新型人白细胞介素－2突变点的分析鉴定

对新型人白细胞介素-2(IL－2－ser－125)进行了精制和纯度指标的鉴定。蛋白质N端序列分析表明产品中l／3部分N端缺失Met,这种微观不均一性在等电聚焦和毛细管电泳中有所反映。此外,对新型人IL－2的含点突变残基的多肽进行氨基酸序列分析,证实确由Cys－125突变成ser。     

大鼠甘氨肽酰化单氧酶基因的克隆与表达

本文采用原位杂交及ＰＣＲ方法,从大鼠脑ｃＤＮＡ库中,筛选到３个大鼠甘氨肽酰化单氧酶（ｒＰＡＭ）基因片段。经ＤＮＡ全序列分析表明,它们跨越ｒＰＡＭ－２全部编码区。通过点突变、ＰＣＲ重组技术等,分别拼接出此双功能酶的ｒＰＨＭ（氧化酶）、ｒＰＡＬ（裂解酶）及其ｒＰＡＭ全酶基因,并构建了多种大肠杆菌表达质粒。经温敏诱导。高效表达了ｒＰＡＭ－Ｎ２６０片段,并制各获得阳性抗血清,可用于免疫检测天然或重组的ＰＡＭ。而ＳＤＳ－ＰＡＧＥ和Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ分析结果显示,ｒＰＨＭ和ｒＰＡＭ在大肠杆菌中均获得了表达,其中ｒＰＨＭ表达量占全菌总蛋白的１０％以上。进一步研究还发现,通过采用低温和加二价铜离子诱导表达,可提高ｒＰＨＭ产物的可溶性及稳定性。     

毛细管电泳测定牛红细胞超氧化物歧化酶的巯基位点

本文介绍了毛细管电泳分析蛋白质酶解产物中含巯基多肽的方法。还原的及天然的牛红细胞超氧化物歧化酶(SOD)经4-乙烯吡啶修饰后,由TPCK-胰蛋白酶水解,在254nm检测到还原的SOD水解物中含3个巯基多肽,天然的SOD为1个疏基多肽且其毛细管电泳行为与上述3个多肽之一相一致。分析它们的氨基酸顺序,证实Cys-6为游离的巯基,Cys-55和Cys~(-144)形成二硫键。     

蛋白质和多肽 C 端氨基酸序列研究进展

C 端序列测定长期以来是蛋白质化学领域中的一大难题,但是生物化学与分子生物学中的许多研究表明了 C 端序列的重要性.文中介绍了 C 端测定的一些最新技术,尤其侧重于化学降解法,特别是运用商品化的 N 端分析仪器分析 C 端序列,增强了仪器的通用性.文中还推荐了几种 C 端标记进而分离 C 端肽段,然后用 Edman化学法测定 C 端序列的简便方法,有一定的可行性.     

蛋白质和多肽分离分析技术的新进展

本文介绍了蛋白质和多肽分离分析的一些最新进展。对氨基酸分析中水解及衍生化这二个步骤由手工发展到自动化进行了简要的阐述.关于HPLC则主要侧重于微柱分析和制备分离,这是与生物工程有关的二个重要技术。本文还用几个例子说明了毛细管电泳的高分辨力。并对蛋白质顺序分析技术进行了概括与评价。