稻瘟病菌(Magnaporthe grisea)诱导的水稻早期反应基因ER1的5' 端cDNA片段克隆及序列分析

研究高等生物基因表达与调控的一个重要方面是分离基因的编码区及其上游的调控序列（ＤｅＶｅｅｒ等１９９７）,这需要获得一个基因的ｃＤＮＡ全长及从植物基因组获取全基因。在前文（周建明等１９９９）中曾经分离了稻瘟病菌侵染诱导的水稻早期反应基因ＥＲ１的ｃＤＮＡ片段,但是运用ｍＲＮＡ差异显示技术分离的ｃＤＮＡ片段往往只有近ｍＲＮＡ３’端的一部分,难以反映基因的结构及功能特点,因此,必须进一步分离其５’端的部分才有可能比较全面地了解此基因的特点。ＲＡＣＥ（ｒａｐｉｄａｍｐｌｉｆｉｃａｔｉｏｎｏｆｃＤＮＡｅｎ…     

光合细菌Rhodobacter sphaeroides glnB-lacZ融合子的构建与表达

亚克隆了Rhodobacter sphaeroides glnB启动子,以pMP220为载体构建成glnB-lacZ融合子。将glnB-lacZ、 nifH-lacZ、 nifA-lacZ分别导入R.sphaeroides谷氨酸合酶突变株gltB-、 gltD-和野生型菌株中,分析了突变对固氮基因转录表达的影响。试验证明,在gltBD突变株中nifH的表达受阻遏,nifA表达水平很低。这证明glt基因的突变引起固氮酶结构基因和固氮正调节基因的转录被阻遏,而glnB基因的表达几乎不受影响。试验还测定了环境中结合态氮和有机酸等信号分子对glnB和nifH表达的影响,发现加入氨或谷氨酰胺后,nifH的表达受到明显的阻遏作用,glnB-lacZ的β-半乳糖苷酶活性虽下降30%左右但不随结合态氮浓度升高而变化,仍维持在一个较高的水平。α-酮戊二酸和丙酮酸对nifH的表达有部分去阻遏作用而对glnB的表达无诱导作用。     

IL—3对人红白血病细胞株珠蛋白基因表达的影响

运用ＲＴ－ＰＣＲ等方法研究了白细胞介素－３（ＩＬ－３）对人类红白血病细胞株（Ｋ５６２细胞）内珠蛋白基因表达的影响,结果显示,Ｋ５６２细胞在诱导前,不能表达β－珠蛋白基因,用ＩＬ－３５０ｕ／ｍｌ诱导Ｋ５６２细胞３ｄ和５ｄ后,可检测到β珠蛋白基因的转录产物,而α珠蛋白基因和γ－珠蛋白基因在诱导前后无明显变化,同时,用苯肼当色细胞的方法检测到：Ｋ５６２细胞在诱导前蓝染细胞数极少,ＩＬ－３诱导Ｋ５６２细胞     

EPO,EPOR及其信号传递研究进展

EPO(Erythropoietin,促红细胞生成素)是促进哺乳动物红系祖细胞增殖和分化的主要细胞团子。EPO与红系祖细胞表面的EPOR(EPO Receptor)结合后,通过信号传递使细胞核内特定基因转录发生改变。与其它造血生长因子不同,EPO主要作用于相对成熟的红系细胞。近年来,随着对人和动物的EPOR分子克隆以及EPOR突变体分析,使我们对EPO与EPOR的相互作用及其信号传递路径有了比较深入的了解。     

光合细菌Rhodobacter sphaeroides glnB—lacZ融合子的构建

亚克隆了Ｒｈｏｄｏｂａｃｔｅｒ ｓｐｈａｅｒｏｉｄｅｓｇｌｎＢ启动子,以ｐＭＰ２２０为载体构建成ｂｌｎＢ－ｌａｃＺ融合子。将ｇｌｎＢ－ｌａｃＺ、ｎｉｆＨ－ｌａｃＺ、ｎｉｆＡ＝ｌａｃＺ分别导入Ｒ．ｓｐｈａｅｒｏｉｄｅｓ谷氨酸合酶突变株ｇｌｔＢ、ｇｌｔＤ和野生型菌株中,分析了突变对固氮基因转录表达的影响,试验证明,在ｇｌｔＢＤ突变株中ｎｉｆＨ的表达受阻遏,ｎｉｆＡ表达水平很低。这证明ｇｌｔ基因的突变引     

水稻转座子Tourist—Os6从sbe1基因启动区切离的证明

为研究ｓｂｅｅ１基因的表达调控机理,籼稻ＩＲ３６品种的ｓｂｅ１基因被克隆。经测序一与已报告的ｓｂｅ１上比,ＩＲ３６水稻品种ｓｈｅ１基因５‘上游区顺序中除了有分散的３２个碱基差异外,值得注意的是缺少一般３３５ｂｐ长的Ｔｏｕｒｉｓｔ－Ｏｓ６序列,并在缺失的位置上留下转座子切离后的特征性足印顺序,这表明ＩＲ３６品种的Ｔｏｕｒｉｓｔ－Ｏｓ６已从ｓｂｅ１基因中切离。因而为Ｔｏｕｒｉｓｔ－Ｏｓ６是可移动的转座     

