青霉素酰化酶在快速蛋白液相色谱仪上的分离纯化

由大肠杆菌AS1.76产生的青霉素酰化酶具有水解青霉素G产生6-APA,水解重排酸产生7-ADCA的作用,并且也具有合成青霉素类或头孢霉素类的作用。为了研究酶的物理化学性质,我们用Pharmacia FPLC系统对比酶进行了分离纯化,得到了聚丙烯酰胺凝胶电     

低钙浓度下血小板溶解液中肌动蛋白与肌球蛋白的相互作用

当低浓度的Ca~(++)加入到血小板溶解液时(Ca~(++)/EGTA=0.56,游离Ca~(++)=1.22×10~(-7)mol/L),立即形成白色沉淀。这种沉淀经SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定为肌动蛋白、肌球蛋白和某些未知蛋白的复合物。沉淀的形成与钙的浓度有关。当Ca~(++)浓度从9.94×10~(-9)mol/L逐渐上升至1.22×10~(-7)mol/L时,溶液的浊度也逐步上升。当血小板溶解液事先与三氟拉嗪或氯丙嗪(50μmol/L)保温,然后再加入Ca~(++)时,白色沉淀同样形成,浊度与Ca~(++)浓度的关系曲线也保持不变。在游离Ga~(++)浓度为2.2×10~(-8)mol/L时,血小板溶解液生成沉淀的时间过程也不受钙调蛋白抑制剂的影响。药物对沉淀的Mg~(++)-ATPase活力有轻微抑制作用。这些结果表明,在休止血小板细胞中(游离Ca~(++)浓度10~(-7)mol/L),大部分肌动蛋白已与肌球蛋白和其他一些未知蛋白形成复合物。在复合物中肌动蛋白以F-型存在。     

人血清高密度脂蛋白主要载脂蛋白的分离纯化及其多态现象

本文报道人血清高密度脂蛋白(HDL)的主要载脂蛋白(apoHDL)的分离纯化和其多态型(Polymorphism,Isoform)的初步研究。首先用硫酸右旋糖酐沉淀,结合角度头密度梯度超速离心的方法,从人血清中提取高密度脂蛋白。分离纯化的高密度脂蛋白在0.5％琼脂糖和3.75％聚丙烯酰胺电泳中显示一条带,经0.1％SDS-10％聚丙烯酰胺电泳鉴定未发现有血清白蛋白的污染。纯的HDL在低温下用醇醚混合液脱脂获得载脂蛋白(apoHDL)。经过Sephadex G-200凝胶过滤柱,apoHDL被分为五个蛋白峰。0.1％SDS-10％聚丙烯酰胺凝胶电泳的鉴定表明峰Ⅰ、峰Ⅱ为载脂蛋白聚集体,主要含apoA-Ⅰ和apoE;峰Ⅲ为纯的apoA-Ⅰ;峰Ⅳ含有apoA-Ⅱ、apoC和apoA-Ⅰ;峰V主要为apoC。令人感兴趣的是,经聚丙烯酰胺等电聚焦电泳鉴定apoA-Ⅰ有八种多态型。这些结果对于深入研究载脂蛋白的结构、功能和代谢,对于研究高密度脂蛋白的亚类及其抗动脉粥样硬化的机理都是有益的。     

关于使用NIH Cetus公司IL-2进行适应免疫疗法研究的状况

Steven A.Rosenberg在1985年12月5日《新英格兰医学杂志》上发表了采用Cetus公司重组IL-2(连锁-2)所进行的适应免疫疗法临床实验结果,对采用常规疗法治疗的25个晚期癌症(黑色素紫瘤、肠癌等等)患者,施以适应免疫疗法,注射IL-2,癌体积缩小了一半以上的11人(其中1人的完全消失)。     

用anti-RNA遏制要不得的基因

anti-RNA——研制者称之为反(anti-)mRNA、反义(anti-sense)RNA、     

花生根瘤菌抗药性菌株的选育

花生接种根瘤菌有明显的增产效果,但是在老种植区,由于土壤中存有大量的根瘤菌,人工接菌效果不佳。解决这个问题的关键是选育竞争力与感染力强和固氮效率高的菌株。本文主要报道,用抗药标记法选育优良菌株和鉴定人工接种效果。     

粘虫迁飞能源物质的研究

粘虫具有迁飞特性。本研究对迁飞型和居留型的粘虫雌、雄蛾进行生理测定,分别分析了虫体糖原、总脂肪含量,并对虫体腹腔内脂肪体显微切片进行组织学观察,其结果表明,脂肪是粘虫迁飞的主要能源物质。     

克隆基因转入植物细胞的一般方法

本文介绍一种能将任何克隆基因转入植物细胞的方法,而不论其基因末端或中间的限制酶切点如何。已经构建了一种寄主范围很广的中间载体pGV1117,在其兰曙红着色的pTiC58质粒右端T-区片段含有Hind Ⅲ-23。利用EcoRI甲基化酶和EcoRI接头的连接在胞内所起的保护作用、将带有兔子β-珠蛋白基因的一段染色体DNA插入pGV1117质粒。转移到根瘤病土壤杆菌(Agrobacterium tumefaciens)中以后,通过体内重组把该基因插入pTiC58的T-区。受损伤的烟草幼苗被感染后,导致完整的珠蛋白基因作为T-DNA的一部分而转入植物基因组。虽然,在组织培养期间,这个基因能被稳定保留,但是在转化植株细胞中没有检测到β-珠蛋白特异的转录本。     

苏芸金杆菌的一个新血清型

苏芸金杆菌云南变种(Bacillus thurtngtensts subsp. Yunnanensis)113菌株的H-抗原和 H-抗血清均与已知苏芸金杆菌H一血清型l到19的所有参考标准菌株的H一抗血清和H一抗原不发生交叉凝集反应。113菌株的生化反应结果与所有参考标准菌株也不相同。此外,113菌株对致倦库蚊(Culex pipiens var. quinquefaseiatces)(双翅目)(Bombyx mori) (鳞翅目)幼虫均无毒性。 因此,113菌株是一个新血清型20,即苏芸金杆菌云南变种,血清型20(Bacillus thuringiensis subsp. Yunnanensis H20)。