油茶象幼虫虫龄的划分

【目的】油茶象 Curculio chinensis Chevrolat是我国特有木本油料树种--油茶 Camellia meiocarpa 的专性蛀果害虫,常导致大量落果。幼虫准确分龄是其生物学、生态学及防控研究的基础,但对钻蛀性昆虫来说,这非常困难。本研究旨在明确研究样地油茶象幼虫龄数及各龄形态指标极差,试图探讨确定钻蛀性昆虫龄数及合理划分虫龄的可靠方法。【方法】收集了1 253头不同发育阶段的幼虫,测量头壳宽、头壳长和上颚宽3个形态指标,用多峰拟合分析频次分布资料,结合戴氏法则判断幼虫龄数。以正态曲线交点作为相邻虫龄分界点,计算各龄幼虫测量指标的平均值、极差、增长率及误判率。【结果】头壳宽、头壳长和上颚宽频次分布多峰拟合均呈显著的5个正态峰（P＜0.01）,对应5个虫龄;头壳宽、头壳长和上颚宽3个形态指标均以对3龄幼虫的误判率最大,分别为6.04%,7.03%和6.51%,而对其他虫龄误判率均小于5%,提示3个形态指标均可作为油茶象虫龄划分的可靠依据,以头壳宽最佳。各龄幼虫头壳宽、头壳长及上颚宽增长率依次为1.41~1.54,1.43~1.61及1.44~1.64,基本恒定,其平均值的自然对数与虫龄均呈极显著线性正相关（P＜0.01）,油茶象幼虫头壳生长呈间断性几何级数增长,符合戴氏法则。【结论】油茶象幼虫具5个虫龄,不同于前人报道的仅4个虫龄;多峰拟合可用于确定钻蛀性昆虫或野外种群的龄数,特别是为相邻虫龄形态指标重叠区虫龄划分提供有效方法。     

槲栎超寄生橡子内象甲幼虫的适应对策

栎属植物的橡子常常受到象甲的侵害, 对橡子存活产生影响, 但有关橡子对象甲幼虫适合度影响的研究尚未见报道。本研究旨在通过对槲栎Quercus aliena种子雨进程以及象甲幼虫逃逸过程的调查, 研究二者之间的进化适应关系。结果表明： 当年槲栎的种子产量为51.92±29.26粒/m², 虫蛀率达到42.4%。虫蛀的橡子中65%以上被象甲超寄生, 且显著大于完好的橡子。在种子下落过程中, 早期从橡子中逃逸的象甲幼虫要比后期逃逸的大。对某一超寄生的橡子而言, 首先逃逸出的象甲幼虫要比随后逃逸的幼虫大。另外, 从早期脱落的橡子中逃逸的幼虫明显小于后期脱落的橡子。象甲幼虫的干重随着橡子内象甲幼虫数量的增加而显著下降。象甲幼虫寄生数量与橡子的长径和短径呈现明显的正相关关系。尽管超寄生降低了象甲虫的适合度, 但雌性成体象甲产卵过程中偏好选择大橡子在一定程度上可以减少这种不利影响。因此, 小橡子可能更容易逃脱象甲的超寄生而获得较大的存活机会。     

稻水象甲生物学特性及药效测定

对稻水象甲的生物学特性及几种杀虫剂对稻水象甲的防治药效进行了研究,结果表明：稻水象甲在宁德市1a发生2代,双早秧田（4月下旬至5月初）、本田（5月上旬至中旬）是越冬成虫防治关键时期,田间防治以5％氟虫腈1200倍液为佳。     