烟草花叶病毒蚕豆株系外壳蛋白基因及3‘端非编码区的克隆与序列分析

根据烟草花叶病毒Ｕ１株系序列,人工合成引物,用ＲＴ法合成了ｃＤＮＡ后,通过ＰＣＲ技术扩增并克隆了烟草花叶病毒蚕豆株系的外壳蛋白的基因和３‘端非编码区。ＤＮＡ序列测定结果表明,外壳蛋白基因全长４８０个碱基,编码１５８个氨基酸,３’端非编码区全长２０４个碱基,与ＴＭＶ－Ｕ１株系的同源率为１００％。     

红托竹荪多糖对砷中毒大鼠肺损伤的影响

探讨红托竹荪多糖(Dictyophora rubrovalvata polysaccharide, DRP)对砷中毒大鼠肺组织损伤的影响。将SD大鼠(sprague dawley, SD)分为对照组(喂饲普通饲料)、砷染毒组(喂饲50 mg/kg染砷饲料)和红托竹荪多糖组(喂饲50mg/kg染砷饲料,在第4个月同时给与10mg/mL红托竹荪多糖溶液灌胃),每组10只,雌雄各半。4个月后,检测大鼠肺组织砷和血砷含量,对肺组织进行病理学观察,并测定大鼠肺组织超氧化物歧化酶(superoxidedismutase,SOD)、谷胱甘肽(glutathione,GSH)、丙二醛(malondialdehyde,MDA)的活性和含量。砷染毒组的肺组织砷和血砷含量显著高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);红托竹荪多糖组的肺组织砷和血砷含量低于砷染毒组,差异有统计学意义(P<0.05)。病理学观察发现,砷染毒组大鼠肺组织肺泡间隔明显增宽,局部肺泡融合,大量炎性细胞浸润;红托竹荪多糖组大鼠肺组织肺泡壁厚度变薄,肺组织中浸润的炎症细胞减少。砷染毒组与对照组相比,肺组织中的SOD、GSH...     

基于Py-GC/MS分析黑木耳新品种‘农黑2号’木耳黑色素的热裂解产物

利用热裂解-气相色谱质谱联用(pyrolysis gas chromatography mass spectrometry, Py-GC/MS)分析技术测定黑木耳新品种‘农黑2号’黑色素裂解产物组分的种类及含量,为解析黑色素的结构奠定理论基础。本研究通过碱溶酸沉法提取黑色素,并用紫外可见吸收光谱、傅立叶红外光谱、有机元素分析鉴定黑色素,采用Py-GC/MS技术分析其热裂解产物。结果表明,‘农黑2号’黑色素的最大吸收峰值在波长220 nm处,傅立叶红外光谱符合典型的黑色素特征;经有机元素分析,C、H、N、O元素的含量分别为43.47%、5.24%、11.71%和39.58%,不含硫元素,为真黑色素;检出的热裂解产物主要有苯类、苯酚类、吲哚类、苯基腈类、烃类、酸类等物质,其中苯、苯酚、吲哚等化合物为真黑色素的裂解产物。综上所述,‘农黑2号’黑色素为真黑色素,其基本骨架为苯环和吲哚,本研究为精准解析黑木耳黑色素结构提供科学依据。     

用膨化柱填料的方法从红藻中规模分离纯化R-藻红蛋白(英)

以Phenyl_sepharose作为柱填料 ,用streamline柱层析技术从红藻 (Palmariapalmata (Lannaeus)Kuntze)中规模分离捕光色素蛋白———R_藻红蛋白。由于不是传统的从层析柱上方进样 ,而是用泵将样品从streamline层析柱的下方加样 (从下至上 ) ,因而解决了用一般层析柱分离R_藻红蛋白时海藻抽提液中大量的粘性多糖堵塞层析柱的难题。用P .palmata粗提液上样后 ,分别用 0 .2mol/L、0 .1mol/L和 0 .0 5mol/L的 (NH4) 2 SO4溶液从相反的方向 (即从上到下 )洗脱层析柱 ,发现这些洗脱液中的藻红蛋白纯度已经较高。然后将洗脱液透析去盐 ,用阴离子交换柱层析 (Q_sepharose)进一步纯化。经过这两次柱层析后 ,R_藻红蛋白的纯度 (OD565/OD2 80 )超过 3.5 ,高于一般认可的R_藻红蛋白的纯度标准 3.2 ;产率为每克冷冻P .palmata可纯化 0 .12 2mg高纯度的R_藻红蛋白 ,比使用一般分离方法的产率要高 10倍。这些结果表明 ,使用本文报道的方法纯化藻红蛋白 ,将会使作为生化检测试剂的藻红蛋白市场价格大幅度下降。