无细胞百白破联合疫苗腺苷酸环化酶毒素液质联用定量检测方法的建立和应用

目的 建立不同工艺配方的无细胞百白破联合疫苗(diphtheria,tetanus and acellular Pertussis combined vac-cine,DTaP)中腺苷酸环化酶毒素(adenylate cyclase toxin,ACT)的液质联用(liquid chromatography-tande...     

赤藓糖醇产生菌B845的形态、生理特征

分离筛选到了一株商赤藓糖醇能力高的菌种B845,通过对B845的形态,生理生化特性试验,发现该菌耐高渗,能发酵葡萄糖,蔗糖,麦芽糖,细胞为圆形,椭圆形,单边或多边芽殖,有真菌丝,在固体培养基上培养7d后颜色开始变深,由黄色变成褐黑色,参阅真蓝鉴定手册,初步鉴定为圆酵母属菌（Torula sp.)。     

云南热带户用沼气池的原核生物群落结构研究

【目的】揭示云南热带农村户用沼气池中的原核生物(细菌和古菌)的群落结构特征。【方法】采用16S r RNA基因克隆文库技术对云南(北)热带代表性气候区的户用沼气池中的原核生物(细菌和古菌)多样性进行研究。【结果】得到细菌330条有效序列,划分为108个OTUs,文库覆盖度为81.5%;古菌有效序列185条,划分为17个OTUs,文库覆盖度为97.8%。通过Gen Bank数据库进行相似性比对与系统发育分析,结果表明:大部分细菌为未知细菌(Unclassified bacteria,占24.19%),优势细菌类群归属拟杆菌门(Bacteroidetes,占23.58%)、绿弯菌门(Chloroflexi,占21.46%)、厚壁菌门(Firmicutes,占13.91%)和变形菌门(Proteobacteria,占8.74%);古菌主要的优势类群为乙酸盐营养型的甲烷八叠球菌目(Methanosarcinales)的鬃毛甲烷菌属(Methanosaeta,占76.75%);此外还检测到少量未培养的泉古菌门细菌(Crenarchaeota,占9.19%)。【结论】云南(北)热带代表性气候区的农村户用沼气池中的微生物种类十分丰富,不同微生物种类的丰度存在明显差异,并存在明显优势种群,且细菌比古菌具有更丰富的多样性。     

补充肠道益生菌治愈灰指甲8例分析

目的总结补充肠道益生菌治愈甲真菌病的经验。方法对2007年2月至2008年2月期间采用口服肠道益生菌治愈甲真菌病8例的临床资料进行分析。结果补充肠道益生菌可以治愈甲真菌病。结论补充肠道益生菌可以调节体内正常菌群的失衡,对肠道外的微生态失衡同样有效。     

2种内生细菌对文冠果幼苗矿质元素吸收的影响

为探究前期筛选的具有溶磷、产铁载体、产IAA能力的内生细菌对文冠果(Xanthoceras sorbifolia Bunge)幼苗矿质元素的影响,选取一株假单胞菌属菌株XSB5和一株约克氏菌属菌株GG10作为试验菌株。用菌液浸泡经过层积催芽的文冠果种子,待植株长出第一片真叶后,用等量的菌液和清水处理文冠果幼苗,4个月后分析文冠果植株的生长状况。结果表明:用XSB5菌液处理后,文冠果植株地上和地下生物量均显著增加(P<0.05);GG10菌液处理后,文冠果地上和地下生物量均有所增加,地下生物量增加达显著水平(P<0.05);两种菌液处理后文冠果植株N、P、Mg积累量较对照显著增加(P<0.05),Fe积累量因处理时间不同而有差异;4种矿质元素的转运系数因不同菌液、不同处理时间而有差异;栽培基质中有效态N、P含量较对照显著增加(XSB5-30处理除外),有效态Mg、Fe含量与对照无显著差异。说明接种这2种内生细菌能影响栽培基质中矿质元素含量的变化,提高文冠果植株对矿质元素的吸收,改变矿质元素向上的运输能力,从而促进文冠果植株的生长。该研究可为文冠果促生菌肥的筛选提供一定的理论基础。     

外源表达的人copine V诱导细胞死亡的研究

目的：copines蛋白家族是新近发现的一类分布广泛、进化保守的Ca2＋依赖性磷脂结合蛋白,copineV是其成员之一.为研究copineV基因的功能,构建了人copineV基因的真核表达质粒并转染HEK293细胞,以进一步研究其功能.方法：构建人copineV编码区序列的真核表达质粒pCDNA4/copineV,脂质体法转染HEK293细胞.通过RT-PCR、克隆形成实验和Hochesst33342染色等方法观察copineV基因对HEK293细胞生长的影响.结果：外源表达的人copine V可以诱导HEK293细胞死亡,无法筛选到稳定克隆.结论：人copineV可以诱导HEK293细胞死亡,为进一步研究copineV基因的生物功能提供了线索.     

