滨梅2个肌动蛋白cDNA片段的克隆与表达

目的:克隆耐盐碱果树滨梅的肌动蛋白基因actin,为该物种优异性状基因的功能鉴定提供内参.方法:利用一对actin简并引物克隆滨梅actin cDNA片段,对其进行序列和表达分析.结果:得到2条743 bp的cDNA片段,两条核苷酸序列相似性为82％,命名为PmAct1和PmAct2并在GenBank登录(分别为JX855160和JX855161);序列比对发现2条actin片段氨基酸序列与其他植物同源性均在96％以上;根据不同果树Actin相似性构建进化树,表明2个滨梅actin明显分为两种类型,但均与蔷薇科果树亲缘关系较密切;半定量RT-PCR表达谱发现PmAct1可能为组成型表达类型,而PmAct2特异地在根和叶组织中表达量较高.结论:首次获得了2个滨梅actin基因,为该物种其他功能基因的挖掘和表达分析奠定了基础.     

培美曲塞与吉西他滨联合卡铂治疗初治老年晚期肺腺癌的临床观察

目的:比较培美曲塞与吉西他滨联合卡铂治疗初治老年晚期肺腺癌的疗效和安全性。方法:收集2010年1月-2011年12月我院≥65岁的Ⅲb期和Ⅳ期肺腺患者84例,随机分为培美曲塞联合卡铂(PC)组:培美曲塞500 mg/m2d1,卡铂按曲线下面积(Auc)=5的剂量水平d2;吉西他滨联合卡铂(GC)组:吉西他滨1000 mg/m2d1,8,卡铂按Auc=5的剂量水平d2,两组1个治疗周期均为21 d,每组42例,比较两组患者的有效率,不良反应及1、2年生存率。结果:PC组和GC组总有效率分别为28.6%和19%(P0.05),疾病控制率分别为73.8%和57.1%(P0.05);两组的中位PFS分别为11.8个月和10.2个月(P0.05),1年生存率分别为52.3%和51.2%(P0.05),2年生存率分别为24.1%和22.4%(P0.05);PC组患者白细胞减少、贫血及血小板减少的不良反应发生率均明显低于GC组(P0.05)。结论:培美曲塞联合卡铂与吉西他滨联合卡铂对初治老年晚期肺腺癌的疗效相近,但前者可能更安全;PC方案可作为老年晚期肺腺癌有效的一线化疗方案。     

奈达铂联合长春瑞滨结合同步放疗治疗晚期鼻咽癌的疗效分析

目的:研究奈达铂联合长春瑞滨结合同步放射治疗晚期鼻咽癌的有效性和安全性.方法:选择我院收治41例病理证实为晚期鼻咽癌患者,给予奈达铂(100mg/m2,d1)和长春瑞滨(25mg/m2,d1,8)化疗,每21天为一周期,完成第一周期后行放疗,放疗期间同步化疗.结果:本组患者CR为70.7%.PR为26.8%,SD为2.4%,总有效率为97.6%,1a无复发生存率为97.6%,1a无远处转移生存率为87.8%,毒副反应主要为血液性毒性,治疗后均恢复,均可以耐受.结论:奈达铂联合长春瑞滨结合同步放射治疗晚期鼻咽癌近期疗效较好,耐受性良好且安全性较高.     

豇豆胰蛋白酶抑制剂基因转化芥菜及抗虫鉴定

用农杆菌介导将豇豆胰蛋白酶抑制剂 (CpTI)基因导入芥菜 ,获得了Kan抗性植株 .经PCR扩增、PCR Southern印迹和Northern印迹分析 ,转化再生植株大部分呈阳性 ,而非转化的再生植株均为阴性 ,证明CpTI基因已存在于芥菜基因组中 .在室内进行了喂虫试验 ,结果表明转基因芥菜抗虫性明显高于对照 ,转基因植株之间存在抗虫性差异     

