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改造的马铃薯Y病毒复制酶基因介导高度抗病性
引用本文:项瑜,杨兰英 彭学贤 莽克强.改造的马铃薯Y病毒复制酶基因介导高度抗病性[J].生物工程学报,1996,12(3):258-265.
作者姓名:项瑜  杨兰英 彭学贤 莽克强
作者单位:中国科学院微生物研究所 北京 10008
基金项目:国家自然科学基金支持,国际科学资助,文化中心世界实验室(WL,ICSC,日内瓦,洛桑)部分资助
摘    要:提取马铃薯Y病毒中国分离株(PVY—c)的mRNA作为模板,随机六聚脱氧核苷酸和寡聚dT为引物合成了单链cDNA。通过聚合酶链式反应(PcR)获得了PVY—C的核内含体b(Nib)全长cDNA克隆。在对其进行全序列分析的基础上,构建了PVY—CNIb基因全长.5’端缺失381个碱基和Nib反义RNA三种不同形式高等植物表达载体。在土壤农杆菌LBA4404的介导下,转化烟草生产品种NC89,获得了所有三种表达载体的转基因植株。通过分子生物学检测和抗性分析发现不同形式的Nib基因序列的转基因植株对马铃薯Y病毒表现不同程度的抗性。其中,以5’端缺失的Nlb的基因转化植株表现最好,从总共20个这类转化株系中筛选到4个株系至少在100μg/m1 PVY—C接种浓度下,表现完全的抗病效果。从总共39个全长Nib基因转化株系中,仅有一个株系,在100μg/ml PVY—c的攻毒接种下具有完全的抗病性。所有33个Nib基因反义RNA的转化植株中,无一株系表现完全的抗病效果,但是有部分株系能不同程度地延缓或减轻发病程度,并有部分植株在发病后50d左右有恢复健康的趋势。虽然能够在上述3种形式的Nib基因序列的转基因植物中检测到相应的RNA的转录产物,但是均未能检测到其相应的蛋白表达产物。

关 键 词:马铃薯Y病毒,复制酶基因,转基因植物,抗病性

High Virus-resistance of Transgenic Tobacco Plants Mediated by Expression of Modified NIb Gene of Potato Virus Y
Xiang Yu Yang Lanying Peng Xuexian Mang Keqiang.High Virus-resistance of Transgenic Tobacco Plants Mediated by Expression of Modified NIb Gene of Potato Virus Y[J].Chinese Journal of Biotechnology,1996,12(3):258-265.
Authors:Xiang Yu Yang Lanying Peng Xuexian Mang Keqiang
Abstract:
Keywords:Potato Virus Y  replicase gene  transgenic plant  resistance against virus
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