响应面法优化产朊假丝酵母培养及干燥工艺

本研究旨在优化产朊假丝酵母液体培养参数及干燥保护剂配方,提高产朊假丝酵母液体培养数量,制备出高复苏率的活性干酵母。以装液量、转速、温度和培养时间为影响因素,设计单因素试验,并采用Box-Behnken试验设计及响应面分析法优化产朊假丝酵母液体培养方案。在此条件下培养酵母,以L-谷氨酸钠、乳糖、脱脂奶粉为影响因素进行单因素保护试验,并采用响应面分析法优化干燥保护剂的组合。结果表明,产朊假丝酵母最佳培养条件为装液量45 mL/250 m L,转速200 r/min,温度30℃,培养时间24 h。在此条件下,培养的产朊假丝酵母数量可以达到9.34×10~8CFU/mL;最佳保护剂组合1%L-谷氨酸钠、12%脱脂奶粉、6%乳糖,经干燥后,产朊假丝酵母复苏率达到81.9%。此时活菌数7.65×10~8CFU/g,比未加保护剂组提高了3.83倍。     

喀斯特地区珍贵树种黄枝油杉的种子萌发特性

黄枝油杉为中亚热带喀斯特地区珍贵树种,该物种分布范围狭窄,野生种群幼苗数量少,严重限制了其自然更新。为探求该物种濒危的原因,同时为其保护和利用提供参考,该文对黄枝油杉的种实性状进行了测定,并研究了温度、光照、土壤含水量、基质、贮藏温度和时间、不同地理种源等因素对种子萌发的影响。结果表明:(1)黄枝油杉球果平均结种率为7.45%±6.54%,种子有较长种翅[(2.27±0.32)cm],种子平均长度为(1.55±0.15)cm(不含种翅),平均宽度为(0.62±0.05)cm,平均厚度为(0.46±0.04)cm,平均千粒重为(214.81±14.76)g,风干种子平均含水量为15.28%±1.66%。(2)黄枝油杉种子萌发的适宜温度为25 ℃,在20 ℃和30 ℃下萌发率显著降低(P<0.05); 种子萌发不需要光照,但周期性光照条件下的萌发率显著高于持续光照和持续黑暗条件(P<0.05); 种子在土壤含水量为10%～30%条件下均能萌发,且能耐一定程度的干旱; 适宜萌发基质为质地疏松、透气性好的泥炭土和珍珠岩; 种子不耐贮藏,采集后应及时播种; 3个不同地理种源中以桂林恭城县三江乡种群种子萌发率最高。黄枝油杉球果结种率较低,种子萌发对温度要求严格,且种子易失去活力,这可能与其濒危有很大关系。     

生物电化学及其在环境监测中的应用

简要概述了生物电化学的研究领域,包括生物体系和生物界面模拟、生物分子的电化学、生物电催化、光合作用模拟和活组织电化学;总结了生物电化学传感器、生物芯片和生物电化学反应器在环境监测中的应用现状,并提出了其发展趋势,即不断向商品化方向发展,实现环境污染物的在线检测;利用基因技术,创造出检测能力更强的生物传感器和生物芯片;与其他精密分析仪器相结合,向多功能、集成化、智能化、微型化方向发展。     

杜氏盐藻随机MAR文库的构建

核基质附着区(Matrix attachment region,MAR)是一段与核基质结合的DNA序列。为分离杜氏盐藻核基质附着区,我们首次构建了杜氏盐藻MAR文库。首先用0．5％ Triton X-100裂解细胞,经30％和70％ Percoll不连续梯度离心分离盐藻细胞核,再用二碘水杨酸锂(lithium diiodosalicylate,LIS)去除组蛋白和限制酶消化除去结合松弛的DNA片段,最后通过蛋白酶K消化和乙醇沉淀提取盐藻核基质DNA。采用4种限制酶酶切,T4DNA连接酶连至用相应限制酶酶切的pUC18载体上,转化E．coli JM109感受态细胞,挑选阳性克隆,构建MAR文库。部分测序分析表明,克隆的DNA片段具有明显的MAR特征.为进一步研究MAR对基因表达的调控作用及其作用机制提供了基础。     

