用钙沉淀法分离植物poly(A)-mRNA

本文对Lendes等人用钙沉淀poly(A)—mRNA的方法作了改进。在不加poly(A)的情况下,适当增加总RNA浓度,用15mM CaCl_2沉淀poly(A)—mRNA。使用改进的方法能够得到大量的poly(A)—mRNA。用改进法制各的poly(A)—mRNA;可以用poly(U)—Sepharose4β或oligo (dT)—Cellulose亲和层析作进一步的纯化,也可以直接作为反转录或翻译的模板.     

三种细菌鞭毛染色法的比较

三种细菌鞭毛染色法的比较济宁医学院２７２１１３刘昌平,陈恩华鞭毛是某些细菌的一种特殊结构,必须通过特殊的染色法,将纤细的鞭毛增粗染色后,才能在一般光学显微镜下观察到,但由于影响因素较多,直接鞭毛染色往往难获成功,为了获得一种实验教学较为满意的染色法,...     

麦红吸浆虫滞育习性研究

1986～1991年研究了麦红吸浆虫的滞育习性,提出了该由主动延长滞育和被动延长滞育的两种形式,探讨了土壤湿度、温度对延长滞育的影响,从体重、羽化率、卵胚数、死亡率等方面测定了延长滞育幼虫的生殖势能,文章最后讨论了麦红吸浆虫多峰羽化的特点和延长滞育的生物学意义。     

超声波介导法转化玉米愈伤组织及可育转基因植株的获得

应用超声波介导法,首次成功地将Bt毒蛋白基因导入了重要的禾谷类作物玉米,并获得了可育的转基因植株及后代.Southern分子杂交结果证明,外源基因已整合进R_0植株和R₁代的染色体组中.超声波声强和处理时间是决定超声波介导法转化效率的2个最重要的参数,以 0.5W/cm²的声强、30min处理的转化效果最佳,最高相对转化频率达到13.3%.适当参数的超声波处理能使细胞表面形成大量的小孔,又减少了外源DNA分子的断裂,从而使外源DNA分子进入细胞.     

栗疫病菌群体的遗传结构

采用聚丙烯酰胺凝胶是泳方法,从栗疫病菌Ｃｒｙｈｏｎｅｃｔｒｉａ ｐａｒａｓｉｔｉｃａ的１８种酶体系中筛选到９种分辩率高的同工酶。对同工酶的结果表明,在中国的北京、辽宁、江西、福建汲意大利,美国、日本共７个各体的１１５个栗疫病菌菌株中,多酚氧化酶（ＰＰＯ）,过氧化物酶（ＰＯＸ）、细胞色素氧化酶（ＣＣＯ）、乙醇脱氢酶（ＡＤＨ）,超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）单态性;α－酯酶（α－ＥＳＴ）β－酯酶（β－ＥＳＴ     

蝮蛇抗栓酶对高粘血症患者血液流变与微循环影响的观察

静注蝮蛇抗栓酶并口服青龙胶囊治疗高粘血症１４０例患者。结果显示,蝮蛇抗栓酶能明显降低血液粘度,表现为全血粘度、血浆粘度、全血还原粘度及纤维蛋白原降低,同时降低甲襞微循环形态、流态及管周状态积分。探讨其改善血液粘度机制。     

改造的马铃薯Y病毒复制酶基因介导高度抗病性

提取马铃薯Y病毒中国分离株(PVY—c)的mRNA作为模板,随机六聚脱氧核苷酸和寡聚dT为引物合成了单链cDNA。通过聚合酶链式反应(PcR)获得了PVY—C的核内含体b(Nib)全长cDNA克隆。在对其进行全序列分析的基础上,构建了PVY—CNIb基因全长．5’端缺失381个碱基和Nib反义RNA三种不同形式高等植物表达载体。在土壤农杆菌LBA4404的介导下,转化烟草生产品种NC89,获得了所有三种表达载体的转基因植株。通过分子生物学检测和抗性分析发现不同形式的Nib基因序列的转基因植株对马铃薯Y病毒表现不同程度的抗性。其中,以5’端缺失的Nlb的基因转化植株表现最好,从总共20个这类转化株系中筛选到4个株系至少在100μg／m1 PVY—C接种浓度下,表现完全的抗病效果。从总共39个全长Nib基因转化株系中,仅有一个株系,在100μg／ml PVY—c的攻毒接种下具有完全的抗病性。所有33个Nib基因反义RNA的转化植株中,无一株系表现完全的抗病效果,但是有部分株系能不同程度地延缓或减轻发病程度,并有部分植株在发病后50d左右有恢复健康的趋势。虽然能够在上述3种形式的Nib基因序列的转基因植物中检测到相应的RNA的转录产物,但是均未能检测到其相应的蛋白表达产物。     

肺癌诊断方法的比较与研究进展

近年来,随着周围环境的恶化,肺癌的发病率最高并且呈现逐年上升的趋势,且其早期表现隐匿,很容易被忽视,很多患者确诊时已属晚期,丧失去了治疗的最佳时机。.本文主要总结和比较了几种传统的肺癌诊断方法如X线片、CT、MRI、PET-CT,并介绍了几种肺癌的最新的诊断技术,比如肺泡灌洗液或血清肿瘤标记物的联合检测、呼出气中的有机化合物的构成分析以及纤维支气管镜镜检技术等。上述方法诊断肺癌的敏感性和特异性各有优势,临床医生在临床工作中应合理应用上述检测方法,必要时联用多种检测手段,尤其要重视支气管肺泡灌洗液癌胚抗原如Cyfra21-1和CEA的联合检测,利用其较高的敏感性以提早发现和诊断肺癌。     

小半夏加茯苓汤对小鼠移植心存活时间的延长效果研究

目的:探讨小半夏加茯苓汤对小鼠心脏移植模型中移植心存活时间的延长效果及作用机制。方法:将接受过腹腔心脏移植手术的小鼠分为实验组和对照组,自移植手术当日起至术后7天,每日经口给药,通过腹部触诊判断移植心脏跳动情况,移植术后30日,取部分小鼠移植心脏进行病理检查,取脾细胞进行淋巴细胞培养,并检测培养液中白细胞介素(IL)-2、IL-4、IL-10和干扰素(IFN)-γ的浓度。取移植心脏存活时间超过30天的小鼠脾脏,通过流式细胞术检测调节性T细胞(Regulatory Tcells,Tregs)的含量。结果:与对照组相比,实验组的移植心存活时间明显延长(P0.01),心脏病理切片结果提示实验组的心脏血管病变受到了抑制,脾细胞培养液中IL-2和IFN-γ浓度明显降低,而IL-4和IL-10的浓度升高,脾细胞CD4阳性细胞中CD25和Foxp3均阳性的细胞含量明显高于对照组中同类细胞含量。结论:小半夏加茯苓汤可以显著延长小鼠移植心脏的存活时间,可能与其诱导调节T细胞的产生、改变受体小鼠体内Th-1和Th-2细胞因子的平衡及抑制IL-2、IFN-γ减轻心脏损伤有关。