海藻酸钠固定化重组川芎咖啡酸-3-O-甲基转移酶

利用IPTG诱导含有川芎咖啡酸-3-O-甲基转移酶(LCCOMT)的大肠杆菌工程菌E.coli BL21(DE3)/pET28a-LCCOMT,经Ni~(2+)亲和层析、质谱鉴定获得纯化的LCCOMT。采用海藻酸钙凝胶包埋固定LCCOMT,单因素实验考察最佳固定化条件对固定化酶活力的影响,并确定了固定化酶的最适温度、pH值、Km、Vmax与反应批次等酶学性质。确定的条件分别为海藻酸钠质量分数1.5%,CaCl_2浓度2.5 g/L,固定化时间2 h,载体与酶质量比40 000∶1。通过正交实验确定最终固定化条件为CaCl_2浓度2.5 g/L,海藻酸钠质量分数2.0%,固定化时间1 h,载体与酶质量分数35 000∶1时,固定化效果最好,此时相对酶活力为75.43%。固定化酶的最适催化温度为37℃、最适pH值为7.5,较游离酶分别增加0℃和0.5;Km、Vmax分别增高0.40和0.74;实验确定固定化酶的半衰期,连续使用6次,酶活力仍保留50%。     

喀麦隆芋艿根腐病病原菌鉴定

从采自喀麦隆不同地区的芋艿(Xanthosoma mafaffa L.)病根及田土中分离菌株,分别从雅温得(Yaound(?))和巴马约(Mbalmayo)分离到的腐霉菌株XPMY和XPMM1,根据其形态学及生理学特征鉴定为群结腐霉Pythium myriotylum,用上述腐霉菌株的游动孢子悬液或菌丝体片断悬液人工接种,表现叶黄化及根腐等典型症状。用经常伴随群结腐霉的立枯丝核菌Rhizoctonia solani及茄镰孢Fusarium solani人工接种后均未表现症状。研究结果表明:群结腐霉Pythium myriotylum Drechsler是喀麦隆芋艿根腐病的致病菌。     

左手螺旋Z-DNA的研究 Ⅴ 环境因子对Oligo-d(G-C)_6构象的影响

脱氧寡聚核苷酸ｄ（Ｇ－Ｃ）６是迄今所报道的同类脱氧多聚核苷酸中能形成左手螺旋ＤＮＡ（Ｚ－ＤＮＡ）的最短序列。环境因子如ＰＨ,温度和离子的类别与浓度对ｄ（Ｇ－Ｃ）６在溶液中的Ｚ－构象的形成和Ｂ－、Ｚ－构象的相对稳定性有着明显的影响。在合适的条件下,ｄ（Ｇ－Ｃ）６在溶液中可呈现Ｂ－构象区,Ｚ－构象相对稳定区和Ｂ－、Ｚ－构象跃迁过渡区。     

耐热醋酸棱状芽孢杆菌中具有高的二硫键还原活性组分的提取和特性研究

用ＤＥＡＥ－ＳｅｐｈａｒｏｓｅＣＬ－６Ｂ层析柱从Ｃ．ｔｈｅｒｍｏａｃｅｔｉｃｕｍ细胞提取物中分离出的两个具有相近分子量（７００）的活性组分,在ＭＶ＋存在下,对二硫键具有高的催化还原活性．这两组分参与的催化还原反应不以ＮＡＤ（Ｐ）Ｈ为电子供体．在实验条件下,对二硫键的催化还原活性顺序为：ＧＳＳＧ＞硫辛酰胺＞胱氨酸＞硫辛酸．活性组分具有较高的反应稳定性和热稳定性．两组分在２６０、３５４和５０５（４６５）ｎｍ处具有特征吸收峰．     

