运用多重PCR-直接测序法检测ABO基因型及其遗传多态性

根据ABO基因座第6和7外显子9个SNP位点设计引物, 复合扩增后直接测序, 根据测序结果判定不同物证检材ABO基因型及其在藏族群体中的多态性分布。成功地检测出经过不同方法处理的血痕、毛发、口腔拭子、骨骼、混合斑等101例腐败、降解及微量检材的ABO基因型, 结果与免疫血清学分型一致, 且该方法具有灵敏度高、特异性好、操作简单、结果准确、客观及能够发现新等位基因等优点。对80名青海藏族无关个体的调查表明, ABO基因型分布符合Hardy-Weinberg平衡, 杂合度H为0.675, 多态信息含量PIC为0.672, 个人识别力DP值为0.874, 非父排除率PE值为0.391, 偶合度I为0.126; 青海藏族ABO等位基因频率O>B>A, 且O等位基因频率高达0.6125。多重PCR-直接测序法检测ABO基因型适用于法医学不同来源的样本, 提高了ABO血型系统的个体识别能力; ABO基因型在青海藏族人群中的分布具有较高多态性, 可用于法医学个体识别及群体遗传学研究。     

全细胞多重PCR检测蓝藻、微囊藻及产毒微囊藻方法初探

选取三对分别针对微囊藻、蓝藻16S rDNA及微囊藻毒素合成酶基因mcyB的保守序列的特异性引物209F/409R、27F1/409R、MTR/MTF,其中409R为一条共用引物。设计并优化了一种可以同时检测蓝藻和微囊藻的两重全细胞PCR方法和一种可以同时检测蓝藻、微囊藻和可产毒微囊藻的三重全细胞PCR方法,并且测试了这两种PCR反应的灵敏度区间,分别为10⁵～10³cell·mL^-1、10⁵～10²cell·mL^-1。对采集水库水样检测结果表明双重全细胞PCR方法可以直接应用于对天然水样的检测,三重全细胞PCR方法可用于实验室培养藻细胞的筛查。全细胞多重PCR方法具有快速、简便、准确等特点,在水体微囊藻毒素检测预警方面具有应用价值。     

藏鸡群体遗传多样性研究

藏鸡的体型外貌和生活习性与红色原鸡非常相似,是具有自己独特群体遗传特性的高原地方鸡种。为了有效保护并合理利用这一遗传资源,我们采用多重PCR与半自动荧光标记微卫星聚丙烯酰胺凝胶电泳相结合的方法检测了20个微卫星基因座的多态性,并随机抽取藏鸡群体中部分个体进行个体体形特征与生产性能的统计。结果表明藏鸡群体的20个微卫星基因座的多态等位基因数为4~10个,平均值为7.25个/基因座,多态信息含量（CPI）和杂合度（H）平均值分别为0.67、0.74。大染色体较小染色体的微卫星标记多态性程度要高。藏鸡群体的微卫星基因座多态性丰富,也解释了生产性能不均,外貌表现迥异的群体遗传特性。 Abstract: Morphological traits and living habit of Tibetan chicken, which is an aboriginal chicken breed on plateau with its own characteristic populational genetic features, are in great common with the Red Jungle Fowl, the assumed ancestry of domestic chicken. To fully exploit this chicken resource, Multiplex PCR with semi-automated polyacrilamide gel electrophoresis (PAGE) using fluorescently labeled microsatellite primers was used to detect the polymorphism at 20 microsatellite loci. At the same time, we randomly test the individual morphology and performance. It showed that numbers of polymorphic alleles were 4-10, with mean value 7.25 per locus. Polymorphism Information Content (CPI) and Heterozygosity (H) had mean values 0.67 and 0.74, respectively. Macrochromosomes had relatively higher polymorphism than microchromosomes(P>0.05). In all, high polymorphisms at microsatellite loci related to the uneven production performance and morphological discrepancy of population genetic characteristics in Tibetan chicken.     

ICU下呼吸道多重耐药菌医院感染的病原学临床特征及易感因素分析

摘要 目的：研究ICU下呼吸道多重耐药菌医院感染的病原学临床特征及易感因素。方法：选择2020年1月到2022年12月于我院ICU住院治疗的216例下呼吸道感染者,按照是否发生多重耐药菌感染分为研究组113例,对照组103例。分析两组患者感染相关因素的数量分布情况,通过Logistic回归分析多重耐药菌医院感染的危险因素。采用全自动细菌鉴定仪对菌种进行鉴定,采用K-B纸片法进行药敏试验,并分析多重耐药菌感染的病原学分布及对常用抗菌药物的耐药性。结果：（1）与对照组相比,研究组患者感染相关因素的分布率更高;（2）住院时间>3个月、使用糖皮质激素治疗、应用机械通气治疗、其他细菌感染、血红蛋白含量<100 g/L、抗菌药物使用时间>15 d、抗菌药物使用种类>4种、使用免疫抑制剂是ICU下呼吸道多重耐药菌感染的危险因素;（3）113例研究组共培养出细菌菌株93株,其中革兰氏阴性菌52株（55.91%）,革兰氏阳性菌25株（26.88%）,革兰氏阴性菌中较多的是铜绿假单胞菌（22株）、鲍曼不动杆菌（13株）、肺炎克雷伯菌（12株）;革兰氏阳性菌中最多的是肺炎链球菌（11株）和金黄色葡萄球菌（11株）;（4）耐药情况：铜绿假单胞菌对莫西沙星耐药率较低（15.83%）,肺炎克雷伯菌对亚胺培南耐药率较低（17.56%）,鲍曼不动杆菌对头孢哌酮/舒巴坦耐药率较低（16.37%）,金黄色葡萄球菌、肺炎链球菌对万古霉素无耐药性。结论：住院时间>3个月、使用糖皮质激素治疗、应用机械通气治疗、其他细菌感染、血红蛋白含量<100 g/L、抗菌药物使用时间>15 d、抗菌药物使用种类>4种、使用免疫抑制剂是多重耐药感染的独立危险因素。本院ICU下呼吸道感染以革兰氏阴性杆菌为主,应根据病原菌选择耐药性低的药物,并针对危险因素采取有效措施。     