稻水象甲成虫活动行为的日节律

为了摸清稻水象甲Lissorhoptrus oryzophilus Kuschel成虫在稻田中的日活动行为节律, 采用室外单头隔离饲养的方法, 将成虫 行为分为移动、 取食、 离水静息、 触水静息和其他5个行为类型, 每30 min观察记录1次, 从2012年4月30日至5月4日连续观察5 d, 共获得7 200个行为数据。结果显示： 稻水象甲越冬成虫行为的日时间分配以离水静息行为最多（47.83%）, 移动行为最少（5.64%）, 各行为的时间分配存在极显著差异（P<0.001）。离水静息行为最高峰值在23:30 （72.67%）, 最低值在7:30 （14.67%）; 触水静息行 为最大峰值在7:30 （75.33%）, 19:00还有一个小高峰（37.33%）; 取食行为在15:00达到最高峰（26.67%）, 在21:00达到第2个高峰 值（18.00%）; 移动行为在22:00-9:00较少（0~4.00%）, 从9:30开始持续增加, 在17:00达到最高峰（20.00%）; 其他行为在 1.33~18.67%之间波动。离水静息、 移动、 取食和其他行为白天和黑夜存在极显著差异（P<0.001）, 但触水静息行为白天和黑夜无显著 不同（P=0.834）; 上午、 中午、 下午和晚上4个时间段之间各行为也有显著差异（P<0.001）。在空间上, 离水静息行为在叶片上最高 , 移动行为以水中最高, 取食行为仅发生在叶片上, 离水静息、 移动和取食在水稻不同部位存在极显著差异（P<0.001）。水中发生触 水静息、 移动和其他共3种行为, 以触水静息行为的日波动最大, 3种行为在各时刻之间有极显著差异（触水静息和移动： P<0.001; 其他： P=0.002）; 叶片上发生离水静息、 移动和取食3种行为, 以离水静息和取食行为的日波动较大且在各时刻间具有极显著的差异 （P<0.001）; 茎秆和瓶壁或封口纱布处主要发生离水静息和移动行为, 所占比例均不高, 但在瓶壁或封口纱布处的移动行为各时刻之 间有极显著差异（P=0.008）。水中和叶片上是行为发生的主要空间, 在水中行为的最高峰值（81.33%）与叶片上的最低值（12.00%）出 现时间相同, 为7:30, 一天中各时刻水中和叶片上的行为呈交错性变化。结果提示, 稻水象甲成虫活动行为受到时空变化的影响, 且 时间变化对其行为的影响较空间变化更为明显。     

Anti-inflammatory activity of total flavonoids from seeds of Camellia oleifera Abel

Inflammation is the primary response to infection or injury that functions to clear the injurious material or agent and promote tissue repair. However, when inflammation persists, such as chronic inflammation, it can cause tissue damage and loss of function. Persistent inflammation is closely asso- ciated with many chronic diseases, such as cancer, arthritis, osteoporosis, asthma, Alzheimer＇s disease, obesity, diabetes, and cardiovascular disease [1]. Numerous molecules such as cytokines, prostaglandins, and nitric oxide （NO） are involved in the induction and maintenance of the inflamma- tory response. Inhibition and/or down-regulation of these pro-inflammatory molecules may exert anti-inflammatory effects.     

