液氮冷冻联合兰科肤宁治疗孕妇尖锐湿疣的临床效果评价

目的:评价液氮冷冻联合兰科肤宁治疗孕妇尖锐湿疣的临床疗效与安全性。方法:回顾性分析我院收治的46例患有尖锐湿疣的孕妇,平均年龄为27岁,妊娠平均18周。每例患者的病灶数为5~18个。应用液氮枪喷涂于皮损,液氮枪距皮损2-3 cm,喷雾时间60秒,重复操作直至喷嘴霜化。将蓝科肤宁喷涂于单层纱布,敷于皮损部位20分钟,每天2-3次,共1周。分别于治疗后1月、3月观察皮损愈合情况,评价治疗效果。结果:治疗5天后,皮损均治愈,所有患者除有轻度至中度疼痛外,无其他不适。治疗后1个月,满意度94%;治疗后3个月,满意度为87%。无色素脱失或瘢痕形成,无任何严重不良事件。每位孕妇均分娩出一个健康的婴儿,无分娩相关并发症。治疗后1个月,只有1例病人复发,复发率为2.2%。治疗后3月,5例复发,复发率为10.9%。结论:液氮冷冻联合蓝科肤宁治疗孕妇尖锐湿疣的近期疗效较好,安全性较高。     

软鳍新光唇鱼精子的超低温冷冻保存

2011年,对软鳍新光唇鱼(Neolissochilus benasi)进行了精子超低温冷冻保存研究。以解冻后的精子活力为指标,采用稀释液D-15,设计不同的抗冻剂种类和浓度,以及不同的实验条件(包括冷冻体积、4℃平衡时间和解冻温度等)探索软鳍新光唇鱼精子的超低温冷冻保存方法。筛选出了适合软鳍新光唇鱼精子超低温冷冻保存的两种抗冻保护剂及其浓度分别为10%MeOH和15%EG,确定了精液与稀释液的最适稀释比例为1:7、4℃平衡时间区间为10～60min、冷冻体积为60μL,以及复苏方法为37℃水浴快速解冻30s。当鲜精活力为(62.33±2.05)%,综合以上最佳实验条件进行保存,解冻后精子的最高活力为(29.67±0.47)%,但效果不理想,不能达到广泛生产运用水平;产生这一结果,可能与异地保育物种的饲养管理有关。因此,在亲鱼培育管理中要最大限度地降低捕获诱发的压力,尽量提供适合的养殖条件。在珍稀鱼类异地保育时,繁殖用雄鱼的培育与雌鱼同等重要,是获得大量高质量仔鱼的关键。     

逆行射精精子冷冻保存在宫腔内人工授精技术中的应用

目的:探讨逆行射精患者尿液中回收精子的冷冻保存及其在宫腔内人工授精(IUI)周期中的应用效果。方法:2008年12月至2011年1月逆行射精患者共计7例,嘱其按要求留取射精后的尿液,充分洗涤后实施液氮蒸汽法超低温精子冷冻,共冻存精液标本14人份。IUI周期时将冻存精子解冻、优化后行宫腔内人工授精。结果:冷冻前、解冻后前向运动精子总数分别为(19.9±10.4)×106和(6.9±4.2)×106,存在显著性差异(P<0.05),解冻优化后前向运动精子总数为(2.6±1.7)×106,实施IUI 8个周期,临床妊娠1例。结论:超低温冷冻会明显降低前向运动精子总数,但多次冷冻后一次复苏行IUI可能是治疗逆行射精所致不育的一种较为理想的方法。     

冷冻电镜密度图可视化软件VAT4M

基于冷冻电镜三维密度图的特征分析,研究开发了冷冻电镜密度图可视化软件VAT4M(Visual Analysis Tools for Macro-Molecule Map and Model),实现了对三维冷冻电镜密度图的可视化分析,其主要功能包括密度图和分子模型的可视化、密度图的分割和晶体结构在密度图中的匹配。在可视化方面,在实现等值面可视化方法的同时还实现了体绘制可视化模式。对于结构分析,VAT4M提供了自动分割工具,和所见即所得的分割浏览器。同时,VAT4M还提供了极值吸收法与梯度法相结合的自动匹配方法,而且,对于具有对称性的密度图,可根据一个亚基的匹配结果,迅速得到其准原子模型。最后给出了若干应用实例。实验表明,本平台对冷冻电镜密度数据具有良好的可视与分析功能。     