一种简便、快捷的胰蛋白酶抑制剂基因的分离与克隆方法

从 3个豇豆品种幼嫩叶片中分离出核基因组 DNA,参照已知的几种 Bowman-Birk型胰蛋白酶抑制剂基因序列 ,设计合成了 2 7bp,且含有 Bam H I位点的寡核苷酸引物 ,分别以 3种豇豆核基因组 DNA为模板 ,PCR扩增 ,均得到长度约为 3 40 bp的 DNA片段。产物 DNA片段经 DNA序列分析 ,结果表明三者的碱基序列相同 ,与报道的胰蛋白酶抑制剂基因相比 ,同源性为 1 0 0 %和 99.7%。     

豇豆初生叶多胺氧化酶的催化特性

从豇豆幼苗 (6d苗龄 )初生叶提纯得到的多胺氧化酶 (EC 1 .4.3 .6 )属于二胺氧化酶 ,最有效的底物是 1 ,4 二胺丁烷 (腐胺 )、1 ,5 二胺戊烷 (尸胺 )、1 ,6 二胺己烷、1 ,1 0 二胺癸烷等α 二胺 ,其催化活性随二胺类底物碳链的增长而相应减弱。豇豆多胺氧化酶对亚精胺和精胺也具有较高的催化活性。另外 ,底物腐胺和尸胺的浓度超过 2mmol/L或亚精胺和精胺浓度超过 3mmol/L时会对酶活性有抑制效应。以腐胺和尸胺为底物时 ,酶的最适 pH约为7.0 ,而以亚精胺和精胺为底物时其最适pH为 6 .5。该酶的催化活性还随反应介质的离子强度增加而降低。K ,Ca2 和Mg2 (皆为 1 0mmol/L)对酶活性无明显抑制作用 ,而同样浓度的Mn2 ,Zn2 ,Fe2 ,Co2 和Cd2 则对酶活性有不同程度的抑制作用。金属螯合剂EDTA(1 0mmol/L)和腺苷蛋氨酸脱羧酶抑制剂甲基乙二醛 双脒腙 (0 .1mmol/L)可抑制酶活性约 80 % ,而铜结合剂KCN(1 .0mmol/L)、羰基试剂羟胺 (0 .1mmol/L)和氨基胍 (0 .1mmol/L)可导致该酶完全失活     

GEMOX栓塞化疗联合三维适形放疗治疗局部晚期原发性肝癌临床研究

目的:比较GEMOX方案(吉西他滨、奥沙利铂)与FAM方案(氟尿嘧啶、阿霉素、丝裂霉素)肝动脉化疗栓塞TACE联合三维适形放疗(3DCRT)治疗局部晚期原发性肝癌的疗效和不良反应。方法:经病理或影像学明确诊断的138例晚期原发性肝癌患者随机分为:研究组70例,采用GEMOX方案(吉西他滨0.8-1.0 g/m~2、奥沙利铂85-100 mg/m~2加入超液化碘油10~30 mL)TACE治疗,每月1次,连用2-3次,经TACE治疗后3-4周行3DCRT,总剂量DT48~60Gy,每次4~5Gy,隔天1次,每周3次,连续4周;对照组68例,采用FAM方案(5-氟尿嘧啶500-1000 mg注入靶动脉,然后将阿霉素50 mg/m~2,丝裂霉素12 mg/m~2与超液化碘油10-30 mL充分混合后缓慢注入,再用明胶海绵颗粒栓塞靶动脉)TACE治疗,每月1次,连用2-3次;经TACE治疗后3-4周行3DCRT,方案同研究组。结果:治疗中研究组2例、对照组1例患者于3DCRT后3-4个月死亡,未进行即期疗效评价。研究组68例患者中CR3例(4.4%),PR 48例(70.6%),SD10例(14.7%),PD7例(10.3%),总有效率(CR+PR)为75.0%(51/67);对照组67例患者中CR1例(1.5%),PR36例(53.7%),SD13例(19.4%),PD17例(25.4%),总有效率(CR+PR)为55.2%(37/67);总有效率研究组明显优于对照组,两组比较有显著统计学意义(X~2=20.973,P0.001)。总生存时间中位数研究组14.0月(95%CI 11.5~16.5)优于对照组的11.0月(95%CI 9.7~12.3),两组比较有显著统计学意义(X~2=6.093,P=0.014);无进展生存时间中位数研究组7.0月(95%CI,5.6~8.3),对照组6.0月(95%CI 5.1~6.8),两组比较有显著统计学意义(X~2=5.460,P=0.019)。1、2、3年生存率研究组分别为63.4%、39.7%、23.5%,明显高于对照组的46.3%、23.9%、10.5%;两组比较有显著统计学意义(P0.05)。两组常见的不良反应主要表现为白细胞减少、血小板减少、贫血、恶心、呕吐和发热等,患者均可耐受。结论:TACE联合3DCRT治疗晚期原发性肝癌疗效GEMOX方案明显优于FAM方案,不良反应可相当,有待进一步研究。     

