京津冀风沙源区沙化土地治理关键技术研究与示范

京津冀风沙源区是我国北方生态屏障的重要组成部分。面向我国北方风沙区沙化土地综合治理、典型脆弱生态修复与保护等重大科技需求,京津冀风沙源区沙化土地治理关键技术研究与示范项目将综合运用长期定位观测、控制实验、多源遥感数据融合、技术示范等方法,重点研究京津冀风沙源区土地沙化形成机制与生态修复机理,研发一批沙化土地治理与产业化关键技术,并在各治理区开展试验示范,集成京津冀风沙源区沙化土地治理与产业化技术体系,构建沙化土地综合整治空间决策支持系统,为京津风沙源治理工程建设、保障京津冀地区生态安全及满足2022年北京冬奥会生态需求提供科技支撑。     

铁皮石斛DORCA基因的克隆及表达分析

为了研究铁皮石斛的光合特性,根据Rubisco活化酶(RCA)基因的保守序列设计兼并引物,采用RT-PCR和RACE方法从铁皮石斛叶中分离到一个RCA基因,命名为DORCA(GenBank登录号KT205841)。DORCA基因cDNA全长为1 724bp,包含1 317bp开放阅读框(ORF),编码438个氨基酸。系统进化分析显示,DORCA与马蹄莲ZaRCA(AAK25801.1)亲缘关系最近。生物信息学分析表明,DORCA与其他植物的RCA蛋白具有较高一致性,属于RCA的β亚基。DORCA蛋白具有定位于叶绿体的N端转运肽,2个保守的ATP结合结构域和多个磷酸化位点。实时荧光定量PCR(qRT-PCR)分析表明,DORCA基因在茎、叶中表达;在自然光周期条件下,DORCA基因在8:30时表达量最高,20:30时表达量最低,具有明显的光诱导表达特性。     

双歧三联活菌胶囊联合多烯磷脂酰胆碱胶囊对非酒精性脂肪性肝炎患者脂质过氧化损伤的保护作用

目的探讨双歧三联活菌胶囊联合多烯磷脂酰胆碱胶囊对非酒精性脂肪性肝炎(NASH)患者脂质过氧化损伤的保护作用。方法选取80例NASH患者随机分为观察组和对照组各40例。两组患者予以调整饮食和适当体育锻炼。对照组予以多烯磷脂酰胆碱胶囊456mg/次,3次/d,口服。观察组在对照组基础上加用双歧三联活菌胶囊630mg/次,2次/d,温水口服治疗,连用8周。检测并比较两组患者治疗前后肝功能指标[丙氨酸转氨酶(ALT)和γ-谷氨酰转肽酶(γ-GT)]、肝/脾CT比值及血清氧化应激参数[丙二醛(MDA)和超氧化物歧化酶(SOD)]水平的变化。结果对照组与观察组患者治疗期间分别失访3例与5例,两组失访率比较差异无统计学意义(χ2=0.14,P0.05)。治疗8周后,两组患者ALT和γ-GT水平较前明显下降,肝/脾CT比值较前明显上升(t=2.39、2.24、2.19、3.37、3.15、2.92,P0.05或P0.01),且观察组下降或上升值比对照组更明显(t=2.27、2.26、2.13,P0.05);两组血清MDA水平较前明显下降,SOD水平较前明显上升(t=2.14、2.29、2.94、2.97,P0.05或P0.01),且观察组下降或上升值比对照组更明显(t=2.28、2.15,P0.05)。结论双歧三联活菌胶囊联合多烯磷脂酰胆碱胶囊治疗NASH的疗效显著,对脂质过氧化损伤具有保护作用,减少肝脏脂肪过度沉积和改善肝功能指标。     

