昆明小鼠胚胎成纤维细胞的分离与培养

目的:建立稳定高效的小鼠胚胎成纤维细胞饲养层培养体系.方法:取不同胎龄的小鼠分离原代胚胎成纤维细胞,观察不同胎龄小鼠对分离和培养效果的影响.结果:从不同胎龄小鼠均分离得到胚胎成纤维细胞,但最佳分离时间为13.5～14.5 d;传代时在室温下消化单层贴壁细胞可随时控制消化时间,效果良好.结论:从13.5～15.5 d胎龄小鼠胚胎分离培养胚胎成纤维细胞效果最佳.     

两株乳酸杆菌SY13和LJJ对活性氧的耐受性

【目的】从传统发酵乳制品中筛选具有抗氧化能力的乳酸菌菌株并对其抗氧化特性进行评价。【方法】分别利用乳酸杆菌SY13和LJJ完整细胞和无细胞提取物对亚油酸过氧化的抑制效果,对DPPH自由基、羟自由基、超氧阴离子自由基清除能力,对过氧化氢的耐受性以及对亚铁离子的螯合能力和还原活性进行了研究。【结果】结果表明,SY13和LJJ对亚油酸过氧化的最大抑制率分别达到了62.95%和66.16%;两菌株的无细胞提取物清除超氧阴离子和羟自由基的的效果较好,LJJ完整细胞对超氧阴离子和羟自由基没有清除能力;SY13和LJJ对DPPH自由基的清除能力及对亚铁离子的螯合能力都是完整细胞优于无细胞提取物,还原活性分别相当于305 μmol/L和294 μmol/L的L-cysteine。【结论】以上指标测定的结果说明,这两株乳酸杆菌具有较好的抗氧化能力,具有潜在的应用价值。     

宽体金线蛭嗜水气单胞菌感染的病原检验*

对河北某宽体金线蛭(Whitmania pigra Whitm an)养殖场所养殖的宽体金线蛭发生的病害,进行了发病情况、临床表现、病理变化等方面的检验。同时,择代表菌株进行了16S rRNA基因的分子鉴定,测定了16S rRNA基因序列、分析了相关细菌相应序列的同源性、构建了系统发生树。结果表明所检病例为由嗜水气单胞菌(Aerom onas hydrophila)所引起的感染。分离后做纯培养的10株嗜水气单胞菌均为同种血清型菌株;代表菌株对健康宽体金线蛭的人工感染试验表明了相     

蝮蛇毒蛋白C激活物对凝血系统的影响

目的研究蝮蛇毒纯化蛋白C激活物(PCA)的抗凝机制。方法测定PCA对正常人混浆KPTT、PT、TT的影响,对血液凝血活酶生成试验(BTGT)及PA二期法的影响以及对白兔的KPTT和Fgn的影响。结果PCA在最终浓度为0.025mg/L时对正常人混浆KPTT可明显延长,但PT和TT不受影响;当它的浓度增加到50mg/L,PT也可延长,但TT依然无明显变化;最终浓度为0.0125mg/L时,血液凝血活酶生成明显受抑制;当它的浓度增加到2.5mg/L,凝血酶生成显著减少,但抗凝血酶时间始终无明显变化;PCA可明显延长白兔的KPTT。结论PCA在低浓度时首先抑制凝血系统第一阶段内凝途径,在高浓度时也妨碍外凝途径或共同途径,BTGT和PA二期法比KPTT和PT敏感;PCA具有体内抗凝作用。     

花烛离体培养叶色变异株系的相关性状

以花烛（Anthurium andraeanum）间接器官发生途径中再生出的一株花叶变异植株为原始材料,进行增殖并对得到的3个叶色变异株系的叶色相关性状进行了初步研究。结果表明：通过愈伤组织器官发生途径和腋芽增殖途径对这一花叶苗进行增殖,均分离到3种变异株系,即花叶苗、黄化苗和天鹅绒绿色叶片苗;天鹅绒绿色苗叶片中的叶绿素含量比正常离体苗的含量低;叶片解剖结构表明,叶绿体在叶肉细胞中的分布与其叶片表现型相同,天鹅绒绿色叶片与正常叶片在解剖结构上无明显差异。花烛原套只具有1层细胞,无明显的L2层分生结构,因此叶肉的薄壁细胞完全由向各个方向分裂的原体细胞发育而来,这种组织结构导致花叶叶片中含有叶绿体的细胞和不含有叶绿体的薄壁细胞呈不规则分布。这种花叶株系可以作为育种材料或直接作为盆栽花烛进行推广。     

鱼腥藻Ⅱ型果糖-1,6-二磷酸醛缩酶基因的克隆及其在大肠杆菌中的高效表达

随着更多蓝藻全基因组序列测定完成,蓝藻基因工程研究现已进入后基因组时代。2001年Kaneko等完成了鱼腥藻7120全基因组序列测定,随后人们利用生物信息学的方法对其中一些基因的功能进行了预测,包括Ⅱ型果糖-1,6-二磷酸醛缩酶（FBA）基因,但该基因是否编码Ⅱ型果糖-1,6-二磷酸醛缩酶及该产物的相关酶学特性至今尚未见报道。通过PCR克隆到鱼腥藻7120中预测的Ⅱ型FBA基因,插入到质粒pET-32a的相应位点,构建成原核表达载体pET-FBA-Ⅱ。蛋白电泳结果显示,重组蛋白的表达量占总蛋白含量的23．4％,与蛋白分子标记相比,其分子量约为40kDa。酶学活性测定结果表明,其蛋白粗提物的比活力为11．8U（mgprotein）^-1,具有标准Ⅱ型FBA活性。证实了Cyanobase中关于该基因功能的预测,也为进一步研究该基因表达产物的生理生化特性及功能提供了重要资料。     