胞质型肽聚糖识别蛋白RfPGRP-L2在维持红棕象甲肠道菌群稳态中的作用

【目的】明确入侵害虫红棕象甲Rhynchophorus ferrugineus胞质型肽聚糖识别蛋白RfPGRP-L2在肠道菌群稳态的维持和调控过程中的作用,将为靶向破坏肠道菌群稳态的害虫控制新策略研发提供新的科学依据和作用靶标。【方法】利用生物信息学方法分析RfPGRP-L2的序列特征。利用RT-qPCR分析RfPGRP-L2在健康红棕象甲4龄幼虫不同组织(头、脂肪体、表皮、前肠、中-/后肠、血淋巴)以及大肠杆菌Escherichia coli DH5α和金黄色葡萄球菌Staphylococcus aureus经注射（注射1 μL OD₆₀₀=1.6的菌液）和喂食（取食涂抹1 mL OD₆₀₀=1.6的菌液的甘蔗薄片）两种不同方式分别感染后红棕象甲4龄幼虫肠道和脂肪体中的表达量;进行RfPGRP-L2原核表达,利用体外孵育方法检测重组蛋白RfPGRP-L2对大肠杆菌DH5α和金黄色葡萄球菌的凝集和抑菌活性;RNAi干扰RfPGRP-L2后,检测红棕象甲4龄幼虫血淋巴和肠道中大肠杆菌菌落数的变化;利用RT-qPCR分析RNAi干扰RfPGRP-L2后红棕象甲4龄幼虫脂肪体和肠道中抗菌肽基因表达量的变化;利用基于细菌16S rRNA的高通量测序分析RNAi干扰RfPGRP-L2对健康红棕象甲4龄幼虫肠道菌群结构组成的影响。【结果】SMART预测发现红棕象甲RfPGRP-L2基因编码的蛋白中无跨膜结构域也无信号肽,这表明RfPGRP-L2是一种胞质型肽聚糖识别蛋白。RT-qPCR检测发现,RfPGRP-L2主要在健康红棕象甲4龄幼虫血淋巴、肠道和脂肪体等免疫组织中表达;被注射感染大肠杆菌和金黄色葡萄球菌6 h和12 h后,红棕象甲4龄幼虫脂肪体中RfPGRP-L2的表达量分别显著上调;被喂食感染大肠杆菌6 h后,红棕象甲4龄幼虫肠道中RfPGRP-L2的表达量显著增加。重组表达蛋白RfPGRP-L2能引起大肠杆菌和金黄色葡萄球菌发生凝集反应,这说明RfPGRP-L2能够识别这两种细菌。当RfPGRP-L2被干扰后,红棕象甲4龄幼虫对肠道和血淋巴中感染EGFP标记的大肠杆菌的清除能力显著弱于对照组;肠道中抗菌肽基因RfCecropin的表达量显著降低;健康红棕象甲4龄幼虫肠道中细菌的菌落数量显著高于对照组,而且肠道菌群结构组成也发生了明显的变化。【结论】红棕象甲体内胞质型肽聚糖识别蛋白RfPGRP-L2能够通过识别细菌并激活肠上皮细胞中相应的免疫信号通路促进抗菌肽基因的表达,从而介导对肠道菌群稳态的调控。     

浙江油茶产地土壤和果实金属元素含量特征

为探讨油茶(Camellia oleifera)产地土壤和油茶果实中金属元素分布和富集特征,在油茶果实成熟期,对浙江5个油茶产地土壤及油茶果实中金属元素进行污染分析和富集能力评价。结果表明,浙江油茶产地土壤中Pb、Cr、Cd、As、Hg、Ni、Cu和Zn含量低于农用地土壤污染风险筛选值,综合污染等级为安全。个别产区常山县土壤中As、Ni、Cu和江山县土壤中Pb、Cr、Fe含量显著高于其他产地;常山和建德土壤中Cd单因子污染指数分别为0.93和0.81,处于污染警戒线。Cr、Ni、Cu、Zn主要分布在油茶籽中,Hg主要分布在壳中,Pb、Cd、As、Fe和Mn主要分布在青皮中。油茶籽中Cu、Fe、Mn的富集系数大于0.4,吸收能力强,Ni、Zn的富集系数小于0.4,具有一定吸收能力,Pb、Cr、Cd、As和Hg的富集系数小于0.1,吸收能力低;壳中Cu、Mn的富集系数大于0.4,吸收能力强,Fe的富集系数小于0.4,具有一定吸收能力,Pb、Cr、Cd、As、Hg、Ni、Zn的富集系数小于0.1,吸收能力低;青皮中Cu、Fe、Mn的富集系数大于0.4,吸收能力强,Pb、Cr、Cd、As、Hg、Ni、Zn的富集系数小于0.1,吸收能力低。浙江油茶主产区土壤质量安全,适合油茶种植。油茶果实对Cu、Fe、Mn有一定富集能力,对Pb、Cr、Cd、As和Hg无富集能力。     

