视网膜色素变性遗传吗？

问:视网膜色素变性男方有,女方没有,对小孩的遗传几率有多大?在怀孕期间可以检查出来吗?患有视网膜色素变性的患者后期会怎样?目前可以治疗吗?     

丹参诱导鼠骨髓间充质干细胞分化为神经样细胞优化方案及电生理研究

分离培养大鼠骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells, MSCs), 采用丹参对4～5代MSCs进行反复多次诱导分化及再分化, 将其诱导分化为神经样细胞, 倒置显微镜下连续观察形态学变化, 通过免疫荧光细胞化学检测神经样细胞巢蛋白(nestin)、神经丝蛋白 (neurofiliament, NF)、突触(小)泡蛋白(synaptophysin) 的表达, 采用细胞膜电位特异的荧光探针DiBAC4(3)标记细胞, 激光扫描共聚焦显微镜动态监测细胞受高钾刺激前后的荧光强度变化, 观察细胞电生理反应.结果显示: MSCs第1次经过丹参诱导2 h后, MSCs伸出突起, 向神经性细胞形态转变, 此时巢蛋白表达率为 (95.1±2.1)% (x±s, n=3), 基本不表达NF; 随着诱导分化及去分化过程的次数增加, 细胞分化为神经样细胞的时间缩短, 突起拉长并交互缠绕呈复杂网状, MSCs第4次经过丹参诱导1 h后, NF表达率(95.3±1.6)% (x±s, n=3), 并表达突触(小)泡蛋白, 5 h后突触(小)泡蛋白表达更为广泛; 激光共聚焦扫描显微镜显示第4次诱导5 h后的细胞在高钾刺激下发生去极化, 胞内荧光强度瞬时增强, 而MSCs空白对照对高钾刺激无反应.本优化诱导方案可以高效率地诱导MSCs分化为具有电生理特性的神经样细胞.     

小尾寒羊颈椎前路椎间盘切除融合模型的建立及评估

目的 颈椎间盘突出症(cervical disc herniation, CDH)是骨科常见疾病之一,随着对该疾病研究的深入及颈椎内植物的发展,建立颈椎融合动物模型成为不可或缺的部分,目前国内对颈椎融合动物模型建立及评估的研究报道较少,本研究以期为颈椎融合相关研究提供完备的动物模型和内植物性能的评估方案。方法 选择小尾寒羊,改良术式后行颈椎前路椎间盘切除融合术(anterior cervical discectomy and fusion, ACDF),将聚醚醚酮(polyetheretherketone, PEEK)椎间融合器(interbody fusion cage, Cage)(对照组)、3D打印钛合金Cage(实验组1)及新方法钛合金Cage(实验组2)分别植入每只羊的不同颈椎节段(C2/3～C4/5),术后行血液学检测、组织病理学分析评估手术恢复情况及材料生物安全性,利用X光、CT、Micro-CT及定量分析、硬组织切片染色、生物力学试验评估内植物的骨长入及骨融合情况。结果 绵羊改良术式ACDF模型建立成功,血液学检测重要指标无显著性差异(P>0.05),组织病理学分...     

常绿阔叶林谱系多样性对幼苗存活率的影响

密度制约机制对于维护生物多样性有非常重要的作用。随着对密度制约机制的深入研究, 人们逐渐认识到: 不仅在种内存在密度制约效应, 亲缘关系相近的物种之间也可能表现出密度制约效应。Webb在2000年提出的NRI (净种间亲缘关系指数)、NTI (净最近种间亲缘关系指数)考虑了比较全面的谱系信息, 获得了广泛的应用。该文采用NRI、NTI来代表种间关系, 并用Logistic回归模型来分析了谱系因子对浙江省开化县古田山自然保护区24 hm²永久监测样地中501个幼苗样方死亡率的影响。通过对6次幼苗调查数据的分析表明: 不仅相同物种密度对于幼苗的死亡率有显著影响, 当密度达到一定水平时, 谱系因子同样也对幼苗的死亡率有显著影响——苗区中个体间的亲缘关系越近, 幼苗个体的死亡率越高。     

