大鼠肠癌中Ⅳ型胶原酶及ras P21表达的研究

用二甲肼诱发Ｗｉｓｔａｒ大鼠肠癌,并应用免疫组化双标记方法对肠道良、恶性病变中Ⅳ型胶原酶的表达及基底膜的改变作了研究,同时观察Ｐ２１的表达情况。结果显示,肠道良性病变及良性肿瘤中Ⅳ型胶原酶反应阳性率为２１．７４％,在肠癌中阳性率为７９．４１％,两者差异极显著（Ｐ＜０．０１）。Ⅳ型胶原染色显示,良性病变及良性肿瘤基底膜完整,而肠癌中基底膜出现断裂或缺失。表明Ⅳ型胶原酶对基底膜的破坏及肠癌浸润转移起重要作用。Ｐ２１在肠良性病变及良性肿瘤中阳性率为３０．４３％,而在肠癌中为６７．６５％,两者差异也有极显著意义（Ｐ＜０．０１）。肠癌中Ⅳ型胶原酶的表达与Ｐ２１的表达之间呈正相关（ｒ＝０．８１３,Ｐ＜０．０５）。     

开花期加拿大一枝黄花水浸提液对3种作物种子萌发和幼苗生长的影响

测定了入侵杂草加拿大一枝黄花（Solidago canadensis）开花期的茎、叶和花序水浸提液对辣椒(Capsicum annuum)、番茄(Lycoperiscum esculetum)、长梗白菜(Brassica chinensis var. communis)种子萌发和幼苗生长的影响。结果表明：（1）处于开花期的加拿大一枝黄花存在明显的化感作用,在25 mg·mL^-1时,对3种作物种子苗生长有促进作用,浸提液高于50 mg·mL^-1时,作物种子的萌发率和生长受到抑制,这种抑制作用随处理液浓度的提高而增强,在100 mg·mL^-1浓度处理下,甚至使作物种子失去活力;（2）加拿大一枝黄花叶和花序的水浸提液对种子萌发和生长的影响要大于其茎的浸提液;（3）在3种作物中,长梗白菜种子对加拿大一枝黄花水浸提液的敏感性最高。     

外来入侵植物北美车前繁殖及光合生理生态学研究

 北美车前（Plantago virginica）原产北美,20世纪50年代进入我国华东地区,近年来其种群呈现爆发式增长态势,已分布到上海、浙江、江西、江苏等省区,是一种典型的生态入侵种。本文计测了该种在不同密度下的繁殖指标,统计了种群密度与繁殖指标间的关系;应用LAC-4 (ADC英国)光合和蒸腾系统测定了该种及其伴生杂草一年蓬（Erigeron annuus）、小飞蓬（Conyza canadensis）、野塘蒿（Conyza bonarinsis）、马缨丹（Lantana camara）、空心莲子草（Alternathera philoxeroides）、菊芋（Helianthus tuberoses）、蓖麻（Ricinus communis）、紫茉莉（Mirabilis jalapa）、车前（Plantago asiatica）、苦苣菜（Sonchus oleraceus）、羊蹄（Rumex japonicus）、藜（Chenopedium album）和黄鹌菜（Youngia japonica）等杂草的光合作用指标,作出了它们的光合 光响应曲线。主要实验结果有：1）北美车前个体花穗重（Y1）、花数／穗（Y2）与种群密度（X）呈现倒数关系（Y1 = 0.138 2+15.959 8/X, Y2 = 46.306 9+6 914.07/X）;随着种群密度增加,北美车前的繁殖投资（Y3）、与繁殖投资关系密切的种子数／营养器官重（Y4）呈线性增加（Y3 = 0.046 9＋0.000 2X,Y4 = 130.24＋0.023 9 X）; 2） 随着北美车前种群密度的增加,个体间的大小不整齐性（Y5）变小(Y5 = 0.374 8 - 0.000 02X);　3）种群个体间大小不整齐性（Y5）与繁殖投资（X）呈明显负相关(Y5 = 0.379 3 - 0.106 6 X),即随着个体大小不整齐性的增加,北美车前种群的繁殖投资减少;4）以自然条件下测得的光合作用数据为基础,拟合得到了北美车前及其它13种伴生杂草的光合 光响应曲线。北美车前的光合 光响应曲线符合Y= - 7E-06X2+0.022 3X-0.831 2,光补偿点、光饱和点和最大净光合速率分别为37.32 μmol·m－2·s－1、159 3 μmol·m－2·s－1和16.93 μmol CO2·m－2·s－1,说明北美车前是典型的阳生杂草。从光补偿点分析,北美车前的耐荫能力比车前、黄鹌菜、小飞蓬、一年蓬、野塘蒿、蓖麻、加拿大一枝黄花(Solidago canadensis)、苦苣菜、羊蹄和马缨丹的要弱;北美车前净光合速率比一年蓬、小飞蓬、野塘蒿和加拿大一枝黄花等要低些,但是比藜、苦苣菜、蓖麻等的要高,与同属的车前比较接近;5）在5月下旬,杂草性极强的一年蓬、小飞蓬和空心莲子草的光合午休现象不明显,逸生杂草紫茉莉具有明显的光午休现象,北美车前是早春杂草,在5月下旬也有明显的光合午休现象,反映出该种不能够很好地适生于5月下旬的高温强光环境。通过分析,得出如下结论：1）随着种群密度的增加,北美车前产生种群自疏作用,使个体大小不整齐性下降;高密度给北美车前种群造成某种逆境状态,种群以r-对策的生存方式适应环境,提高其繁殖投资,产生尽可能多的种子,以保证后代的生存,这反映出北美车前在繁殖策略上灵活的调节能力;2）北美车前种群在定居后,如果定居点不再受到人为干扰,其种群将被快速更替,这与其粘液性的种子、较高的光补偿点有关;3）通过保护植被,定植高秆植物,减少对环境的干扰,能够有效地治理该外来杂草。     