毛蕊异黄酮通过JAK2/STAT3信号通路抑制大鼠动脉粥样硬化

摘要 目的：探究毛蕊异黄酮（CA）治疗动脉粥样硬化（AS）的作用及其机制。方法：将10只未建模和给药的Wistar大鼠作为对照组（Control组）,50只AS建模Wistar大鼠随机分为AS模型组（AS组）、低剂量CA组（L-CA组,10 mg/kg）、中剂量CA组（M-CA组,50 mg/kg）、高剂量CA组（H-CA组,100 mg/kg）和阳性药物辛伐他汀组（Sim组,2 mg/kg）,每组10只。每天给药1次,连续4周。通过苏木精伊红（HE）染色观察大鼠胸主动脉组织的病理变化。按照试剂盒说明书测定各组大鼠血清总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）、丙二醛（MDA）和超氧化物歧化酶（SOD）水平。将大鼠血管平滑肌细胞（VSMC）分为6组,Control组、血管紧张素Ⅱ（Ang Ⅱ）组（10-6 mmol/L Ang Ⅱ）、Ang Ⅱ+0.1 CA组（10^-6 mmol/L Ang Ⅱ+0.1 mg/L CA）、Ang Ⅱ+1 CA组（10^-6 mmol/L Ang Ⅱ+1 mg/L CA）、Ang Ⅱ+10 CA组（10^-6 mmol/L Ang Ⅱ+10 mg/L CA）、Ang Ⅱ+1 CA+AG490（10^-6 mmol/L Ang Ⅱ+50 μmol/L AG490）组。通过CCK-8法和EdU染色测定VSMC的增殖,Transwell测定VSMC的迁移。通过免疫荧光染色检测VSMC中的α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）表达。通过Western blot检测大鼠胸主动脉组织和VSMC中的α-SMA、骨桥蛋白（OPN）、JAK2、p-JAK2、STAT3、p-STAT3的蛋白表达。结果：L-CA组、M-CA组、H-CA组和Sim组大鼠胸主动脉的病变均较AS组减轻,其中H-CA组和Sim组形态改善最明显。与AS组相比,M-CA组、H-CA组和Sim组大鼠的血清中TC、TG、LDL-C和MDA水平降低（P<0.05）,血清HDL-C和SOD水平升高,胸主动脉组织中的α-SMA蛋白表达水平升高（P<0.05）,OPN的蛋白表达水平及JAK2和STAT3的蛋白磷酸化水平降低（P<0.05）。与Ang Ⅱ组相比,Ang Ⅱ+1 CA组、Ang Ⅱ+10 CA组和Ang Ⅱ+1 CA+AG490组的相对细胞活力和EdU阳性率降低（P<0.05）,迁移细胞数降低（P<0.05）,α-SMA相对荧光强度和蛋白表达水平升高（P<0.05）,OPN的蛋白表达水平及JAK2和STAT3的蛋白磷酸化水平降低（P<0.05）。结论：CA可减轻AS大鼠的胸主动脉病变、纠正血脂代谢和氧化应激失衡,其机制可能与CA对VSMC表型转化和JAK2/STAT3信号通路的抑制有关。     

两种不同类型无细胞百日咳疫苗诱导小鼠免疫应答分析

目的比较两种不同类型无细胞百日咳疫苗免疫小鼠后诱导体液免疫和细胞免疫应答的特点。方法将BALB/c小鼠分为3组(分别纯化Pa组、共纯化Pa组、PBS组),分别用稀释后的两种不同工艺生产的无细胞百日咳疫苗及PBS皮下接种,接种量0.5 m L/只,于第4周加强免疫,剂量与初免相同。于免疫后第1周、第4周和第5周取血,分离血清用于检测小鼠抗百日咳抗体Ig G水平(抗-PT和抗-FHA);同时于加强免疫后第7天,分离小鼠脾淋巴细胞,经刺激后,取其培养上清,用流式细胞微球芯片捕获法(cytometric bead array,CBA法)测定脾淋巴细胞经体外刺激后所产生的Th1、Th2和Th17型细胞因子的含量。结果对两种类型无细胞百日咳疫苗组检测的结果进行比较,在免后第4周,分别纯化Pa组和共纯化Pa组的抗-PT和抗-FHA Ig G水平差异无统计学意义(P0.05);但在免后第5周,分别纯化Pa组的抗-PT和抗-FHA Ig G水平均高于共纯化Pa组,差异均具有统计学意义(P0.05)。经PT刺激后诱导产生的细胞因子,分别纯化Pa组的IL-4含量高于共纯化Pa组,差异具有统计学意义(P0.05);分别纯化Pa组和共纯化Pa组的其他细胞因子差异均无统计学意义(P0.05)。结论两种类型的无细胞百日咳疫苗免疫小鼠后均能诱导产生体液免疫应答和细胞免疫应答。     

临床常用抗生素对G-致病菌的效价分析

目的:调查我院常用抗生素的种类及其对,临床常见的G~-致病菌的效价情况,为合理选用抗生素提供临床资料。方法:从2246个样本中分离到646株G~-致病茵,用全自动微生物分析仪-VITEK 32进行菌种鉴定及20种抗生素的药敏实验。结果:646株G~-致病菌经鉴定属于14大类,其中铜绿假单胞菌160株,占24.77%;大肠埃希氏菌135株,占20.90%;鲍曼不动杆菌90株,占13.93%;克雷伯菌属116株,占17.96%;其它9种G~-致病菌所占的比例均小于7%。头孢类抗生素是目前最为常用的。在检测的20种抗生素对检测的14种G~-致病菌的效价最高的前三位分别是:亚胺培南(IMP)82.66%、美洛西林(MEZ)81.15%、环丙沙星(CIP)61.06%;效价最差的三位分别是:头孢呋辛(CFO)23.76%、头孢噻吩(CEP)26.74%、替卡西林(TIC)31.58%。结论:经典的抗生素对G~-致病菌的效价不容乐观,且非科学的联合用药可能会降低药效。     

脂肪酶产生菌地霉7203菌株的分离和诱变

从76个土样中分离获得271株脂肪酶产生菌,其中7203菌株产酶活性最高,从其形态特征确定属地霉属。对该菌株脂肪酶合成受油脂、脂肪酸及某些结构类似物的影响进行了考察,发现琥珀酸钠对该菌株生长及产酶有明显的负控制作用。经诱变筛选药物耐性变异株,使产酶能力有较大的提高。对改良株的发酵条件及特征作了初步试验,并对有关机理进行讨论。