云南不同菜区小菜蛾对三种生物农药的抗药性及其变化趋势

【目的】通过抗药性监测掌握滇中通海和滇西弥渡菜区小菜蛾Plutella xylostella(L.)种群对3种生物农药的抗药性水平及其变化趋势,为抗性治理提供技术支持。【方法】2008—2015年,在室内采用浸叶法测定了云南两个菜区小菜蛾种群对阿维菌素、多杀菌素和苏云金杆菌的抗药性。【结果】2008年抗药性测定结果表明,滇中通海、滇西弥渡菜区小菜蛾对阿维菌素和多杀菌素的抗药性水平均为高抗,对阿维菌素LC50值分别34.017和25.688 mg/L,抗性倍数为1 700.85和1 284.40倍;对多杀菌素LC50值分别13.728和19.830 mg/L,抗性倍数为114.40倍和165.25倍,两菜区对多杀菌素的抗性也为高抗;两菜区小菜蛾对苏云金杆菌敏感,LC50值分别0.530和0.538 mg/L,抗性倍数为2.04倍和2.07倍,属于抵抗水平。到2015年,通海和弥渡菜区小菜蛾种群对阿维菌素的抗性倍数分别下降到了455.70倍和255.05倍,下降趋势显著,但两菜区仍属高抗水平;对多杀菌素的抗药性下降趋势不显著,抗性倍数分别为35.56倍和75.28倍,为中抗水平,但年度间变化幅度较大,LC50为0.885~19.830 mg/L;两菜区对苏云金杆菌仍敏感,抗性倍数分别为5.41倍和1.73倍。【结论】总体上,2008—2015年度间有差异,通海和弥渡菜区小菜蛾种群对3种药剂的抗药性基本一致,对阿维菌素和多杀菌素的抗药性有所下降,但仍处于高抗水平,对苏云金杆菌一直保持在抵抗水平,建议生产上可以轮换使用苏云金杆菌,以提高对小菜蛾的持续控制效果。     

耻垢分枝杆菌MSMEG_6281 过表达对菌株生长和形态的影响

【目的】耻垢分枝杆菌(Mycobacterium smegmatis mc2155,mc2155)MSMEG_6281为结核分枝杆菌自溶素Rv3717的同源蛋白,通过建立过表达MSMEG_6281的耻垢分枝杆菌菌株,推测该蛋白对耻垢分枝杆菌肽聚糖代谢的影响。【方法】利用RT-PCR方法检测乙胺丁醇(Ethambutol,EMB)作用后MSMEG_6281基因的表达变化;以耻垢分枝杆菌基因组DNA为模板,采用PCR技术克隆MSMEG_6281基因,构建分枝杆菌表达质粒p VV16-MSMEG_6281,进一步建立MSMEG_6281过表达的耻垢分枝杆菌菌株;利用生长曲线检测MSMEG_6281过表达对耻垢分枝杆菌生长的影响;利用扫描电子显微镜分析MSMEG_6281过表达引起的耻垢分枝杆菌形态变化。【结果】EMB处理引起MSMEG_6281基因表达上调;构建了过表达MSMGE_6281的耻垢分枝杆菌菌株(mc2155/p VV16-MSMEG_6281);过表达MSMGE_6281的耻垢分枝杆菌生长缓慢,菌体形态由短杆状转变为长杆状。【结论】MSMGE_6281的过表达可改变耻垢分枝杆菌形态。MSMGE_6281的功能与细胞壁肽聚糖水解相关,在mc2155细胞壁形态维持方面发挥重要作用。     

几种海藻和赤潮藻的DCMU增益荧光比率及其与增殖速率的关系

本文研究了红藻海膜(Halymenia sinensis)，绿藻孔石莼(Ulva pertusa)，褐藻裙带(Underia pinnatifida)及蓝藻钝顶螺旋藻(Spirulina platersis)的DCMU增益荧光比率(FD／FN)。其中海膜的比率最高(3．9)，石莼及螺旋藻次之(2．5和2．8)，裙带(采自夏季)的比率最低(1.7)。脱水及热处理下和藻体老化时，FD／FN值显著下降。在实验室条件下分批培养的两种赤潮藻海洋原甲藻(Prorocertrum micans)和微小角毛藻(Chaetoceras minutissmus)，其增殖过程中最大增益荧光比率较最大增殖速率出现早，这一结果为赤潮的预报提供了依据。     

