真核基因在pET系统中表达出现的问题与拟解决的方案

pET表达系统是以噬菌体的T1为启动子,可以从各种基因(包括原核、真核细胞)生产大量的目的蛋白,然而一些真核基因在pET表达系统中的蛋白表达量却很少,有许多因素影响真核基因在该表达系统中的表达,如信号肽序列、毒性基因与质粒的稳定性、mRNA转录的二级结构和稀有密码子,以及实际操作过程中表达条件等均会影响真核基因在pET系统中的表达。该文旨在分析其主要原因,并提出拟解决的方案,以达到满意的高效表达。     

植物抗早基因工程研究进展

从植物抗虫基因工程的研究历史出发,论述了第一代抗虫基因、第二代抗虫基因,重点介绍了B.t．杀虫晶体蛋白基因、胆固醇氧化酶基因和营养杀虫蛋白基因,并对植物抗虫基因工程中所遇到的问题和解决办法进行了探讨。     

利用荧光分光光度计定量分析GFP基因的表达水平

以3种表达水分高低不一的绿色组织特异性启动子驱动绿色光蛋白（green fluorescent protein,GFP）基因转化烟草植株,设计了一种利用荧光分光光度计对组织中GFP的表达水平进行定量分析的新方法,利用该方法对获得的102株转基因烟草中不同部位叶片中的GFP表达水平进行了定量分析.其结果与荧光显微镜观察结果高度一致,从而证实利用这种新方法对GFP基因进行定量分析是可行的。     

发酵动力学教学释疑解难尝试

在发酵动力学课程教学中,针对菌体生长速率与菌体比生长速率、菌体实际生长得率系数(Yx/s)与理论生长得率系数(Ygs)、产物实际得率系数(Yp/s)与理论得率系数(Yps)、补料分批发酵中比生长速率调控等常见知识难点进行了释疑解难尝试,收到了较好的课堂教学效果。     

为转基因保驾护航

正转基因技术进入人们的生活已经很长时间,取得的成果和实效有目共睹。然而,似乎新的事物总是要经受更多的考验和磨砺,随着大众媒体日趋发达,众多不和谐乃至反对转基因的声音屡屡发出,质疑与忧虑齐飞,惶惑与无语一色,在公众人群中引起了不小的波澜。"自然的才是最好的!转基因违背了自然规律!""自然界中没有跨物种的转基因!随意融合不同物种的基因会带来灾难!"     

腈水解酶基因bxn的结构与功能研究

前期研究发现腈水解酶基因bxnRD127表达产物无功能,测序证明该基因结构中存在4处突变。本文对4处突变逐点进行结构与功能回复突变研究,发现其中2处突变能使基因表达产物丧失功能,1处使基因表达产物活性降低,1处对基因表达产物活性基本无影响。进一步将完全回复突变的bxn基因转化烟草,获得的转基因烟草具有抗溴苯腈除草剂特性,结果证明结构中的3处突变与活性中心功能有关。     

基于PSR模型的耕地生态安全物元分析评价

耕地生态安全评价是改善农田生态系统安全状况、促进耕地可持续利用的重要基础。针对多数综合评价研究中存在信息屏蔽和主观性的问题,在界定耕地生态安全内涵的基础上,构建了基于压力-状态-响应(PSR)模型的评价指标体系,采用物元分析方法和改进的熵值法对我国耕地生态安全进行评价。研究结果表明:(1)1996-2010年我国耕地生态安全水平不断提高,安全等级经历了"临界安全-较安全"的演变历程,但2010年"较安全"等级关联度很弱;(2)单位耕地化肥负荷、人均耕地面积、单位耕地农药负荷、土地垦殖率、水土流失程度等是耕地生态安全等级提升的关键制约因素。为了促进耕地生态安全等级不断提升,需要进一步转变经济发展方式,加强土地利用监督管理,降低经济增长对土地资源的过度消耗;大力发展绿色农业,合理施用农药、化肥;积极开展农村土地整治,加强高标准基本农田建设;加大环境治理力度,有效控制水土流失程度。基于PSR模型的评价指标体系能更准确地反映农田生态系统各要素之间的关系,物元分析方法可以揭示单个评价指标的分异信息和综合评价结果的中间信息、挖掘耕地生态安全存在的具体问题,适合用于耕地生态安全的评价。     

氟比洛芬酯联合地佐辛用于甲状腺手术术后镇痛的研究

摘要目的：研究氟比洛芬酯与地佐辛联合应用对于甲状腺手术患者术后的镇痛效果。方法：选择90例ASAI或II级甲状腺手术的患者（包括结节性甲状腺肿,甲状腺功能亢进,甲状腺癌）。年龄21．59岁,一般状态良好,随机分为三组：（FD组）氟比洛芬酯＋地佐辛组,（F组）氟比洛芬酯组,（D组）地佐辛组,每组30例。各组于手术结束前30rain分别缓慢静脉输注药物,FD组：氟比洛芬酯50mg＋地佐辛5mg;F组：氟比洛芬酯50mg;D组：地佐辛5mg。然后各组分别泵入不同的药物,FD组：氟比洛芬酯200mg＋地佐辛30mg,F组：氟比洛芬酯200mg,D组：地佐辛30mg,均以生理盐水稀释至100mL,以2ml／h的速率持续泵注48小时。分别记录各组各时间点：（T1）术后2h、（T2）术后6h、（T3）术后12h、（T4）术后24h、（T5）术后48h的心率（HR）、血氧饱和度（SPO：）及各时间点的疼痛评分（VAS）、镇静评分（Ramsay）,并记录出现的恶心、呕吐、眩晕等并发症的例数。结果：FD组、F组血流动力学较之D组平稳,D组出现一过性sP02下降。术后VAS评分D组明显高于FD组和F组（P〈0．05）,Ramsay评分FD组、F组低于D组（P〈0．05）。结论：在甲状腺手术术后镇痛的研究中,氟比洛芬酯与地佐辛联合应用,并发症少,镇痛良好,VAS、Ramsay等各项评分优于单纯应用氟比洛芬酯与地佐辛组。     

MicroRNA基因簇的多样性与进化

microRNA（miRNA）基因簇是一类miRNA基因在染色体上成簇排列形成的基因群.在动植物基因组中,已发现存在大量簇生排列的miRNA基因.然而这种簇生排列方式所具有的功能意义尚不完全清楚.miRNA基因簇常位于一个多顺反子内,通过共表达在胚胎发育、细胞周期和细胞分化等诸多方面发挥协同调控的功能.基于近些年来的研究进展,本文综述了miRNA基因簇在动物染色体上分布的多样性,表达与功能的协同性,以及重复和转座介导下miRNA基因簇产生与消亡的适应性进化过程.     

重庆四面山5种不同配置模式人工林生物多样性研究

应用物种多样性指数(Shannon-Wiener指数、Simpson指数)、均匀度指数(Pielou)和物种丰富度指数对重庆四面山地区5种人工水土保持林群落进行多样性分析.结果显示:(1)5种人工林群落以枫香+木荷+石栎+香樟+灌木混交林的物种多样性最为丰富,纯杉木林最次.(2)各多样性指数在不同群落间的变化以乔木层的枫香+木荷+石栎+香樟+灌木混交林、灌木层的石栎+木荷混交林、草本层的纯杉木林等的生物多样性最为丰富.(3)不同林型的物种多样性不同,其生态效益、环境效益也有较大差异.建议在四面山地区以及类似生态区的退耕还林过程中选择以常绿阔叶林和针阔混交林为主的乔一灌结合混交林模式,以提高人工林群落的物种多样性,实现理想的水土保持林功能.