转Zm13_Barnase基因玉米的获得及其花粉育性研究

5 mg·L-1 Bialaphos was determined to be the adequate concentration for selection of maize (Zea mays L.) calli on herbicide resistance after evaluating three concentrations of Bialaphos in three genotypes. The chimeric gene Zm13-Barnase was transferred into the embryogenic calli of maize by particle bombardment, and 24 normal plants were regenerated from the 32 herbicide-resistant calli obtained after six cycles of continuous selection under 5 mg·L-1 Bialaphos. PCR assay showed that 18 plants were positive for Barnase gene with a frequency of 75%. I-KI staining and pollen germination revealed that five plants were partially male-sterile. Southern blot analysis indicated integration of Barnase gene into maize genome.     

玉米线立体类质粒的克隆和鉴定

S型细胞质雄性不育玉米的线粒体类质粒S-1为一个长6.4kb的双链线状DNA分子。本文对基本上全长的S-1（只用限制内切酶PstI在两端各切掉128bp）在pUC18和pBR322两种质粒中进行了克隆得到4种杂合的质粒。限制性酶切图谱证明它们分别是S-1以不同方向克隆在两种质粒中的结果,Southern印迹杂交也证明S-1克隆在pBR322中.     

玉米Ht_1基因的抗病效应

大斑病(Helminthosporium turcium)是玉米的主要病害之一。实践证明,改进玉米的遗传结构、推广抗病杂交种是减轻大斑病危害的经济有效措施。 1960年以前多数学者认为,玉米对大斑病的抗性属多基因遗传,部分显性,具有累加效应。这种抗性对已发现的大斑病的一号小种和二号小种都能抵抗。1961年Hooker等在自交系GE440和爆裂玉米“妇人指”品种中分别发现了对大斑病一号小种的一种独特的抗性。     

一个与玉米基因表达沉默有关的cDNA片段的克隆及序列分析

利用cDNA-AFLP技术分离了一个与玉米基因表达沉默有关的cDNA片段,Northern杂交分析表明,该基因在Mo17的苗期和雄穗生长锥伸长期都表达,但在Mo17与其亲缘关系较近的另一亲本杂交的F1代中却表现沉默,即表现单亲沉默。同源性分析表明,该克隆片段与GenBank中玉米通用调控因子(GRF)部分区段有98．6％的同源性,与玉米通用调控因子编码的mRNA部分序列有83％的同源性。以上结果表明,基因沉默可能是亲本GRF在F     

超声波介导法转化玉米愈伤组织及可育转基因植株的获得

应用超声波介导法,首次成功地将Bt毒蛋白基因导入了重要的禾谷类作物玉米,并获得了可育的转基因植株及后代.Southern分子杂交结果证明,外源基因已整合进R_0植株和R₁代的染色体组中.超声波声强和处理时间是决定超声波介导法转化效率的2个最重要的参数,以 0.5W/cm²的声强、30min处理的转化效果最佳,最高相对转化频率达到13.3%.适当参数的超声波处理能使细胞表面形成大量的小孔,又减少了外源DNA分子的断裂,从而使外源DNA分子进入细胞.     

玉米离体线粒体合成蛋白质的研究

线粒体除了受核基因控制外,还具有其自 身的遗传系统。研究表明,线粒体蛋白质中由 线粒体本身的DNA 编码的不到20多,它们在 线粒体的核糖休上翻译而成;大部分的线粒体 蛋白质都是由核DNA 编码,在细胞质中的核 糖体上合成曰。     

植物抗渗透胁迫基因工程研究进展

植物抗渗透胁迫基因工程研究进展刘岩１彭学贤２谢友菊１戴景瑞１（中国农业大学植物科技学院北京１０００９４）（中国科学院微生物研究所植物生物技术开放实验室北京１０００８０）２土壤盐渍化是影响农业生产和生态环境的一个重要因素。据统计,全世界的盐土约占陆地面积的三分之一（Ｅｐｓｔｅｉｎｅｔ．１９８３）。我国大约有一亿亩盐碱地,且有逐年增加的趋势。另外,每年由于干旱将使全球粮食产量降低１０－２０％。工...     

大肠杆菌gutD基因转入玉米及耐盐转基因植株的获得

将大肠杆菌糖醇代谢关键基因——— 6 磷酸山梨醇脱氢酶 ( gutD)基因转入玉米 .Southern和Western吸印杂交的结果证明了外源基因的整合和表达 .用气相色谱法在转基因玉米中检测到山梨醇的合成和积累 .营养液盆栽试验的初步结果表明 ,转基因玉米植株的耐盐性明显高于对照     

转Zm13—Barnase基因玉米的获得及其花粉育性研究

研究了Z31×Q31、H×Z3、A188×B73三种玉米 (ZeamaysL .)基因型的愈伤组织对除草剂Bialaphos的耐性 ,从而确定 5mg·L-1为适宜的选择压。用基因枪将Zm13_Barnase基因转化玉米Q31×Z3、Z31×Q31的胚性愈伤组织 ,经 6轮的除草剂筛选获得 32块抗性愈伤组织 ,再生得到 2 4个植株。经PCR检测 ,18个植株PCR反应呈阳性。I_KI染色和花粉离体萌发观察发现 ,5个植株的花粉为部分不育。Southernblot分析证明 ,这 5个植株中整合有Bar nase基因。