IL-12增强流感血凝素DNA疫苗在小鼠中抗流感作用

流感病毒的表面抗原血凝素 (hemagglutinin ,HA)能作为DNA疫苗抗流感病毒攻击 ,在小鼠模型中检测白介素 12 (interleukin 12 ,IL 12 )能否作为HADNA疫苗佐剂增强小鼠抗流感病毒攻击。将IL 12和HA共同免疫小鼠 ,免疫 2次 ,间隔 3周 ,加强免疫后用致死量流感病毒攻击。共同免疫IL 12和HADNA与单独免疫HA相比 ,无论初免还是加强免疫后血清中抗HA的IgG抗体显著提高 ,小鼠体重丢失 (一种临床症状 )明显减少且提高了小鼠的存活率。这些结果表明了IL 12能作为一种佐剂提高流感DNA疫苗的免疫效价。     

溶解氧对单级自养脱氮系统功能菌数量的影响

摘要：【目的】研究溶解氧（Dissolved oxygen, DO）对单级自养脱氮系统功能菌数量的影响,为系统运行操控提出理论指导。【方法】从不同DO水平下的单级自养脱氮反应器中,分别提取活性污泥及生物膜样品基因组DNA,通过特异引物扩增系统内亚硝化菌（Ammonia oxidizing bacteria, AOB）、硝化菌（Nitrite oxidizing bacteria, NOB）及厌氧氨氧化菌（Anaerobic ammonia oxidizing bacteria, ANAMMOX）基因序列,PCR产物经回收克隆测序后,证实扩增产物为AOB、NOB及ANAMMOX 16S rDNA 保守序列,以含该序列的重组质粒作为定量PCR标准品。用荧光定量PCR技术对单级自养脱氮系统中各类功能菌进行定量分析。【结果】高DO有利于亚硝化菌AOB及硝化菌NOB生存,同时,活性污泥中AOB、NOB数量多于生物膜。DO对厌氧氨氧化菌ANAMMOX数量影响明显,高DO浓度将对ANAMMOX数量产生直接抑制,低DO浓度水平时,由于系统内缺乏厌氧氨氧化反应的电子受体NO3-或NO2-,也将间接影响ANAMMOX数量。【结论】本试验研究条件下,DO为(曝气)2.0/(停曝) 0.4 mg/L时系统运行效能最佳,ANAMMOX数量最多,AOB、NOB及ANAMMOX在此时构成一个协同代谢的稳定状态。     

