大鼠部分肝切除前后热激处理对过氧化物酶基因表达的影响

用过氧化物酶原位复性电泳(SDS-POD-PAGE)技术分析了部分肝切除(partial hepatectomy,PH)、部分肝切除后再热激(partial hepatectomyfollowing heat shock,PH-HS)和先热激再部分肝切除(heat shock follow ing partial hepatectomy,HS-PH)后肝再生期间过氧化物酶(POD)基因表达差异,结果表明,PH中表达的POD基因种类(7个)>PH-HS(5个)>HS-PH(3个);三个模型的POD总活性为:HS-PH>PH>PH-HS.根据实验结果推测,POD在肝再生和肝损伤恢复中起一定作用。 Abstract:Expression difference of the peroxidase(POD)genes during liver regeneration after partial hepatectomy(PH),partial hepatectomy following heat shock(PH-HS)and heat shock following partial hepatectomy(HS-PH)was analyzed by POD renatured electrophoresis(SDS-POD-PAGE).The results showed that the expressed POD gene kinds in PH,PH-HS and HS-PH were 7,5 and 3 respectively,and that the total activities of POD in the three models were HS-PH>PH>PH-HS.The results suggested that POD play some roles during liver regeneration and in recovery after liver damage.     

饥饿状态下草鱼生长激素的分泌

以两种规模草鱼为对象,研究了饥饿对其生长激素的影响。检测由背大动脉导管抽取的连续血样的结果表明;饥饿状态下草鱼（体重为0．5－1．0kg）生长激素分泌仍是间歇性的,但饥饿明显提高其总体生长激素平均值、基础生长激素平均值和其最大峰值。对于草鱼鱼种（体重为25．30g）,饥饿也明显提高其血液中生长激素水平,但草鱼种的肥满度系数和血糖浓度却。在体外灌流实验中,饥饿的草鱼种脑垂体碎片生长激素基础分泌值明显高于正常投喂的对照组。这些结果表明：饥饿状态下草鱼生长激素分泌增强。     

不同的下丘脑肽和神经递质对鲤鱼促性腺激素和生长激素分泌活动的影响

以１龄性腺发育中期鲤鱼为材料,采用腹腔（ｉ．ｐ）注射的方法,研究不同的下丘脑肽和神经递质对鲤鱼促性腺激素（ＧｔＨ）和生长激素（ＧＨ）分泌的影响。结果表明：促甲状腺激素释放激素（ＴＲＨ）、Ｌ－多巴（Ｌ－ＤＯＰＡ）、甲基睾酮（ＭＴ）、γ－氨基丁酸（ＧＡＢＡ）、促黄体素释放激素类似物（ＬＨＲＨ－Ａ）和三碘甲状腺原氨酸（Ｔ３）都能显著刺激ＧｔＨ的分泌,但最大效应时间各不相同。ＴＲＨ和ＬＨＲＨ－Ａ能促进ＧＨ的分泌,Ｌ－ＤＯＰＡ、ＭＴ、ＧＡＢＡ对血清ＧＨ水平没有明显影响;Ｔ３则对ＧＨ分泌有一定的抑制作用。这说明鲤鱼ＧｔＨ和ＧＨ的分泌除了受各自的下丘脑释放因子和释放抑制因子的双重神经内分泌调控外,还受多种其它相同和不同调节因子的影响,也反映了鲤鱼ＧｔＨ和ＧＨ分泌的神经内分泌调控的复杂性。     

大海马垂体糖蛋白激素α亚基的cDNA克隆和序列分析

大海马(Hippocampus kudaBleeker)隶属鱼纲海龙目,是一种名贵的海产中药材,也是重要的海洋保护鱼类。我们通过快速扩增cDNA末端(rapid amplification of cDNA ends,RACE)的方法,首次从大海马的垂体总RNA中扩增出其垂体糖蛋白激素α亚基(pituitary glycoprotein hormoneαsubunit,PGHα)全长cDNA,其cDNA全长741bp(不包括polyA尾),5′和3′非编码区分别含有76和314bp,开放读码框为351bp,编码117aa的PGHα亚基前体(包括23aa的信号肽和94aa的成熟肽)。和其他脊椎动物一样,大海马PGHα亚基含有10个半胱氨酸残基,2个脯氨酸残基和2个N-糖基化位点。序列分析发现,大海马PGHα亚基的成熟肽与其他物种的同源性为50%—61.7%,其中与鲈形目和合鳃目的同源性最高(61.7%),而其信号肽与其他物种的同源性仅为8.7%—39.1%左右。这些结果表明大海马与已知的脊椎动物PGHα亚基同源性都比较低,是一种比较独特的鱼类。大海马PGHα亚基的全长cDNA克隆对海马垂体糖蛋白激素的结构和功能研究以及海马的养殖和保护有着重要的意义。     

