环境因子对硬骨鱼类性腺发育成熟及其排卵和产卵的调控

对影响硬骨鱼类性腺发育成熟及其排卵和产卵的诸多环境因子进行了综述（如水温、光照、降雨和水流、水体化学因子、水体生物因子以及环境污染（环境胁迫）等）,并对其调控机制进行了阐述,侧重强调了环境胁迫对硬骨鱼类生殖的影响,旨在从生态学角度为保护鱼类种质资源提供对策。     

定量测定黑鲷生长激素受体mRNA的液相杂交/RNase保护法

目的　建立液相杂交 核糖核酸酶保护测定 (RibonucleaseProtectionAssay,RPA)技术定量检测黑鲷(Sparusmacrocephalus)生长激素受体mRNA水平。方法　将黑鲷生长激素受体cDNA片断亚克隆至pGEM T载体 ,制备特异性的放射性反义RNA探针及正义RNA ,将反义RNA探针与正义RNA及样品总RNA进行液相杂交 ,用RNaseA和RNaseT1 降解杂交产物的单链RNA ,双链杂交体得到保护 ,然后检测杂交体的分子大小及放射强度。结果　检测出了黑鲷生长激素受体反义RNA探针与正义RNA及样品总RNA的特异性杂交片断 ,由此建立了定量测定黑鲷生长激素受体mRNA的液相杂交 RNase保护法 ,并采用该方法在黑鲷的多种组织中检测出了生长激素受体基因的表达 ,表达水平在肝脏中最高。该结果与我们曾采用生长激素放射受体分析法对黑鲷生长激素受体所研究的结果相吻合。结论　为进一步深入研究鱼类生长激素受体分子内分泌的调控理论提供了有力手段。     

饥饿对黑鲷血清生长激素、甲状腺激素以及白肌和肝脏脂肪、蛋白质含量的影响

饥饿处理黑鲷 (Sparusmacrocephalus) 2、 5、 10、 15和 30d ,分别测定血清生长激素 (GH)和甲状腺激素三碘甲状腺原氨酸 (T3 )浓度以及脂肪和蛋白质在白肌和肝脏中的含量 ;同时测量正常摄食动物的相应指标作为对照。数据分析结果显示 :①饥饿 15d后血清GH水平显著升高 ,T3 水平显著降低 ;②饥饿 15d后白肌蛋白质含量显著降低 ,而脂肪含量则在饥饿 2d就降低 ,并维持此低水平 ;③肝脏脂肪含量在饥饿 10d后显著升高 ,而蛋白质呈不规则波动。GH水平升高能强化储能物质的转化 ,而T3 水平降低可降低代谢水平。二者的协同作用很可能是该种应对饥饿胁迫的重要生理反应机制     

石斑鱼垂体腺苷酸环化酶激活多肽和生长激素释放激素基因的cDNA克隆及表达分析

垂体腺苷酸环化酶激活多肽 (PACAP)和生长激素释放激素 (GHRH)均属于血管活性肠肽家族成员 ,且两者前体基因在脊椎动物的鸟类、两栖类、鱼类中由同一基因编码 ,而哺乳动物是由两个不同基因编码。已有几例关于鱼类编码PACAP和GHRH基因克隆的报道 ,而关于重要海水养殖鱼类石斑鱼的PACAP和GHRH基因未见报道。克隆了PACAP GHRH前体cDNA序列 ,该前体有两种剪接方式 ,包括一个长序列和一个短序列 ,其中长序列编码PACAP和GHRH ,短序列缺失 10 5个碱基 ,仅编码PACAP而缺失编码GHRH的外显子区 ,同样情况在虹鳟和沟鲶中也有报道。通过半定量RT PCR方法对石斑鱼PACAP GHRH前体mRNA在胚胎发育和发育早期以及各部位的表达情况进行了分析。胚胎发育分析结果表明 ,从神经胚期开始 ,PACAP GHRH前体mRNA大量表达 ,提示该蛋白质在神经发育或神经营养方面具有重要作用。PACAP GHRH前体基因在中枢系统的表达量远高于外周组织。在鱼类的眼和鳃发现PACAP GHRH前体分布。     