象甲科昆虫转录组研究进展

转录组是细胞在特定发育阶段或生理条件下的全部转录本及其数量总和,并能揭示特定状态下的基因表达模式及分子机理。象甲科昆虫拥有动物界中最多的物种种类,该科许多昆虫也是我国粮食仓储和农林产业上的重大害虫。通过研究象甲科昆虫转录组,从分子水平揭示其生命过程中相关的基因及其功能,对寻找害虫防治的新方法具有重要意义。本文对象甲科昆虫转录组研究现状进行了浅析,涉及象甲科不同发育阶段基因差异、昆虫触角、与植物互作、防治、免疫机制、进化、基因沉默7个方面的分析,可在理论上丰富对象甲科昆虫遗传发育、免疫、潜在RNA干扰靶点筛选等方面的理解,并在此基础上提出了象甲科转录组今后的研究热点与应用前景,为害虫防控提供理论指导。     

基于芽苗砧嫁接油茶砧穗创伤后内源激素动态变化分析

为研究油茶(Camellia oleifera A)嫁接时穗条和砧木创伤后内源激素动态变化规律,解析影响砧穗嫁接面愈合的生理机制,为油茶砧穗愈合生长机理提供理论支持。以树龄6年的长林18号和53号的穗条和实生砧木为材料,按照芽苗砧嫁接方法切割穗条S0(0 min)、S10(10 min)、S40(40 min)和砧木茎段Z0(0 min)、Z10(10 min)后,利用液质联用法(HPLC-MS)测定吲哚乙酸(IAA)、脱落酸(ABA)、反式玉米素(TZR)、玉米素(Zeatin)、水杨酸(SA)和茉莉酸(JA)含量,分析不同时间段内源激素变化及品种间差异的关系。结果显示:创伤后18号的TZR、Zeatin和SA含量总体高于53号;18号IAA、SA和JA逐渐下降;TZR和Zeatin分别在S10和S0达最高值后下降;ABA在S10达最高值。53号IAA和JA爱S10达最高值后下降;TZR、Zeatin和SA在S10达低值后逐渐上升;ABA在S0达高值后逐渐下降。砧木茎段创伤前后激素含量除JA外18号高于53号;两品种Z0时激素含量下降,Z10后上升,仅53号ABA和SA含量在Z0达高值后下降。砧木茎段和根部激素含量在品种间除JA外18号高于53号,茎段的IAA、ABA高于根部,其他激素为根部高于茎段。激素比值在品种间和部位间差异明显;IAA/ABA、IAA/TZR、IAA/Zeatin和IAA/JA、ABA/TZR、ABA/Zeatin和ABA/JA比值为53号高于18号;穗条内SA/IAA为18号高于53号,SA/JA和SA/ABA为53号高于18号;砧木茎段均为18号高于53号;TZR/SA、TZR/JA比值在穗条和砧木茎段为18号高于53号。两品种创伤后IAA与JA极显著正相关,而IAA与SA,SA与JA在18号极显著正相关,53号极显著或显著负相关;53号TZR、Zeatin、SA间极显著或显著正相关,JA与TZR、Zeatin和SA极显著负相关。砧木茎段创伤后18号激素间为极显著或显著正相关;53号TZR和Zeatin与IAA、JA极显著正相关,与SA存在显著负相关,SA与JA有显著负相关。砧木茎段和根部间品种间仅在SA与各激素间相关性存在差异,其他激素间存在极显著正相关或负相关。综上所述,砧穗创伤后激素水平上18号在创伤面易于愈伤组织发育,而53号抗逆激素水平较高且与细胞分裂增殖类激素负相关,可能影响53号嫁接后愈合生长;嫁接应在创伤后10 min内较为适宜;砧穗间激素含量及比值的差异可能会影响后期嫁接部位形态重建以及穗条生长。     

蓼龟象甲生物学习性初步观察

蓼龟象甲RhinoncuspericarpiusL .是鲁梅克斯K 1饲料作物的重要害虫。在乌鲁木齐地区 1年发生 2代 ,主要以成虫在寄主根部附近土层中越冬。成虫、幼虫均可造成严重危害。成虫取食嫩叶 ,卵产于寄主根茎处 ;幼虫钻蛀于根部蛀食危害。受害植株根部易受根腐病毒的侵染而引起腐烂。