨和评价部分脾栓塞术(PSE)治疗肝硬化脾功能亢进的临床应用价值。方法:采用Seldinger技术对28例乙肝后肝硬化伴脾功能亢进患者用高压消毒明胶海绵颗粒共进行31次PSE。结果:28例手术中27例获得成功,栓塞范围为30％-60％,25位患者术后1周以内、1-2周及2周以上WBC和PLT均有不同程度的上升(P<0.01),临床有效率为92.6％。手术前后肝功能变化不大。全部病例均未发生严重并发症。结论:部分脾栓塞术对治疗肝硬化脾亢有明显疗效,可替代脾切除术。对肝功能的改善,近期疗效不明显。     

抑癌基因NDRG2对人结肠癌细胞系Caco-2增殖的影响

目的:采用重组慢病毒系统,在过表达和抑制NDRG2 (N-myc downstream regulated gene 2)基因后,检测人结肠癌细胞系Caco-2的增殖情况.方法:分别采用NDRG2过表达慢病毒载体pLenti6-NDRG2和NDRG2干涉慢病毒载体pLKO.1-shNDRG2制备病毒并感染Caco-2细胞,经14天耐药的筛选,获得稳定感染的细胞株;采用Real time RT-PCR和Western blot方法明确NDRG2在稳转细胞株中的表达情况,同时采用MTT方法检测细胞的增殖能力,通过流式细胞仪检测细胞周期变化情况.结果:Real time RT-PCR和Western blot结果表明,在慢病毒pLenti6-NDRG2稳定感染的Caco-2细胞中,NDRG2表达上调;pLKO.1-shNDRG2稳定感染的Caco-2细胞中,NDRG2的表达下调.MTT实验结果表明,NDRG2过表达细胞株中细胞的增殖能力下降,而pLKO.1-shNDRG2慢病毒感染Caco-2后细胞的增殖能力明显增加;流式细胞术结果显示,过表达NDRG2使Caco-2细胞在G0/G1期细胞增多而S期的细胞减少,抑制细胞内源性NDRG2后G0/G1期细胞减少而S期细胞增多.结论:通过过表达和抑制NDRG2基因,验证了NDRG2作为抑癌候选基因能够有效抑制结肠癌细胞Caco-2的增殖.     

肝硬化患者胃排空的放射学研究

目的 :用放射学方法研究肝硬化患者的胃排空情况。资料与方法 :对 2 0例经临床和实验室检查证实的肝硬化患者及 18例健康志愿者摄入不透X线标示物及标准餐后 ,用数字成像X线机腹部摄片测定 6小时的胃排空情况。结果 :2 0例肝硬化患者 6小时胃排空率为 6 5 % ,而 18例健康志愿者为 10 0 % ,两者有显著性差异 (P <0 0 1) ,显示肝硬化患者有明显的胃运动障碍。结论 :用摄入不透X线标示物及标准餐的放射学方法检查肝硬化患者的胃排空时间 ,是一种简单易行、准确可靠的诊断方法     

NDRG2在糖尿病小鼠和正常小鼠胰岛、心肌和肾中的表达

目的该实验通过对糖尿病小鼠和正常小鼠胰岛、心肌和肾中NDRG2表达的研究,旨在阐明NDRG2在糖尿病小鼠和正常小鼠中的表达差异,为进一步明确分化相关基因NDRG2的功能提供依据。方法分离糖尿病小鼠和正常小鼠的胰腺、心肌和肾,并制备成石蜡切片,用抗NDRG2单克隆抗体,进行免疫组织化学染色（ABC法）,从蛋白质水平观察NDRG2的表达情况。统计阳性细胞数,用统计学方法,判断糖尿病小鼠和正常小鼠中NDRG2的表达有无差别。结果免疫组织化学染色显示：①胰腺中NDRG2特异表达在胰岛细胞胞浆,相对正常小鼠而言Ⅱ型糖尿病小鼠胰岛中NDRG2表达略增强,Ⅰ型糖尿病小鼠胰岛中NDRG2表达略减弱;②心脏中NDRG2特异表达在心肌细胞胞浆,Ⅱ型糖尿病小鼠心肌细胞中NDRG2分布局限,正常小鼠心肌细胞中NDRG2分布均匀;③肾脏中NDRG2特异表达在肾小管上皮细胞的细胞浆,Ⅰ型糖尿病小鼠中肾小管上皮细胞出现空泡样变性。结论NDRG2在糖尿病小鼠和正常小鼠胰腺、心肌和肾中的表达差异提示NDRG2作为分化相关基因可能参与糖尿病的致病机制。     

OSBP的PH结构域的融合表达纯化及其二级结构的初步分析

氧类固醇结合蛋白（OSBP）是胆固醇类代谢过程的调节物。为了进一步研究OSBP的功能以及结构与功能之间的关系,将OSBP PH－pRSET-A的质粒转化入E.coli JM109（DE3）,并在无机培养基中获得高效可溶表达。表达的蛋白质经Ni^2 -NTA偶联的琼脂糖珠纯化,通过圆二色性分析纯化的蛋白质的二级结构,结果为：α螺旋占7.2%,β折叠占71.1%,无规则卷曲占21.7%。