单克隆抗体血型定型试剂转瓶培养生产工艺

研制成功单克隆抗体ABO血型定型试剂转瓶培养生产工艺,生产周期从静置培养生产的5～6天缩短到2～3天。产品所有质量指标均达到或超过国家标准,特别是抗体效价明显提高。实验及生产结果显示,该法简单易行,经济快速．投入低,产出高,生产时间短,产品质量高。     

城市污泥和化肥对水稻土种植的通菜中邻苯二甲酸酯（PAEs）的影响

对水稻土施用城市污泥和化肥盆栽通菜,应用GC／MS联机检测技术对通菜中6种邻苯二甲酸酯化合物(PAEs)进行分析,探讨施肥对通菜中PAEs含量的影响,结果表明,各处理通菜中6种PAEs化合物的总含量(∑PAEs)在2．129～7.111mg·kg^-1之间,依次为广州污泥+化肥(7．111mg·kg^-1)>广州污泥(4．767mg·kg^-1)>佛山污泥(3;569mg·kg^-1)>佛山污泥+化肥(3．305mg·kg^-1)>化肥(2．638mg·kg^-1)>空白对照(2．129mg·kg^-1)。显示了施肥造成通菜中∑PAEs不同程度的提高,各处理通菜中的PAEs均以个别化合物为主,其中空白对照、化肥、佛山污泥和广州污泥处理的通菜中邻苯二甲酸丁基苄基酯(BBP)占∑PAEs的40％～81％。佛山污泥+化肥处理的通菜中邻苯二甲酸正二丁酯(DnBP)占∑PAEs的56％,而广州污泥+化肥处理的通菜中邻苯二甲酸丁基苄基酯(BBP)、邻苯二甲酸正二辛酯(DnOP)和邻苯二甲酸(2-乙基己基)酯(DEHP)各占∑PAEs的30％左右,通菜中∑PAEs和多数化合物的含量不同程度地大于其在根系中的含量。     

城市污泥与稻草堆肥中邻苯二甲酸酯（PAEs）的研究

将广州城市污泥与稻草进行翻堆、接菌-翻堆、连续通气和间歇通气4种方式的堆肥,应用GC／MS技术对堆肥中6种属于USEPA优控污染物的邻苯二甲酸醇化合物(PAEs)进行分析,探讨堆肥产物中PAEs的含量分布以及不同方式堆肥对PAEs的降解效果,结果表明,4种方式堆肥中PAEs总含量(∑PAEs)在9．815～17．832mg·kg^-1之间,依次为翻堆(17．832mg·kg^-1)>接菌-翻堆(13．927mg·kg^-1)>间隙通气(10．765mg·kg^-1)>连续通气(9．815mg·kg^-1),堆肥中PAEs以邻苯二甲酸正二辛酯(DhOP)为主,占∑PAEs的82．2％～89．696,不同方式堆肥中∑PAEs的降解率为连续通气(45．71％)>间隙通气(40．4696)>接菌-翻堆(22．97％)>翻堆(1．3796)(平均降解率为27．63％),其中邻苯二甲酸二乙醇(DEP)、邻苯二甲酸正二丁酯(DnBP)和邻苯二甲酸丁基苄基酯(BBP)的降解率分别为95．7696～98．6896、79．5696～99．46％和87．42％～98．42％;但邻苯二甲酸二甲酯(DMP)和邻苯二甲酸正二辛酯的含量反而增加,邻苯二甲酸(2-乙基己基)酯(DEHP)在所有堆肥中均未检出。     

39种木本植物对大气污染的生理生态反应与敏感性

39种1-2a生盆栽木本植物在生长季前期放置在污染区（佛山南海区小塘镇五星)和清洁区(广州华南植物园),5个月后进行植物叶片和叶绿素荧光特征参数的测定。大气监测结果表明,污染区有相当高的酸性硫酸盐化速率、氟化物浓度和降尘量,分别是清洁医的15．4、17.5和28倍,明显高于国家排放标准。生长在污染区的大多数植物的净光合速率（Pn)、蒸腾速率(E)和气孔导度(gs)均出现不同程度的下降,下降幅度因植物种类不同而存在较大差异。Pn、E与gs之间存在一定程度的线性相关关系,但污染胁迫下Pn与gs线性相关的显著程度波削弱,而E与gs的相关性则得到提高,表现出不同植物种类Pn和E的变化与gs变化的不协同性、复杂性以及适应策略的多样性。根据Pn、E和水分利用效率(WUE)的变化,将植物对大气污染响应的敏感程度划分为：(1)高度敏感组,包括仪花、灰木莲、格木、阿丁枫、白桂木、海南木莲、白木香和海南红豆;(2)中度敏感组,包括幌伞枫、无忧树、红花木莲、小叶胭脂、蝴蝶树、山玉兰、灰莉、柳叶楠、刺果番荔枝、厚皮香、猫尾木、红桂木、竹节树、红花油茶、观光木、桂花、铁冬青、日本杜英、火焰木、铁力术和密仡树：(3)轻度敏感组,包括毛黄肉楠、华润楠、吊瓜木、大头茶、茶花、傅园榕、小叶榕、环榕、菩提榕和石笔木。