快速检测伪狂犬病毒荧光定量PCR技术建立及应用

以伪狂犬病毒(PRV)保守的gE基因序列为参考,设计、优化出一对特异的PCR引物和一条TaqMan荧光探针,结合RotorGene检测系统,建立一种快速定量检测伪狂犬病毒的荧光定量PCR技术.该方法线形范围为1.0×102-1.0×107拷贝/μL,灵敏度达102拷贝/μLDNA,比常规PCR高10倍.检测的特异性明显高于常规PCR,同时避免了常规PCR因电泳造成的污染.应用该技术检测66例猪组织或鼻咽拭子样品,阳性42份,阳性检出率为63.6%(42/66).与病毒分离培养、常规PCR相比较结果显示,该方法具有快速、灵敏、特异、重复性好和能定量检测等优点,该方法可用于猪场PRV感染的快速定量检测和肉类食品进出口检疫.     

动物工具使用交流会

<正>这是动物界第一次全体动物代表大会,会议旨在集合每种动物的聪明才智,在动物界展开一次轰轰烈烈的劳动技术革命。大会一开始,以高智商著称的黑猩猩就站在了台上:"人类已经历了三次科技革命,我们虽然落后,但只要相互学习,共同努力,就一定有机会赶上时代的步伐!我知道,在我们中间已经有很多成员会使用工具了,这就是我们的进步!今天,咱们不妨先把各自的工具展示出来,互相交流一番……"海獭的宝贝石头黑猩猩的开场白还没结束,就被一只调皮的小海獭打断了。     

血压、血脂、血糖、同型半胱氨酸及超敏C反应蛋白水平与脑梗死发病危险性的关系

目的:探讨血压、血脂、血糖、糖化血红蛋白、同型半胱氨酸(HCY)和超敏C反应蛋白(hs-CRP)与脑梗死发病危险性的相关性,为及时防止脑梗死的发病及早期诊断脑梗死提供理论依据。方法:采用回顾性病例对照研究,用全自动生化分析仪器检测各项生化指标,并运用SPSS 20.0软件包对256例脑梗死患者和216例健康对照者的血生化指标进行统计分析。同时,将脑梗死组分为三组:单纯脑梗死组、合并高血压组、合并糖尿病组,分别与正常对照组进行血脂水平的分析比较。结果:血压、总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇酯(HDL-C)、同型半胱氨酸(HCY)、血糖、hs-CRP水平和总胆固醇/高密度脂蛋白胆固醇(TC/HDL-C)比值在病例组和对照组间有显著性差异(P0.05)。同时,在三组不同的病例组中血脂(TC、TG、LDL-C、TC/HDL-C)水平和HCY水平明显高于正常对照组,而HDL-C水平则明显低于对照组。(P0.05)。结论:高血压、高血糖、HCY、hs-CRP水平增高及血脂异常均与脑梗死发病危险性相关,联合检测上述指标对预防及治疗脑梗死均有重要意义。     

微创经皮肾镜钬激光联合气压弹道碎石术治疗马蹄肾结石

目的:探讨微创经皮肾镜钬激光联合气压弹道碎石术治疗马蹄肾结石的可行性与效果,以期指导临床诊治。方法:回顾性分析在2010年8月~2013年8月期间接受微创经皮肾镜钬激光联合气压弹道碎石术治疗的12例马蹄肾结石患者的疗效及并发症。结果:在12例患者中,一期结石清除率为83.3%(10/12),2例需要二期取石。单通道取石11例,双通道取石1例。1例患者为上盏通道,其余患者均为中盏通道。平均手术时间105 min,术中平均出血量50 m L,平均住院天数14d。未出现严重并发症,无患者需要输血。结论:微创经皮肾镜钬激光联合气压弹道碎石术是治疗马蹄肾结石的安全、有效的方法,具有损伤小、出血少、恢复快等优点。     

趋化因子CXCL13及其受体CXCR5研究进展

趋化因子及其受体是免疫系统的重要组成部分,通过它们之间的信号传导,使得免疫系统正常运作。根据其结构特征,趋化因子及其受体被分为C、CC、CXC、CX3C四个家族,本文将介绍近两年对CXC家族的趋化因子CXCL13的结构特征、表达调控、与细胞因子家族其它成员之间的相互作用,以及它与相应的配体CXCR5结合后所介导的生理和病理作用等方面研究的一些进展,为今后的研究工作提供帮助。     