细胞色素c的释放是多巴胺诱导PC12细胞凋亡的重要环节

通过末端脱氧核苷酸转移酶介导dUTP缺口翻译法和DNA凝胶电泳观察多巴胺(DA)对PC12细胞凋亡的诱导作用, 并经蛋白质印迹法检测胞浆细胞色素c、Bcl-2和Bax蛋白以及活化型半胱氨酸蛋白酶3(caspase-3)水平. 结果表明, 在DA诱导PC12细胞凋亡的过程中, 可见PC12细胞中活化型caspase-3蛋白表达, 胞浆中细胞色素c水平明显增高, 同时Bcl-2蛋白水平下降, 而Bax蛋白水平明显增加. 环孢菌素A预处理对细胞色素c释放和caspase-3激活有明显的抑制作用, 而对Bcl-2和Bax蛋白影响不明显. 结果提示, Bcl-2和Bax蛋白、细胞色素c以及caspase-3可能参与DA诱导PC12细胞凋亡, 线粒体细胞色素c向胞浆释放可能是其中的中心环节.     

鼠巨细胞病毒 IE-1核酸疫苗和灭活疫苗联合免疫抗病毒感染的研究

巨细胞病毒（Cytomegalovirus,CMV）在人群中感染普遍,对婴幼儿及免疫低下人群中造成严重疾病,目前还没有针对该病毒的商品化疫苗。本研究以BALB/c小鼠为动物模型,探讨鼠巨细胞病毒（Murine cytomega-lovirus,MCMV）IE-1 DNA疫苗和MCMV灭活疫苗联合免疫抗MCMV感染的免疫保护效果。将编码IE-1基因的DNA疫苗（pIE-1）通过肌肉注射辅以电穿孔的方式对小鼠进行初免,再用全病毒灭活疫苗单独或者辅以MF59佐剂进行加强免疫,分别通过ELISA和ELISPOT方法检测到联合免疫策略在免疫组小鼠体内诱导了MC-MV特异性的抗体应答和CTL应答;免疫两周后用3＆#215;LD50致死剂量MCMV感染小鼠,疫苗对小鼠的免疫保护通过检测小鼠存活率、重要器官中的病毒滴度及体重丢失率来评价。结果显示,与单独免疫DNA疫苗或灭活疫苗相比,IE-1 DNA疫苗联合灭活疫苗组能同时在小鼠体内诱导体液免疫和细胞免疫应答,并提供小鼠完全保护;而且MF59辅以灭活疫苗免疫小鼠能增强疫苗的免疫效果。     

唾液乳杆菌BSH1及其突变体的底物特异性

为了解析胆盐水解酶催化中心中关键氨基酸位点与其底物特异性的关系,以大肠杆菌pET-20b(+)表达系统为分子改造平台,采用理性设计,结合氨基酸定点突变的方法,成功构建了唾液乳杆菌Lactobacillus salivarius胆盐水解酶BSH1的7种突变体。通过对比L.salivarius BSH1及其突变体对6种结合胆盐的底物特异性表明,7种突变体对不同的结合胆盐的水解活性有所改变。结果说明,Cys2和Thr264分别是BSH1催化TCA和GCA的关键残基,且对酶的催化活性的保持具有关键作用。其中,高保守性的氨基酸位点Cys2不是BSH1唯一的活性位点,而其他突变的氨基酸位点可能作为BSH1的结合位点参与了底物的结合,也可能影响了底物进入BSH1活性中心的通道或底物结合口袋的体积与形状,进而影响了BSH1对不同结合胆盐的水解活性。     

克柔念珠菌的生物学、生态学及其致病性研究

目前,克柔念珠菌（Candida krusei）因能引起多种感染如真菌血症,眼内炎和心内膜炎,且多发生于住院的免疫力低下的患者而受到广泛重视。实验室研究显示克柔念珠菌比白念珠菌（C．albicans）毒力弱,其致病力与其强大的凭借细胞表面疏水性附着于非生物表面而繁殖的特性有关。此外,克柔念珠菌与其他医学上重要的念珠菌在结构、代谢特点上均有显著不同,并在对宿主的防御中表现出与众不同的行为模式,因此有必要对其进行重新认识。     

甲型H7N9流感疫苗的临床研究进展

2016年10月以来,我国感染甲型H7N9流感病例数量急剧增加,截至日前,内地已新增460例病例,已死亡78例,引起了国内外的密切关注。H7N9病毒一旦获得持续人传人的能力,将造成流感的大流行。因此,研发安全有效的H7N9流感疫苗具有重要意义。本文就国内外目前处于临床试验阶段以及已有临床试验结果的H7N9流感疫苗做一综述。