全文获取类型
收费全文 | 231篇 |
免费 | 38篇 |
国内免费 | 119篇 |
出版年
2024年 | 4篇 |
2023年 | 16篇 |
2022年 | 12篇 |
2021年 | 17篇 |
2020年 | 12篇 |
2019年 | 7篇 |
2018年 | 14篇 |
2017年 | 2篇 |
2016年 | 15篇 |
2015年 | 8篇 |
2014年 | 23篇 |
2013年 | 15篇 |
2012年 | 14篇 |
2011年 | 18篇 |
2010年 | 14篇 |
2009年 | 9篇 |
2008年 | 14篇 |
2007年 | 12篇 |
2006年 | 11篇 |
2005年 | 5篇 |
2004年 | 5篇 |
2003年 | 11篇 |
2002年 | 12篇 |
2001年 | 11篇 |
2000年 | 7篇 |
1999年 | 3篇 |
1998年 | 4篇 |
1997年 | 5篇 |
1996年 | 6篇 |
1995年 | 15篇 |
1993年 | 5篇 |
1992年 | 3篇 |
1991年 | 4篇 |
1990年 | 3篇 |
1989年 | 6篇 |
1987年 | 3篇 |
1986年 | 5篇 |
1985年 | 4篇 |
1984年 | 3篇 |
1983年 | 3篇 |
1982年 | 3篇 |
1981年 | 4篇 |
1979年 | 2篇 |
1965年 | 1篇 |
1964年 | 2篇 |
1963年 | 2篇 |
1959年 | 3篇 |
1958年 | 1篇 |
1957年 | 1篇 |
1956年 | 2篇 |
排序方式: 共有388条查询结果,搜索用时 31 毫秒
81.
82.
生物芯片研究开发进展 总被引:3,自引:0,他引:3
本文从载体材料,点样方式,芯片固定的生物分子和功能等方面对生物芯片进行了详细的分类,并以芯片所固定的生物分子的分类方式为基础,就基因民间片,蛋白质芯片及芯片实验室的国内外研发进展作了介绍;最后指出了目前生物芯片研究和开发中存在的问题。 相似文献
83.
84.
85.
为了能够找出一种既容易操作,又不需要特殊设备的核移植方法,对以前的操作进行了改进。首先以预先吸有细胞核或细胞的注射针在固定于持卵针上的卵母细胞透明带上穿刺两个孔,然后一边缓慢地将注射针回拔至卵周隙中,一边逐渐增加持卵针中的负压,直至极体与目标核质被完整吸入持卵针中而完成去核,最后在不拔出注射针的情况下直接注射细胞核或完整细胞进而完成重构胚的构建。用此方法对200个卵母细胞进行注核和注细胞操作,平均完成一个重构胚的构建各自耗时约40s和30s,成功率分别为62·6%和86·0%。用核染料Hoechst33342对卵母细胞的去核效率进行验证,去核成功率达到73·3%。实验证明,用此方法可以在只有倒置显微镜和显微操作仪的条件下一次性快速完成去核和注核,大大提高了细胞核移植的效率和重构胚成活率;更重要的是该方法操作简单,新手可以很快掌握该技术,易于在实际工作中推广应用。 相似文献
86.
心草中总黄酮含量的测定及其提取工艺研究 总被引:2,自引:0,他引:2
目的:测定心草中的总黄酮含量并确定其提取条件。方法:采用分光光度法测定、乙醇浸提法提取心草中的总黄酮。结果:浸提的最佳条件是:A3B1C3D2,即用20倍50%乙醇在70℃下进行6h,总黄酮含量为15.675%。平均加样回收率为97.67%。结论:心草中的总黄酮含量较高,此方法简便、快速、重现性好,可作为检测心草中黄酮含量的一种手段。 相似文献
87.
为探讨酿酒酵母(S.cerevisiae)S期检查点通路上,web2(wants E1A badly2,web2)基因与rad53基因的上下游位置及相互作用关系,利用羟基脲(hydroxyurea,HU)分别阻断web2突变株和野生株细胞的DNA合成.采用pHA- rad53质粒救助实验测定质粒源性Rad53蛋白是否能救助web2突变株对羟基脲的敏感性;Western印迹及免疫共沉淀反应检测Rad53蛋白表达及磷酸化.结果显示,pHA-rad53质粒可以救助web2突变株的存活;Western印迹检测到web2突变株内质粒源性Rad53蛋白表达增强而且至少Rad53部分蛋白为磷酸化蛋白.说明在HU作用下,过表达并磷酸化的质粒源性Rad53蛋白可以救助web2突变株的S期检查点功能缺陷,在酿酒酵母S期检查点通路上web2基因位于rad53基因上游,可能直接参与将检查点信号传递至Rad53蛋白. 相似文献
88.