植物Ⅲ型聚酮合酶的分子机制与应用前景

植物III型聚酮合酶能催化生成一系列结构各异、具有不同生理活性、包含查耳酮合酶基本骨架的植物次生代谢产物,这类次生代谢产物不仅使植物体本身的抗逆性提高,并且对人类健康医疗有很好的应用前景。以下综述了近年来从植物中克隆、鉴定III型聚酮合酶的研究进展,着重论述了其分子结构、催化反应的类型和机制、表达调控及其在转基因工程方面的研究和应用前景。这些研究将为有效地对其进行基因改造,合成一些难以化学合成的新型天然化合物奠定基础,并且为将来进一步开展III型聚酮合酶的转基因工程提供了参考。     

PDMS微柱阵列型拓扑结构基底增强HepG2细胞TRPV1、TRPV4通道表达及功能响应性

制备了微柱名义直径为4μm或10μm,名义间距为4μm或7μm,名义高度为4μm的聚二甲基硅氧烷微柱阵列型拓扑结构基底,研究了HepG2细胞与拓扑结构基底复合后细胞瞬时受体电位通道TRPV1、TRPV4在基因和蛋白水平的表达及其功能响应性。细胞TRPV1和TRPV4在基因水平表达的评价采用定量PCR技术进行;TRPV1和TRPV4在蛋白水平的表达以免疫印迹和免疫荧光染色确认;TRPV1和TRPV4功能响应性的研究系以TRPV1和TRPV4激动剂辣椒素和4α-佛波醇-12,13-二葵酸酯刺激细胞,采用钙离子染料钙绿-1结合激光共聚焦显微技术记录钙内流动态过程,以钙内流荧光响应幅度及阳性响应比率进行评价。实验结果表明,在四种拓扑结构基底上细胞TRPV1和TRPV4的mRNA表达量均显著高于平面基底上相应值。免疫印迹实验证实了TRPV1和TRPV4在蛋白水平的表达,且拓扑结构基底上TRPV1和TRPV4免疫荧光染色强度较之平面基底相应值明显增高或趋于增高。在激动剂作用下,TRPV1介导的钙内流表现为快速去敏感化(25秒内)的瞬态内流,且拓扑结构基底上阳性响应细胞比例或相对荧光响应幅度较之平面基底相应值增高;而拓扑结构基底上细胞TRPV4阳性响应细胞比例和相对荧光响应幅度较之平面基底均全面明显升高。上述结果表明,TRPV介导的离子信号可能是基底拓扑结构优化HepG2细胞功能表型的重要信号机制。     

快速检测伪狂犬病毒荧光定量PCR技术建立及应用

以伪狂犬病毒(PRV)保守的gE基因序列为参考,设计、优化出一对特异的PCR引物和一条TaqMan荧光探针,结合RotorGene检测系统,建立一种快速定量检测伪狂犬病毒的荧光定量PCR技术。该方法线形范围为1.0×102-1.0×107拷贝/μL,灵敏度达102拷贝/μLDNA,比常规PCR高10倍。检测的特异性明显高于常规PCR,同时避免了常规PCR因电泳造成的污染。应用该技术检测66例猪组织或鼻咽拭子样品,阳性42份,阳性检出率为63.6%(42/66)。与病毒分离培养、常规PCR相比较结果显示,该方法具有快速、灵敏、特异、重复性好和能定量检测等优点,该方法可用于猪场PRV感染的快速定量检测和肉类食品进出口检疫。     

评价肺炎支原体疫苗效力的仓鼠攻击试验

<正> 在1964-1976年间,许多实验室研制了一系列的福尔马林灭活的肺炎支原体疫苗并进行了效力试验。有些疫苗是在众多的部队新兵中进行了现场试验,有些则给少数志愿受试者接种,然后用强毒株进行攻击试验。利用接种过疫苗者中支原体肺炎自然发病率的降低和感染过支原体人群中病情的减轻来进行评价,结果表明,这些疫苗的保护效力是很低的。当将疫苗加入明矾佐剂增强其抗原性或简单地增加疫苗剂量时,能提高用     

田间增加UV-B辐射对玉米光合生理的影响

自然条件下,分别增加0(CK组)、0.01(R1组)和0.015 J.m-2.s-1(R2组)3种强度的UV-B辐射处理玉米(Zea maysL.),对重庆地区C4植物玉米整个生长期内光合作用的影响进行研究。结果表明,增强UV-B辐射导致玉米幼苗叶片光合色素含量(包括叶绿素a、叶绿素b、总叶绿素和类胡萝卜素)、Hill反应活力、气孔导度、光合速率下降,且随UV-B辐射强度的增加,玉米幼苗光合作用所受抑制增强,而玉米成株所受影响不大。