花鳗鲡脑cDNA文库的构建及GnRh日基因克隆与表达分析

以花鳗鲡脑组织为材料,提取总RNA,应用CloneminerTM文库构建试剂盒构建cDNA文库.经检测,文库的滴度为4.3×106 cfu/mL,总容量为5.16×107cfu/mL,阳性克隆率为99.6%,插入片段0.43-3.2kb之间,平均插入片段大小为1532bp.以文库为模板,克隆获得花鳗鲡两种类型的促性腺激素释放激素(mGnRH和cGnRH-Ⅱ)cDNA序列.序列分析表明,花鳗鲡mGnRH cDNA开放阅读框(ORF)包含276个碱基,编码91个氨基酸,其中包括22个氨基酸的蛋白质前体信号肽(1-22位氨基酸)、mGnRH十肽(23-32位氨基酸)、一个三肽裂解位点(33-35位氨基酸)和56个氨基酸的GnRH相关肽(36-91位氨基酸);花鳗鲡cGnRH-Ⅱ cDNA开放阅读框包含264个碱基,编码87个氨基酸,其中包括24个氨基酸的蛋白质前体信号肽(1-24位氨基酸)、cGnRH-Ⅱ十肽(25-34位氨基酸)、一个三肽裂解位点(34-36位氨基酸)和50个氨基酸的GnRH相关肽(37-87位氨基酸).序列同源性分析表明,花鳗鲡mGnRH、cGnRH-Ⅱ cDNA与日本鳗鲡之间的相似性率高达98%;与鲑形目、鲈形目、鲽形目鱼类的相似率为73%-78%;而与鲤形目鱼类的相似性相对较低(63%-67%).采用RT-PCR方法分析了两种GnRH基因在花鳗鲡雌雄个体中的表达,结果表明两基因在雌雄个体的组织表达模式无明显差异;但mGnRH基因在雌雄个体内表达部位多于cGnRH-Ⅱ的.     

斜带石斑鱼PACAP的原核表达及活性分析

自1989年从绵羊下丘脑提取物发现垂体腺苷酸环化酶激活多肽（Pituitary adenylate cyclase activating polypeptide,PACAP）以来（Miyata et al．,1989）,已证明它能促进垂体激素释放,同时还具有神经递质、神经调质和神经营养等作用,使对PACAP的研究成为十分活跃的领域。PACAP属于血管活性肠肽（VIP）-胰高血糖素-生长激素释放因子-分泌素家族（Campbell and Scanes,1992）成员,已鉴别出包含27和38个氨基酸两种类型。对原索动物（McRory et al．,1997）、两栖类（蛙）（Alexandre et al．,2000）、爬行类（蜥蜴）（Pohland Wank,1998）、鸟类（鸡）（McRory et al．,1997）,啮齿类（鼠）（Ghatei et al．,1993）等脊椎动物PACAP的研究多集中在结构与进化方面,对功能了解甚少。     

两栖和爬行类生长及生长激素分泌活动的调节

根据生长内分泌学,综述了近年来两栖和爬行类生长激素（ＧＨ）分泌活动的调节及生长激素在两栖爬行类生长中作用这一研究领域所取得的主要成就和研究进展,研究结果表明：在脊椎动物的进化过程中,ＧＨ的化学结构和功能是相当保守的;ＧＨ对两栖爬行类的生长起促进作用;类胰岛素生长因子（ＩＧＦｓ）也能冰分传递ＧＨ促进两栖类的生长;在两栖爬行类,下丘脑对ＧＨ分泌的调控较哺乳类缺乏特异性,利用外源ＧＨ促进两栖爬行类的生长     

几种神经内分泌因子对鲤促性腺激素释放激素（GnRH）释放的调节作 …

用离体静态培育系统进行的初步研究表明,在幼鲤,多巴胺（ＤＡ）显著刺激下丘脑片段和脑垂体碎片释放ＧｎＲＨ,并且是剂量依存的;促甲状腺素释放激素（ＴＲＨ）和γ－氨基酸丁酸（ＧＡＢＡ）对ＧｎＲＨ的释放没有影响。在成鲤,ＤＡ抑制下丘脑片希和脑垂体碎片释放ＧｎＲＨ,而ＴＲＨ和ＧＡＢＡ刺激ＧｎＲＨ的释放;ＤＡ对ＧＡＢＡ刺激的ＧｎＲＨ释放也具有抑制作用;ＴＲＨ和ＧＡＢＡ的协同作用对下丘脑和脑垂体ＧｎＲＨ释放活动     

不同的下丘脑肽和神经递质对鲤鱼促性腺激素和生物激素分泌活动的影响

以１龄性腺发育中期鲤鱼为材料,采用腹腔注射的方法,研究了不同的下丘脑肽和神经递质对鲤鱼促性腺激素和生长激素分泌的影响。结果表明：促甲状腺激素释放激素,Ｌ－多巴,甲基睾酮,γ－氨基丁酸,促黄体素主激素类似物和三磺甲状腺原氨酸者都能显著刺激ＧｔＨ的分泌,但最大效应时间各不相同。     

鳗鲡繁殖生物学研究Ⅴ.性类固醇激素诱导雌鳗促性腺激素分泌…

多次注射雌二醇或睾酮对雌鳗促性腺激素的合成与分泌活动以及卵巢发育都有明显的促进作用,其中睾酮的作用更较雌二醇显著;多次注射ＬＨＲＨ－Ａ的促进作用则不明显。多次埋植雌二醇或睾嗜促使脑垂体合成ＧｔＨ,但所取血清样品中的ＧｔＨ含量都未见明显增加,多次埋植雌二醇后血清中卵黄蛋白原的含量明显增加,但卵巢ＧＳＩ增长幅度小,表明埋植雌二醇虽能促使肝细胞合成和卵黄蛋白原的含量明显增加,但卵巢明显发育长大,这表明埋