虹鳟胰岛素样生长因子Ⅰ和Ⅱ在大肠杆菌中的融合表达及促有丝分裂活性

The preparation of recombinant rainbow trout insulin like growth factorsⅠ(IGF Ⅰ) andⅡ(IGF Ⅱ) using the His6 fusion polypeptide technique and the mitogen ic activities of these compounds were investigated. Rainbow trout IGF Ⅰand IGF ⅡB C A D domain cDNA were subcloned into expression vector pET 15b (Nova gen, USA) and expressed in host E. coli BL21 (DE3) as fusion polypeptides co ntai ning a stretch of 6 histidines at the N terminus (referred as His6 fusion polyp e ptide). The addition of IPTG (0 4 mmol/L) induced the expression of polypeptide s with a molecular weight of about 10 0 kDa. The expressed proteins were ammoniu m sulfate fractionally precipitated and further purified using a Ni 2+ His ·Bind R esin (Novagen, USA) affinity column. The reduced SDS PAGE showed that IGF Ⅰ w as of 80% purity and IGF Ⅱ was of 90% purity. The rainbow trout IGF Ⅰ His6 fusi on polypeptide showed dose dependent mitogenic effects on BALB/NIH3T3 cells in th e serum free medium culture, and rainbow trout IGF Ⅱ His6 fusion polypeptide al s o showed this kind of activity, but with lower potency. Taken together,these re sults indicated that the rainbow trout IGF Ⅰ and ⅡHis6 fusion polypeptides pr o duced in E. coli were biologically active, with IGF Ⅰ His6 fusion polypept ide of higher potency.     

雄烯二酮和甲基睾酮诱导雄性日本鳗鲡性腺发育的作用

多次埋植雄激素雄烯二酮（ADSD）或甲基睾酮（MT）均可促进雄性日本鳗鲡（Anguilla japonica)性腺发育成熟,明显提高脑和垂体mGnRH,垂体GtH含量,埋植3次后,MT处理组的GSI及垂体GtH含量显著高于ADSD处理组,MT处理组血清GtH含量在第1次埋植后显著升高,而ADSD处理组在第4次埋植后才显贰高于对照组。这些结果表明：埋植ADSD和MT可反馈作用于雄性日本鳗鲡脑和垂体,促进GnRH和TtH的合成和分泌,进一步诱导精巢发育。而且MT的作用效果较ADSD快。     

生长激素受体的研究进展

生长激素（GH）在促进动物生长、发育等代谢过程中起着重要作用,GH发挥生理作用的第一步是与靶细胞膜表面的生长激素受体（CHR）结合。现已基本阐明了CHR的结构及由CHR介导的信号转导途径,对GHR基因表达调节的机制也有了一定的了解。GHR是由约620个氨基酸组成的单链跨膜糖蛋白,其胞外区、跨膜区及胞区内分别由约245、25及350个氨基酸组成。由GHR介导的信号转导途径主要有：①酪氨酸激酶系统;②蛋白激酶C途径;③胰岛素受体底物途径。营养状况及GH等内分泌因子对GHR的表达也有调节作用。     

半胱胺盐酸盐和LHRH-A对黄鳍鲷IGF-Ⅰ基因表达和生长的影响

本文以黄鳍鲷 (Sparuslatus)为研究对象 ,利用GeneRaceTM 技术 ,从其肝组织中克隆出类胰岛素生长因子 (IGF Ⅰ )cDNA ,并应用半定量RT PCR方法研究了半胱胺盐酸盐 (Cysteaminehydrochloride)和LHRH A对其肝组织IGF Ⅰ基因表达的影响。黄鳍鲷IGF ⅠcDNA全长为 84 0bp ,编码 185aa多肽 ;序列分析表明 ,黄鳍鲷IGF Ⅰ基因编码的氨基酸序列与金鱼的同源性为 75 8% ,与牙鲆的同源性为 86 5 % ,与同属鲷科的黑鲷同源性高达 10 0 % ,证明鱼类类胰岛素生长因子是非常保守的 ,E区域分析结果表明黄鳍鲷IGF Ⅰ属Ea 4型。在饲料中投喂CSH、LHRH A等添加剂 ,实验组黄鳍鲷鱼种的相对生长率、垂体GH含量、肝脏IGF ⅠmRNA水平均显著高于对照组。以上结果提示 :CSH、LHRH A能促进黄鳍鲷生长激素的合成和IGF Ⅰ基因的表达 ,从而促进鱼种的生长     

五种黄精属植物的蛋白水解酶谱研究

用蛋白水解酶复性电泳方法 (G- PAGE)分析了 5种黄精属植物根状茎和叶的蛋白水解酶的种类和活性。结果表明 :(1)它们的根状茎均含有 85k D和 55k D的蛋白水解酶 ;叶均含有 82 k D的蛋白水解酶 ;(2 )根状茎和叶的蛋白水解酶种类和活性有很大差异 ,叶的蛋白水解酶活性为根状茎的 10倍 ,它们的活性均受 p H影响 ,其最适 p H为 7;(3)每种植物都含有自己特有蛋白水解酶 ;(4 )蛋白水解酶在植物鉴定中有参考价值