地西他滨联合CAG方案对急性髓系白血病患者血清IFN-γ，HBDH与LDH水平的影响

目的:研究地西他滨联合CAG方案对急性髓系白血病患者血清γ干扰素(IFN-γ)、α-羟丁酸脱氢酶(HBDH)与乳酸脱氢酶(LDH)水平的影响。方法:选取2013年2月至2016年10月我院接诊的70例急性髓系白血病患者作为本次研究对象,并按照随机数表法分为观察组(35例)和对照组(35例)。两组患者均采用常规治疗,对照组在基础治疗上,加用CAG方案,静脉注射阿克拉霉素,每次20 mg;粒细胞集落刺激因子,每次300μg;皮下注射阿糖胞苷,每次10~15 mg/m2;观察组在对照组基础上,加用15mg/m2地西他滨静脉滴注治疗。观察和比较两组患者的临床疗效,治疗前后血清IFN-γ、HBDH、LDH水平的变化及不良反应的发生情况。结果:治疗后,观察组总有效率显著高于对照组[91.42%(32/35)vs.68.57%(24/35)](P0.05);血清IFN-γ、HBDH、LDH水平显著低于对照组[(3.21±1.01)pg/mL vs.(5.13±1.90)pg/mL,(103.62±26.39)U/L vs.(118.80±28.60)U/L,(101.36±27.32)U/L vs.(123.08±30.59)U/L](P0.05);不良反应总发生率显著亦明显低于对照组[20.00%(7/35)vs.42.85%(15/35)](P0.05)。结论:地西他滨联合CAG方案治疗急性髓系白血病患者的临床疗效优于单用CAG方案,可能与其显著降低患者血清IFN-γ、HBDH与LDH的水平有关。     

光质对豇豆幼苗环旋运动的影响

为研究光质对豇豆(Vigna unguiculata)幼苗环旋运动的影响, 分别在暗箱的顶部和侧面固定一台红外检测仪, 在垂直生长方向分别设置白、红、蓝、红-蓝光源, 对豇豆幼苗生长点运动进行48 h的等间隔(5 min)拍照, 读取图片中豇豆幼苗生长点的轨迹坐标进行分析。结果表明: 黑暗下, 豇豆幼苗生长点的运动分为逆时针螺旋上升(约占1/3)和不规则的摆动上升(约占2/3)两类。螺旋上升持续时间为18.3 h, 后转为不规则的摆动上升, 环旋一周的时间为(82.7 ± 4.2) min, 最大摆幅为2.0 cm, 最小摆幅为0.5 cm。白光下为趋向光源摆动上升, 摆动幅度由大到小, 再变大, 最大摆幅为0.6 cm, 最小摆幅为0.1 cm。红光下为近直线趋向光源和垂直光源方向摆动两个阶段, 近直线趋向光源持续(21.9 ± 1.6) h, 垂直光源方向摆动持续(8.8 ± 0.5) h, 最大摆幅为3.5 cm, 最小摆幅为2.0 cm。蓝光下为“Z”形向光源上升运动, (110.0 ± 5.8) min和(223.5 ± 4.9) min两种周期交替进行。红-蓝光下趋向蓝光运动持续(12.0 ± 3.8) h后, 转慢速趋红光运动。不同光质下48 h内豇豆幼苗增长高度由高到低为: 红光>黑暗>蓝光>白光>红-蓝光。豇豆幼苗在没有光照下也产生环旋运动, 环旋运动不需要光的诱导, 但光质改变了幼苗运动的方向和速度。不同光质下豇豆幼苗有不同的运动形式, 但总体上都表现为趋光性。