研究旨在进一步探索同一人种的不同民族之间GPIb的多态性是否存在差异。血小板从84名健康鄂温克族,85名达斡尔族青年志愿采血分离而获得,血小板样品经SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)后,再转移至硝酸纤维素膜上(Western blotting),用生物素化的素胚凝集素(WGA/Bio)偶联辣根过氧化酶复合物试剂盒(ABCkit)分步孵育,再以4-氯-1-萘酚显影,膜上呈现的深灰色带即是GPIbα链,其分子量分别为141、136、132、128kD,此即A、B、C、D四型,此为基因型,其中每两型构成一个表型,本研究证明,在我国鄂温克族人群中,等位基因A、B、C、D的频率分别为0.113,0.375,0.381,0.131;在达斡尔族中,A型为0.124,B型为0.406,C型为0.359。D型为0.112。经统计学分析。在这两个民族的人群之间,其GPIb各基因频率无显性差异。两个民族人群的GPIb表型经卡方检验也无显性差异。由此结果说明,鄂温克,达斡尔两个民族的人群之间,GPIb的多态性特征是相似的。 相似文献
89.
【背景】海岛棉相对陆地棉更易感枯萎病,一旦发生很难根治,使得枯萎病逐渐成为威胁新疆海岛棉产业发展的主要病害,但其致病机理目前还不是十分明确。【目的】揭示棉花枯萎病菌的遗传变异和致病机理,同时获得带有绿色荧光蛋白(Green Fluorescent Protein,GFP)标记的棉花枯萎病菌转化子用于观察其侵染海岛棉的途径。【方法】采用农杆菌介导的遗传转化(Agrobacterium tumefaciens-Mediated Transformation,ATMT)方法,对棉花枯萎病菌7号生理小种st89进行了遗传转化并对转化条件进行优化。【结果】农杆菌介导的遗传转化法转化棉花枯萎病菌的最佳条件为:150 mg/L的潮霉素浓度能完全抑制棉花枯萎病菌的生长,浓度为200 mg/L的头孢噻肟钠能完全抑制农杆菌LBA4404生长,农杆菌起始浓度OD_(600)为0.2,农杆菌预培养时间为8 h,棉花枯萎病菌分生孢子浓度为10~5个/mL,枯萎病菌孢子悬液和农杆菌LBA4404比例为1:1,乙酰丁香酮浓度为200μmol/mL,共培养时间为4 d,转化后培养温度25℃。利用优化的转化系统将GFP基因转入到棉花枯萎病菌中,转化效率最高可以达到252±7.37个转化子/10~5个孢子。PCR扩增以及荧光观察表明GFP基因能够正常表达。【结论】转GFP基因的枯萎病菌的获得为深入研究棉花枯萎病入侵的机理奠定了基础。 相似文献
90.
产甲烷古菌是目前发现唯一能产生甲烷气体的微生物,也是自然界中生物甲烷的主要贡献者。甲基-辅酶M还原酶 (Methyl-coenzyme M reductase,Mcr) 负责产甲烷代谢中最后一步甲烷的生成与甲烷氧化代谢中第一步甲烷的激活反应。该酶的基因高度保守,被广泛应用于古菌的鉴定与系统发育研究。其特殊的辅因子F430及催化碳氢 (C-H) 键裂解的酶学机制也一直备受关注。近年来,在高分辨率蛋白结构和反应过渡态结构方面的重要突破有效地推动了Mcr结构与功能的研究。特别是最新发现的激活非甲烷烷烃厌氧降解的类甲基-辅酶M还原酶 (Mcr-like),引起了众多研究者对该类酶激活惰性烷烃分子机制的浓厚兴趣。因此,文中概述了Mcr结构、功能及催化机制的最新研究进展,包括新发现的Mcr-like的研究情况,并展望了Mcr/Mcr-like酶在烷烃厌氧氧化及温室气体控制方面的未来研究方向。 相似文献