人羊膜间充质干细胞对四氯化碳诱导小鼠肝损伤定位修复的研究

目的：观察活体染料羧基荧光素乙酰乙酸（CFSE）标记的人羊膜间充质干细胞对四氯化碳诱导小鼠肝损伤模型的定位修复情况。方法：采用胰蛋白酶-胶原酶消化法从羊膜组织中分离间充质干细胞,通过流式细胞术和免疫荧光等方法进行鉴定。模型组按浓度为20μl/g剂量的四氯化碳和橄榄油混合液诱导小鼠肝损伤,治疗组经小鼠尾静脉注射羧基荧光素乙酰乙酸标记的人羊膜间充质干细胞约1×10⁶个/ml。分别取模型组和细胞移植的治疗组小鼠眼球血和肝组织进行相关检测。结果：分离得到纯度较高的羊膜间充质干细胞;冰冻切片免疫荧光显示移植1周后细胞向小鼠受损肝组织定植,CFSE标记的人羊膜间充质干细胞呈绿色荧光;细胞移植后4周,与模型组比较,细胞移植组小鼠血清中天冬氨酸转移酶、丙氨酸氨基转移酶显著降低,而白蛋白明显升高（P< 0.01）;肝组织病理切片模型组小鼠细胞水肿,坏死灶多见,脂肪变性,可见不同程度的炎性细胞浸润;治疗组小鼠肝组织病理学改变和损伤程度有较明显改善;小鼠肝组织冰冻切片的免疫荧光显示移植4周后人羊膜间充质干细胞周围分泌血清白蛋白。结论：羧基荧光素乙酰乙酸标记的人羊膜间充质干细胞可有效改善肝组织的生理功能,为细胞定位移植治疗肝脏疾病的修复情况提供实验数据。     

IL-12重组质粒联合骨髓间充质干细胞对MCF-7人乳腺癌细胞侵袭及裸鼠移植瘤生长的影响分析

目的探讨IL-12重组质粒联合骨髓间充质干细胞（BMSC）对MCF-7人乳腺癌细胞侵袭及裸鼠移植瘤生长的影响。 方法分离纯化培养BMSC原代细胞,制备BMSC条件培养基,分析BMSC条件培养基对MCF-7细胞株体外增殖和凋亡的影响;建立裸鼠MCF-7转移瘤模型,分为对照组、BMSC组、IL-12组以及联合组,各组每3 d进行一次瘤内注射,共注射3次,15 d后处死裸鼠,比较各组裸鼠肿瘤、脾脏重量。采用χ²检验、t检验以及方差分析进行统计学分析。 结果BMSC条件培养基能够抑制MCF-7细胞增殖,且随着作用时间的延长其抑制作用升高[24 h（13.42±1.93）%,48 h（16.83±1.77）%,72 h（20.21±2.01）,F = 6.271,P = 0.000]。BMSC条件培养基处理MCF-7细胞,可有效促进MCF-7细胞凋亡,且随着作用时间的延长细胞凋亡率升高[24 h（10.82±2.18）%,48 h（18.73±2.95）%,72 h（28.15±3.52）%,F = 9.215,P = 0.000]。与对照组裸鼠肿瘤体积[1 d（124.12±9.28）mm³,3 d（582.41±17.28） mm³,7 d（983.42±42.10） mm³,15 d（793.46±109.38） mm³]比较,BMSC组[1 d（132.61±12.41） mm³,3 d（378.46±23.08） mm³,7 d（542.61±58.49）mm³,15 d（329.48±47.51） mm³]、IL-12组[1 d（119.85±13.10） mm³,3 d（322.75±26.49） mm³,7 d（518.37±67.54）mm³,15 d（302.17±68.53） mm³]以及联合组[1 d（123.41±8.94）mm³,3 d（217.85±24.03）mm³,7 d（318.29±47.32） mm³,15 d（189.27±37.58）mm³]裸鼠肿瘤体积生长速度均减慢,差异具有统计学意义（F_1d=0.827,F_3d=37.583、F_7d=31.472、F_15d=15.372,P < 0.001）;处死各组裸鼠后裸鼠肿瘤质量比较,BMSC组[（529.42±98.74） mg]、IL-12组[（544.01±117.85）mg]以及联合组[（327.55±78.56） mg]均低于对照组[（877.42±120.11）mg],且联合组裸鼠肿瘤质量最低,差异具有统计学意义（F = 10.821,P < 0.001）;而裸鼠脾指数BMSC组（7.58±1.21）、IL-12组（7.63±1.09）以及联合组（10.03±1.52）均高于对照组（5.37±0.89）,联合组裸鼠脾质量最高,差异具有统计学意义（F = 13.411,P < 0.001）。 结论BMSC在体内外均具有抑制MCF-7肿瘤增殖作用,联合使用pcDNA6/IL-12对裸鼠MCF-7转移瘤抑制具有着明显的协同作用。     

