靶向下调FOXM1基因表达对乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖的影响

目的：探讨靶向抑制FOXM1对乳腺癌细胞增殖能力的影响,为乳腺癌的个性化靶向治疗提供理论依据。方法：利用重组真核转录载体pSilencer1．0-U6-FOXMI—shRNA,脂质体法转染乳腺癌细胞株MDA-MB-231,下调其FOXM1基因表达。采用四甲基偶氮唑盐（MTT）比色法、平板克隆形成实验观察细胞增值曲线以及克隆形成能力;采用实时定量·聚合酶链反应（Real—timeqPCR）、蛋白免疫印迹法（Westemblot）分别检测FOXMl基因在mRNA、蛋白水平的表达变化。结果：重组载体pSileneerl．0-U6-FOXMl-shRNA转染MDA-MB-231细胞后,与对照组相比,增殖速率明显下降（P〈0．05）,平板克隆形成显著减少（P〈0．05）,重组载体转染后显著抑制MDA—MB-231细胞中FOXM1基因在mRNA、蛋白水平的表达。结论：沉默FOXMI基因对乳腺癌细胞株MDA—MB-231生长具有抑制作用,为阐明乳腺癌发病机制提供了新的切入点,也为临床抑制肿瘤生长提供了新的作用靶点。     

Endogenous Small RNA Clusters in Plants

In plants, small RNAs（sRNAs） usually refer to non-coding RNAs（ncRNAs） with lengths of 20–24 nucleotides. sRNAs are involved in the regulation of many essential processes related to plant development and environmental responses. sRNAs in plants are mainly grouped into microRNAs（miRNAs） and small interfering RNAs（siRNAs）, and the latter can be further classified into trans-acting siRNAs（ta-siRNAs）, repeat-associated siRNAs（ra-siRNAs）, natural anti-sense siRNAs（nat-siRNAs）, etc. Many sRNAs exhibit a clustered distribution pattern in the genome. Here, we summarize the features and functions of cluster-distributed sRNAs, aimed to not only provide a thorough picture of sRNA clusters（SRCs） in plants, but also shed light on the identification of new classes of functional sRNAs.     

siRNA抑制S100A4 表达对卵巢癌细胞CP70生物学特性的影响

摘要 目的：探讨人卵巢癌顺铂耐药细胞株CP70沉默S100A4 基因后,CP70细胞对顺铂敏感性、凋亡及细胞迁移的影响。方法：设计并合成S100A4基因特异性的siRNA并转染入卵巢癌细胞CP70,48 h后应用RT-PCR和Western Blot检测在mRNA和蛋白水平siRNA对S100A4的影响,MTT法检测转染 siRNA后卵巢癌细胞CP70对顺铂敏感性的变化。;用流式细胞术检测顺铂（40 μM） 对转染S100A4 siRNA后对卵巢癌细胞CP70凋亡的影响,Transwell法观察siRNA抑制S100A4后对卵巢癌CP70迁移能力的影响。 结果：与空白对照组、阴性对照组相比,S100A4 siRNA转染组CP70细胞的S100A4基因和蛋白表达降低(P<0.01)。MTT法检测顺铂敏感性发现S100A4 siRNA转染组CP70细胞顺铂敏感性增强。在顺铂刺激下,siRNA转染组细胞凋亡率高于其他各组,差异具有统计学意义（P<0.05）。Transwell发现CP70细胞迁移能力明显下降（P<0.05）。结论：S100A4 siRNA能够明显抑制CP70细胞S100A4的表达,从而增强细胞对顺铂的敏感性,促进细胞凋亡,减弱细胞的迁移能力。S100A4有望成为逆转卵巢癌铂类耐药的治疗靶点。     

STAT3小干扰RNA的构建及对缺氧复氧人肾小管上皮细胞凋亡的影响

目的:构建信号转导与转录因子3(STAT3)小干扰RNA(siRNA)表达载体,并观察其对缺氧复氧后人肾小管上皮细胞(HKC)凋亡的影响。方法:设计3对人STAT3 siRNA靶序列,用DNA重组技术克隆至质粒pRNAT-U6.1/neo中,构建重组质粒pRNAT-U6.1-STAT3 siRNA,检测并筛选出最佳抑制效率的siRNA质粒载体。重组质粒转染至缺氧复氧后HKC细胞,Western blotting和Real Time-PCR测定STAT3蛋白和mRNA表达量,流式细胞仪测定细胞凋亡,间接荧光法测定Bcl-2和Bax表达的变化。结果:靶向STAT3基因表达的质粒载体构建成功,并筛选出抑制效率最佳的重组质粒。缺氧复氧后HKC细胞STAT3表达、凋亡率和Bax/Bcl-2比值增加;缺氧复氧后HKC细胞转染重组质粒后STAT3表达、凋亡率和Bax/Bcl-2比值明显降低。结论:成功构建并筛选最佳抑制效率的靶向STAT3的重组质粒载体。该载体可有效抑制缺氧复氧后HKC细胞中STAT3信号转导通路的活化,并进一步通过上调Bcl-2、下调Bax蛋白的表达,从而抑制细胞凋亡。     