提高冷冻切片制片质量的方法探讨

术中冷冻切片诊断是病理科的急诊工作,其重要性和责任性都很大。其中冷冻切片质量的好坏至关重要,它是许多病理技术人员一直探讨的问题。本文对影响制片质量的各种因素及环节进行了分析,并提出了可行的防范措施,使制片质量明显提高。     

PMA-qPCR法检测冷冻基质中非可培养状态(VBNC)副溶血性弧菌

【背景】副溶血性弧菌为冰鲜产品及肉制品中常见的污染微生物,致病性强,危害严重,出入境运输及加工的肉食品常采取冷冻冷藏的处理手段来防止微生物污染及生长,以保持食物新鲜。而残留的部分副溶血性弧菌会进入活的非可培养状态(Viable but non-culturable state,VBNC),从而构成潜在的风险隐患。【目的】建立可用于冷冻食品中VBNC副溶血性弧菌的快速检测方法,并探讨其适用性。【方法】将大西洋鲑鱼1:10匀浆,加入终浓度为6.6×10~5 CFU/mL的副溶血性弧菌,-20°C分别诱导10、20、30和50 d。建立实时荧光PCR技术(qPCR)方法,测定其特异性、灵敏度及稳定性。利用PMA-qPCR法对不同冷冻时期样品中的副溶血性弧菌进行检测,同时与qPCR、平板培养法进行比较。【结果】建立的qPCR方法特异性好,与其他阴性参考株无交叉反应;灵敏度高,检测限为19.8 CFU/mL;重复性好,C_q值的变异系数(CV)均在1.5%以下;标准曲线为y=-3.272x+45.310,线性回归系数R~2为0.996,定量范围为1×10~2–1×10~9 CFU/mL。在低温诱导10-50 d后,qPCR法的C_q值在26.32-27.34之间,与诱导前相比几乎没有变化;叠氮溴化丙锭(PMA)-qPCR法的C_q值则从诱导前的26.43逐步上升到38.84,呈现明显的上升趋势,表明死菌的数量在显著上升。经过比较及统计,PMA-qPCR检测的活菌数均高于平板培养法测出的数量,差异显著(P0.05)。【结论】PMA-qPCR特异性及灵敏度高,能有效抑制对死菌的扩增,同时能克服传统平板培养法对VBNC的漏检缺陷,可方便、快捷地用于冷冻食品中受损致病微生物,尤其是进入VBNC状态的细菌检测。     

低温电镜技术及其在植物（动物）材料研究中的应用

通过一些实例介绍了高压冷冻,冷冻置换和冷冻超薄切片等低温电镜样品制备技术,并且与传统方法对照,说明低温电镜技术的优越性,其中,发菜（Nostoc flagelliforme)营养细胞的冷冻超薄切片（未经化学固定,脱水）所显示的超微结构更客观地反映了生物样品的自然生理状态。此外,应用高压冷冻和冷冻置换的免疫标记电镜技术,首次对发菜营养细胞中的DNA进行定位,明确了核区的位置及范围。     

茎尖和芽的超低温保存

介绍植物茎尖和芽超低温保存的意义和现状。影响超低温保存的一些主要因素及其所采取的措施,主要包括预培养,低温锻炼,使用冰冻保护剂以及适当采用不同的降温方法和化冻洗涤方法,并就今后的研究提出了一些看法。     

极端嗜盐菌的保藏研究

研究了在极端嗜盐菌的液氮超低温冻结保藏和真空冷冻干燥保藏中,不同种类的保护剂和保护剂的不同盐浓度对存活性的影响．结果表明：在极端嗜盐菌的保藏中,一定浓度的NaCl是保护剂中不可缺少的组成成分之一,但保护剂的盐浓度没有必要达到或接近生长需要的最适盐浓度（20％—25％NaCl）;在真空冷冻干燥保藏中,用6％的海藻糖代替脱脂牛奶作为保护剂,可以得到较高的细胞存活率。77株嗜盐古细菌保藏12个月后检测,全部存活,其中19株菌保藏24个月,检测结果为全部存活．     

唐菖蒲愈伤组织超低温保存（简报）

唐菖蒲愈伤组织在培养了 20～25天后为最佳冷冻材料,通过含5％ DMSO的培养基预培养5天和10％ DMSO 10％甘油的冷冻保护剂处理。都能显著提高冷冻后愈伤组织的存活率,而且分步冷冻较快速冷冻效果更好。经过冷冻后的愈伤组织成功地得到增殖和植株再生。