基于多尺度的小鼠ECG信号复杂性与特征频率研究

已有的生理信号非线性分析仅研究了信号在单一采样频率下复杂度的差异.分析认为,可通过一个频率尺度因子寻找与生命活动密切相关的多重分形特性谱参数,该参数对生理、病理活动状态具有敏感性.通过小鼠药物实验模拟不同的生理和病理条件,研究并分析了健康小鼠与不同加药组小鼠心电图（electrocardiogram,ECG）信号的质量指数谱曲率随尺度因子分布,确定该信号复杂度最强、同时对疾病最敏感的特征频率范围,并得出心跳频率、心跳动力学复杂度以及ECG信号最敏感频率范围的内在联系.结果表明,在某一尺度因子范围内,小鼠ECG信号的质量指数谱曲率绝对值最大,并且这个最大值所在的尺度因子（或频率）范围不随计算的数据长度和最大粗粒化尺度因子的变化而改变.小鼠心率与其心跳动力学非线性复杂度之间并无直接联系,只与能够表达该动力学复杂度的ECG信号最敏感的频率范围有关.与心跳动力学复杂度有直接联系的是心脏健康状况,这两者在一定尺度因子范围内正相关.随着小鼠心跳频率升高,该ECG信号的敏感频率范围段也随之向高端移动.     

尿路感染上行所致血流感染中分离出多重耐药弗格森埃希菌一例

弗格森埃希菌是人和动物少见的机会致病菌,对弗格森埃希菌的寄生环境、致病性以及耐药特征等尚未完全明确,但其可引起创伤感染、尿道感染、菌血症、腹泻和胸膜等感染。我们从一老年女性中段尿和血流中同时分离出1株弗格森埃希菌,且呈多重耐药性。     

多重耐药鲍曼不动杆菌耐药性及β-内酰胺酶耐药基因的研究

研究多重耐药鲍曼不动杆菌的耐药性及β-内酰胺酶耐药基因的携带情况。采用VIKET Compact 2 全自动细菌鉴定系统进行细菌鉴定,采用纸片扩散法（K-B法）测定鲍曼不动杆菌对抗菌药物的耐药性,应用聚合酶链反应（PCR）法检测β-内酰胺酶耐药基因。32株多重耐药鲍曼不动杆菌对13种常用抗菌药物的耐药率均>80%,对亚胺培南和美罗培南耐药率分别高达78.1%和71.9%,头孢哌酮/舒巴坦耐药率31.3%,多粘菌素B抗菌活性最好,耐药率0%。检出超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）和头孢菌素酶（AmpC）耐药基因,未检出金属β-内酰胺酶（MBLs）耐药基因。32株多重耐药鲍曼不动杆菌TEM基因均阳性,17株检出PER基因,29株检出ADC基因。有16株菌同时携带TEM、PER、ADC基因。结果表明,同时携带TEM、PER、ADC基因是安徽医科大学解放军174临床学院鲍曼不动杆菌产生多重耐药性的原因之一。     

激光诱变洋葱L2代主要性状的多重回归分析

采用CO22和He-Ne两种激光的三种剂量,分别辐照两个洋葱品种的湿种子,试验采用随机区组设计,重复三次,利用生物统计学的方法,从个体水平上考查激光诱变洋葱L2代的鳞茎鲜重,横茎等主要性状的回归分析和遗传变异。结果表明：洋葱鳞茎的横茎、纵茎、单株生物产量与鳞茎鲜重间的回归关系显著,横茎的作用大于纵茎,育种中应重视鳞茎、横茎的选择。     

东北地区抗肌营养不良蛋白基因缺失的研究及应用

为了解东北地区Duchenne／Becker型肌营养不良症患者基因缺失的分布及进行产前基因诊断,用12对引物以多重PCR法检测120例DMD／BMD患者,并分析缺失型患者dystrophin基因的断裂点分布及各引物优化组合,并将高危男性胎儿行缺失检测。结果表明,缺失检出率为49．2％,66．4％的断裂点位于内含子44～52内,以内含子50为最多(14．8％),4对外显子引物的优化组合为外显子48、51、45和8,总检出率为41．7％;29例高危胎儿中9例男性胎儿为缺失型,缺失位点与先证者相同。通过首次对我国东北地区DMD／BMD患者筛查缺失发现dystrophin基因缺失主要分布于两个热区内,与国内其他地区比较外显子8附近区域可能是该地区缺失断裂的高发区;内含子44～52高度不稳定,其中内含子44的稳定性要高于中央缺失热区的稳定性,内含子50的不稳定性存在地区及种族差异;引物优化组合为检测患者及产前基因诊断提供了捷径,尤其是对散发家系是可行的并且有其优越性。     

配体和受体的多重相互作用模式

本文介绍了细胞因子/生长因子和受体相互作用时存在的多重结合方式;有共受体参与的多体结合,以及同时具有蛋白质-蛋白质,蛋白质-糖类不同性质的多点结合;并讨论了多重结合可能的生物学意义。