蝇蛹金小蜂对桔小实蝇蛹的寄生功能反应

在温度25±1℃、相对湿度70±5%、光照周期（L∶D）14 h∶10 h条件下,研究了蝇蛹金小蜂对桔小实蝇蛹的寄生功能反应及干扰效应。结果表明,寄主密度、寄主日龄均影响寄生蜂的寄生效能。蝇蛹金小蜂对桔小实蝇2日龄（N=2）、4日龄（N=4）蛹的寄生功能反应均符合HollingⅡ模型,其方程分别为Na= 0.4494N2/ (1+ 0.0294N2)、Na= 0.5586N4/ (1+ 0.0253N4)。24h内单头雌成蜂最多可寄生2日龄、4日龄蝇蛹数量分别为15.29、22.08头。自身密度对蝇蛹金小蜂寄生产生一定的干扰效应,其干扰效应符合Hassell－Varley模型（a= 0.0719P－0.2526）,表明蝇蛹金小蜂雌蜂的发现域随着自身密度的增加而逐渐变小,雌蜂个体间干扰效应降低了寄生效能。     

siRNA沉默SIRT1基因对宫颈癌细胞HeLa增殖和凋亡的影响

化学合成靶向SIRT1基因的小干扰RNA,脂质体法转染人宫颈癌细胞株HeLa,观察小干扰RNA沉默SIRT1基因对HeLa增殖及细胞凋亡的影响。在优化siRNA SIRT1转染条件的基础上,应用RT-PCR和Western blot分别检测各组SIRT1 mRNA、SIRT1蛋白及凋亡相关蛋白的表达;CCK-8法检测细胞增殖抑制率;Hoechst荧光染色法和流式细胞仪检测细胞凋亡。结果表明,siRNA SIRT1转染细胞组SIRT1 mRNA水平和蛋白表达量明显低于对照组;siRNA SIRT1转染组细胞增殖受抑制,细胞凋亡率明显增加;凋亡相关蛋白P53、P21表达上调,Survivin表达下调。上述结果表明:siRNA SIRT1诱导的HeLa细胞凋亡与P53、P21、Survivin通路关系密切,但siRNA SIRT1诱导HeLa细胞凋亡的详尽机制有待进一步研究。     

迁地保护 保种江豚

<正>国家需要下决心,抓紧建立分散的迁地保护区群,确保长江江豚种群繁衍下来。前要想拯救长江江豚,最现实的办法是建立5~10个迁地保护区,就像天鹅洲故道那样。20世纪80年代,国家在湖北石首天鹅洲建立了麋鹿保护区。借助这一优势,再加上当时天鹅洲故道内几乎没有人类活动干扰,我们于上世纪90年代初在此建立了白     

额叶冲突加工机制及年老化改变的事件相关电位研究

目的：探讨大脑额叶对冲突信息的加工处理机制及其年老化改变,探索敏感的事件相关电位（ERPs）指标。方法：研究对象为15例正常老年人（老年组）和15例青年成人（青年组）,ERPs检查采用改良的Eriksenflanker视觉刺激范式,记录32导脑电、正确率及反应时。结果：与青年组相比,老年组反应时明显延长,反应阶段干扰效应尤其明显。老年组N380出现时间窗延迟,平均波幅两组无差异,源定位分析（IDRETA）显示青年组可见双颞叶、双前额背外侧区域激活,以右侧明显;老年组主要见左颞叶、左前额背外侧、左前额内侧面区域激活。结论：在反应阶段出现冲突信息时,老年人额叶干扰控制功能减退,差异负波N380与老年人左前额背外侧、左侧颞叶等区域在反应选择、执行控制中的活动有关,且增龄改变明显。     

基于趋化因子受体5靶点的HIV-1治疗研究进展

随着人类免疫缺陷病毒(HIV-1)感染在全球的蔓延及耐药株的出现,寻求有效的治疗方法成为当务之急。趋化因子受体5(Chemokine receptor 5,CCR5)是HIV-1侵入靶细胞的主要辅助受体之一。目前已发现许多CCR5拮抗剂,其中一些化合物已进入临床试验或应用;以CCR5为靶点的基因治疗亦取得了一定的进展。本综述以CCR5为靶点的药物和基因治疗两方面的研究进展进行总结。     

沉默Gpr3基因表达对猪卵泡颗粒细胞凋亡的影响

G蛋白偶联受体3（G protein-coupled receptor 3,Gpr3）属于G蛋白偶联受体超家族成员,能够维持卵泡卵母细胞减数分裂的前期阻滞,但在卵泡颗粒细胞中的作用不清。该研究利用RNAi技术,以化学合成的siRNA转染体外培养的猪卵泡颗粒细胞,并利用Real-time PCR和Western blot技术检验Gpr3基因的沉默效果;利用MTT（四甲基偶氮唑盐）、流式细胞术和Real-time PCR技术检测沉默Gpr3基因表达对猪卵泡颗粒细胞凋亡以及凋亡相关基因表达的影响。结果显示,Gpr3-siRNA能够有效地抑制猪卵泡颗粒细胞中Gpr3基因mRNA和蛋白的表达（P〈0.01）;在沉默Gpr3基因表达后,猪卵泡颗粒细胞的细胞活性由0.419升高至0.586,同时细胞凋亡率由2.67%下降至0.42%,并在显著上调Bcl-2表达的同时,下调了Bax的表达（P〈0.05）。结果表明,沉默Gpr3基因的表达抑制了猪卵泡颗粒细胞的凋亡,其机制可能与调控Bcl-2和Bax表达有关。