大鼠FMR1同源基因cDNA的克隆、测序与选择剪接的初步分析

应用ＲＴ－ＰＣＲ方法,从新生大鼠脑组织总ＲＮＡ扩增大鼠ＦＭＲ１同源基因的ｃＤＮＡ片段,克降至ｐＵＣ１８质粒中进行序列分析．获得从终止密码子起共１６８１ｂｐ的编码序列,尚缺少约２００ｂｐ的５′序列．所克隆的这部分大鼠ＦＭＲ１ｃＤＮＡ,不含有对应于人ＦＭＲ１基因的外显子１２及外显子１７第一和第三剪接受点之间的序列,提示大鼠ＦＭＲ１基因也有选择剪接表达．同源性分析显示,大鼠ＦＭＲ１与小鼠ＦＭＲ１基因的同源性为９７．７％,与人ＦＭＲ１基因的同源性为９４．９％;与小鼠ＦＭＲＰ（ＦＭＲ１蛋白）的氨基酸序列同源性为９８．４％,与人ＦＭＲＰ的氨基酸序列同源性为９７．９％．以大鼠ＦＭＲ１ｃＤＮＡ片段为探针检测到大鼠不同组织中ＦＭＲ１基因的选择剪接表达．上述结果为以大鼠为动物模型深入研究ＦＭＲ１基因功能奠定了基础．     

中国亚热带高大竹类植物毛竹竹笋克隆生长的密度调节

对许多多年生克隆植物来说,大量的研究表明：当光是限制因子时,随着立地密度的不断增加,克隆分株的出生率逐渐减小、死亡率逐渐增加。本文观测了乔木状高大竹类植物毛竹竹笋的出生与存活过程,结果表明：竹笋的出生率,即每样方的出笋数,明显地随着成竹立竹度的增加而增加。更确切地说,竹笋的数量,不管是出笋数还是活笋数,都明显地随着带新叶（１龄叶）的成竹立竹度的增加而增加,而与带老叶（２龄叶）的成竹立竹度相关性不显著。并且竹笋的死亡率是非密度制约的。这可能是由于对毛竹来说,其立地总是比较开敞,而且,其竹笋的生长在很大程度上是不直接需光的。     

微波处理修复抗原后免疫组织化学方法效果的比较研究

冰冻切片经微波处理进行抗原修复后,免疫组织化学方法的敏感性明显提高,显色效果明显增强。提出了冰冻切片在免疫组织化学显色前进行抗原修复的必要性     

由小麦赤霉病菌菌丝快速提取DNA用于PCR扩增反应

采用加玻璃珠混合振荡1800r／min15分钟并95℃水浴加热10～20分钟的物理破壁方法由真菌菌丝直接提取DNA用于PCR扩增,具有所提DNA可扩增性好、提取方法简便易行、便宜等优点。相同引物或不同引物的二次扩增产物均好于一次扩增,且以引物B1和B3扩增后再用引物Fg1和Fg2扩增的效果最好。此法可广泛应用于大量样品的PCR和RAPD扩增实验。     

蓝细菌ORF469的分子克隆和缺失突变工程株的构建

PCR扩增了蓝细菌Synechocystis sp．PCC 6803的ORF469(编码469个氨基酸的开放阅读框),进一步以pUC118为载体将其克隆到E．Coli中,构建了pOQ2质粒。通过DNA体外重组,以红霉素抗性基因取代部分克隆化ORF469片段,又构建丁缺失ORF469片段(保留部分上游和下游序列)的pOQ22质粒。用pOQ22质粒转化Synechocystis sp．PCC 6803野生株细胞,获ORF489缺失突变工程株,它在红霉素抗性培养基上生长正常。对缺失突变工程株DNA的PCR和Southern blot分析证明,Synechocystis sp．PCC 6803的ORF469已被删除。色素测定结果揭示Synechocystis sp．PCC 6803中ORF469表达产物控制细胞内不依赖光的叶绿素生物合成。     

螟蛾灯简易自动化关灯装置

水稻地区的病虫预测预报站,为了预测螟虫的发生动态与数量都需要点螟蛾灯,而全国统一规定,灯从天黑起点亮,到午夜十二点要熄掉,如何能使灯按时关熄,这对螟蛾数量统计的准确性起很重要的作用,也是在测报工作中很需要得到解决的问题。现将我县病虫