人脐带间充质干细胞在Balb/c裸鼠体内的分布情况研究

目的研究人脐带间充质干细胞（hUCMSCs）在BalB/c裸鼠体内的分布。 方法采用DiR标记hUCMSCs,以MTT法检测标记hUCMSCs体外培养的生长增殖,流式细胞术检测标记hUCMSCs的细胞表型,以诱导分化法检测标记hUCMSCs的成骨、成脂、成软骨诱导分化能力,小动物活体成像法检测DiR标记hUCMSCs尾静脉给药后在小鼠体内的分布情况。采用t检验对测得的hUCMSCs增殖数据进行统计分析。 结果0,24,48,72,96,120 h MTT法测得的DiR标记hUCMSCs吸光度值与未标记组相比差异无统计学意义,DiR标记对hUCMSCs细胞表型没有明显影响,对其成骨、成脂、成软骨多向诱导分化能力没有影响,DiR标记hUCMSCs尾静脉给药后,荧光首先分布于肺脏,随时间逐渐迁移至肝脏和脾脏,最终归巢和分布于肝脏、脾脏和肺脏,荧光强度肝脏>脾脏>肺脏,随时间逐渐减弱,至4周时动物肝脏、脾脏和肺脏仍有荧光存在。 结论DiR标记不影响hUCMSCs体外增殖、细胞表型表达和多向诱导分化能力,DiR标记hUCMSCs尾静脉注射后首先分布在肺脏,存在明显的首过效应,然后逐渐迁移至肝脏和脾脏,主要分布和归巢在肝脏、脾脏和肺脏。     

骨髓间充质细胞联合PDMS支架构建移植胰岛微环境的实验研究

目的为了提高移植胰岛的活性和功能,构建适合移植胰岛生存的微环境。 方法采用聚二甲基硅氧烷（PDMS）和氯化钠晶体构建三维支架,联合骨髓间充质细胞（MSCs）、纤维蛋白和胰岛共同构建迷你"人工胰腺"。采用链脲佐菌素（STZ）诱导的糖尿病大鼠移植模型评价效果,将"人工胰腺"移植到糖尿病大鼠大网膜内,对照组行假手术,术后隔天监测移植大鼠血糖水平;数据采用t检验和曼-惠特尼U检验。 结果用PDMS构建的三维巨孔支架,支架内可见大量不规则孔洞空间。胰岛和MSCs可成功装载入支架内,HE染色结果显示,支架孔内存在胰岛,胰岛周围包绕有MSCs。糖尿病大鼠大网膜内移植结果显示,移植后各时间点（1,3,5,7 d）,"人工胰腺"移植组糖尿病大鼠血糖水平分别为（278.70±86.06）mg/ dl、（323.50±44.29）mg/ dl、（283.30±74.00）mg/dl、（304.80±13.33）mg/dl,较假手术对照组（606.00±52.40）mg/dl、（589.70±55.78）mg/dl、（615.00±54.84）mg/dl、（630.30±48.17）mg/ dl均降低,差异具有统计学意义（t = 7.96、9.15、8.82,U = 0.00,P均< 0.01）。 结论MSCs联合PDMS三维支架构建的微环境,可为移植胰岛提供生存的环境,为临床开展胰岛移植提供新的策略。     

高表达microRNA-155的骨髓间充质干细胞对免疫调节的影响

目的探讨骨髓间充质干细胞（BMSCs）中miR-155表达水平改变后,通过诱导树突状细胞（DC）实现对免疫调节能力的影响。 方法实验分为control组、miR-155 agomir NC组、miR-155 agomir组、miR-155 antagomir NC组和miR-155 antagomir组,通过脂质体转染特异性调控BMSC中miR-155表达量后诱导DC 48 h,检测该诱导过程对DC的成熟度和迁移能力的影响;经诱导的DC与T细胞共培养72 h后检测T细胞增殖能力。多组间分析采用One-?way ANOVA进行统计学分析,两组间采用t检验进行统计学分析。 结果流式柱形直观图可见miR-155 angomir组T细胞增殖能力低于其他组。提高miR-155表达水平后,MSCs诱导的DC细胞成熟的表面标志CD40表达量由100%下降至85%（t = 33.71,P < 0.05）;CD86表达水平由100%下降至75%（t = 57.00,P < 0.05）。miR-155 agomir组的BMSCs诱导的DC的迁移能力较其对照组减弱（t = 7.35,P < 0.05）。提高BMSCs中miR-155表达水平后,其诱导的DC的NF-κβ信号通路蛋白表达下降（t = 23.32,P < 0.05）;AKT信号通路蛋白表达量下降（t?= 22.21,P < 0.05）。 结论BMSCs高表达miR-155后,可以通过抑制NF-κβ和AKT途径诱导耐受性DC的产生,通过诱导DC减少T细胞的增殖从而对免疫调节进行影响。