重组人纤溶酶原Kringle1-5的制备及其

为了研究重组人纤溶酶原 Kringle1-5(K1-5)的抗血管生成活性及其对内皮细胞增殖的影响, 通过PCR扩增人纤溶酶原K1-5 cDNA,定向克隆于原核表达载体pET30a(+)中,构建重组表达载体pET-K1-5, 转化E.coli BL21(DE3), IPTG诱导表达,SDS-PAGE 和Western 杂交检测K1-5的表达。鸡胚尿囊膜 (CAM) 实验和MTT实验分别检测重组人纤溶酶原Kringle1-5对鸡胚新生血管生成和内皮细胞的抑制作用。结果表明,IPTG诱导原核表达载体pET-K1-5在E.coli BL21(DE3)中的表达量约占菌体总蛋白量的32%, K1-5主要以包涵体形式存在,包涵体经过洗涤、溶解、Ni-spin 亲合柱层析纯化以及蛋白质复性等步骤后,获得了纯度约为96%的重组K1-5蛋白。CAM实验表明,原核表达的重组人K1-5能有效地按剂量依赖的方式抑制鸡胚新生血管的形成。MTT实验结果显示,重组人K1-5特异地抑制内皮细胞的增殖, 而对非内皮细胞无抑制作用。     

人脑星形细胞瘤中p27kip1蛋白和增殖细胞核抗原PCNA表达的变化

目的：研究p27kip1蛋白和增殖细胞核抗原（proliferating cell nuclear antigen, PCNA）在星形细胞瘤中的表达与肿瘤病理分级的关系,探讨p27kip1蛋白在星形细胞瘤演变过程中的意义。方法：SP免疫组化法对64例星形细胞瘤的p27kip1蛋白和PCNA表达进行观察。结臬：随着病理级别的升高,p27kip1阳性细胞百分率降低,而PCNA则相反,两者的表达成显著负相关。结论：p27kip1表达的缺失可能与星形细胞瘤的发生发展密切相关,PCNA能较客观地反映肿瘤的恶性程度。     

人脑星形细胞瘤中p53，Fas／FasL的表达及其与凋亡关系的研究

目的：探讨细胞凋亡在星形细胞瘤中的作用及其与p53、Fas和Fas配体（Fas ligand,FasL）的关系。方法：对43例星形细胞瘤的标本分别进行HE染色,TUNEL及免疫组化分别标记p53,Fas和FasL。结果：高级别肿瘤和低级别肿瘤间的凋亡无显著差异（P〉0．05）。高级别星形细胞瘤的p53,Fas和FasL的表达均显著高于低级别肿瘤（P均〈0．05）。结论：突变型p53可作为评价星形细胞瘤生物学行为的参考指标。与低级别星形细胞瘤相比,高级别肿瘤中的细胞凋亡受到了抑制,且Fas与FasL的过表达对细胞凋亡可产生明显影响。     

家兔海马内微量注射马桑内醋造成化学点燃初报

自Goddard等创制化学点燃模型以来,国外有关点燃效应的报道较多,国内尚未见报道,化学点燃是用化学性致病剂阈下剂量每日刺激动物某些脑部结构使刺激效应逐渐积累引起。动物一旦被点燃,病程可持续很久,因此点燃效应模型与病程持续短的急性模型相比有更广泛的用途。本工作用马桑内酯阈下剂量微量注入家兔海马内造成化学点燃,为模拟临床系统观察抗痫药物的疗效和癫痫发病机理的研究提供一种较理想的慢性实验性癫痫模型。预先给家兔左侧海马埋植不锈钢套管及海马、皮层电极,一周后开始实验。实验时向海马内注入马桑内酯稀释液2微升,以单纯生理…     

皖琅琊山自然保护区大型真菌群落多样性

对安徽省琅琊山自然保护区大型真菌的群落多样性进行了研究。对该区内设置的样地Ⅰ(针阔混交林)、样地Ⅱ(常绿-落叶阔叶混交林)、样地Ⅲ(落叶阔叶林)、样地Ⅳ(琅琊榆-刺槐林)和样地Ⅴ(竹林)共5种具有代表性的植物群落内的大型真菌的种类和数量进行了调查。选用了物种丰富度(R)、Shannon-Wiener多样性指数(H′)、Pielou均匀度指数(E)和优势度曲线(K-dominance)等指标,对该区大型真菌的群落多样性进行了测定。结果表明,大型真菌的分布与植物群落类型有着密切关系。R的变化趋势为样地Ⅱ样地Ⅰ样地Ⅲ样地Ⅳ样地Ⅴ;H′的变化趋势是样地Ⅰ样地Ⅱ样地Ⅲ样地Ⅳ样地Ⅴ;E的变化趋势是样地Ⅰ样地Ⅲ样地Ⅱ样地Ⅳ样地Ⅴ。另外,季节变化对大型真菌的分布也有较大的影响。秋季大型真菌出现的种类及个体数量较高,R和H′高于春季,而E值却相反。选用的群落多样性指标能较客观地反映该地区大型真菌群落的组成,并揭示不同群落间的关系。