表面响应法优化黑曲霉过氧化氢酶的发酵工艺*

采用表面响应法 (responsesurfacemethodology)研究了黑曲霉发酵过氧化氢酶过程的搅拌与通风条件的优化 ,获得了 1个二次模型用于描述搅拌与通风对产过氧化氢酶的影响。当搅拌与通风量分别为 691r/min、 1 3L·L^-1 ·min^-1 时 ,黑曲霉产过氧化氢酶水平最高。     

V型分泌系统菌体表面展示F18大肠杆菌黏附素及其受体结合位点的确定

自主转运蛋白（V型分泌系统）的β结构域已被证明可以将异源性多肽展示在细菌表面。运用DNA重组技术优化构建V型分泌系统MisL并在菌体表面展示F18大肠杆菌黏附素FedF及其受体结合域FedF1。含重组质粒pnirBMisL-fedF或pnirBMisL-fedF1大肠杆菌（E．coli）DH5α经厌氧诱导后,分别与兔抗F18ab菌毛FedF亚单位单因子血清和F18大肠杆菌黏附素受体易感性仔猪的小肠上皮细胞做玻板凝集试验和体外黏附试验,结果表明上述两株诱导表达重组菌与FedF抗血清发生明显的凝集反应,且能较好地黏附于F18大肠杆菌黏附素受体易感性仔猪小肠上皮细胞。而菌体表面展示F18大肠杆菌黏附素FedF突变体FedF（M）（黏附素受体结合域第88和89位组氨酸残基双突变为丙氨酸）的重组菌则失去上述凝集和黏附特性。以上试验结果说明,F18大肠杆菌黏附素FedF及其受体结合域FedF1在大肠杆菌表面得到了功能性表达,并进一步证明了位于FedF受体结合域内第88和89位组氨酸残基对FedF受体结合域的形成至关重要。     

太湖流域晚粳稻地方种资源的表型遗传多样性

对368份太湖地区晚粳稻地方种材料的植株及品质性状进行分析与测定,结果表明种质问的性状均有极显著差异。植株形态及穗粒特性中,株高的变化从120．5～160．5cm,每穗总粒数变化在69．9～144．0粒／穗,千粒重的极差达10．7g。在品质性状上,整精米率变化在50．05％～77．05％间,垩白率、垩白度平均48．31％、5．36％,直链淀粉含量、蛋白质含量分别变化在12．8％～25．8％、7．55％～14．55％,平均分别为17．5％、9．42％,总体加工、蒸煮品质较优,外观品质较差。不同级分的种质资源数量的分布总体上亦呈正态分布的特征,如株高主要集中在137cm左右,占41．7％,每穗总粒数主要分布在92．3～110．0粒／穗间,占57．2％,千粒重主要在27．0～28．0g间,占41．7％。种质材料的植株及品质性状均具有较高的遗传多样性,穗粒性状、品质性状、植株形态性状的遗传多样性指数分别为2．02、1．87、1．54。种质资源材料中共有15个大穗型种质,穗粒数超过了140粒／穗,如天下第一种、千斤稻、晚慢种等,还有一些穗粒数低于70粒／穗的小穗型品种,如白叠谷、硬头颈、绿种等,直链淀粉含量≤15％的种质有22个,如来自吴江的田鸡青、野凤凰,也有一些高直链淀粉含量的种质材料,如矮土种、红芒种、木樨球和野稻。优质加工、外观品质的种质资源数量较少,吴江的晚洋稻、野凤凰两个材料属于低直链淀粉含量并且加工、外观品质为优质的种质资源。     

高粱属A-PAGE 图谱的建立及在种子鉴定中的应用

以高粱、苏丹草等5种高粱属植物的种子为材料,利用酸性聚丙烯酰胺凝胶电泳(A-PAGE)检测其醇溶蛋白.同时研究了丙酮处理、样品上样量和凝胶浓度对电泳的影响.结果表明:样品经丙酮处理后,在上样量为32μg、凝胶质量分数为15%时电泳可以得到清晰的A-PAGE图谱,据此可以鉴定5种高粱属植物.