生物技术在半夏鉴定中的应用

随着市场上半夏混淆品的盛行及半夏本身形态学的某些改变,使传统的形态学鉴别方法难度增加,必须结合其他方法才能准确鉴定。随着生物技术的发展,其在中药鉴定中的应用日渐突显,本文就目前常用于中药鉴别的生物技术方法进行了总结,主要可概括为色谱、分子生物学和电泳三大类,以期广泛应用于半夏真伪鉴别。     

半夏脱毒与快繁技术研究进展

半夏是我国传统中药材，长期无性繁殖导致病毒积累对半夏产量和品质造成了严重影响。由于半夏茎尖病毒积累少，利用半夏茎尖脱毒快繁技术可有效解决病毒害严重的问题。本研究从半夏主要病毒种类、脱毒方法、组培快繁和病毒检测等方面对半夏脱毒与快繁技术进行综述，以期为半夏脱毒快繁体系的建立提供参考。     

黄连半夏药对治疗慢性萎缩性胃炎作用机制研究CSCD

本研究基于分子对接与动物实验探讨黄连半夏药对治疗慢性萎缩性胃炎的作用机理。首先,在TCMSP数据库中筛选黄连半夏主要成分,利用vina软件与IL-1β、IL-6、YAP1、STAT3、JAK2、VEGF、EGFR进行分子对接;其次,采用复合方法建立大鼠模型,随机分为模型(B)组,维酶素(C)组,低、中、高剂量(D、E、F)组,每组10只。造模成功后,D、E、F组采用黄连半夏水煎液(1∶2∶4)灌胃,B、C组分别予生理盐水(1 mL/100 g)、维酶素(0.3 g/kg)灌胃,连续8周。治疗结束后,获取大鼠血液与胃组织样本,采用ELISA检测血清IL-1β、IL-6含量,HE染色观察胃组织形态,RT-PCR检测胃组织中JAK2、STAT3、AKT1、YAP1、VEGF、EGFR mRNA的表达,Western blot测胃组织p-STAT3、p-JAK2、p-AKT、p-YAP1水平。实验结果发现:黄连半夏所含主要活性成分均能与关键靶标结合;各治疗组能有效修复胃黏膜形态、减少炎症及肠化生,且E组优于其他各组;E、F组血清IL-6、IL-1β含量、胃组织中JAK2、STAT3、AKT1、YAP1、VEGF、EGFR mRNA表达量及p-STAT3、p-JAK2、p-AKT1水平均较B、C组显著降低(P<0.01)。但在p-YAP1水平上各治疗组均较B组显著上升(P<0.01)且E组优于其他各组。实验结果表明黄连半夏所含主要成分可通过降低慢性萎缩性胃炎大鼠血清炎症因子水平,抑制JAK2/STAT3通路与血管新生途径,修复胃黏膜形态,防止其向恶性肿瘤演化。     

三种荆州半夏的ITS序列分析与种属鉴定

通过采集自湖北荆州地区的三种不同表现型的半夏属植物的叶片组织中提取基因组,纯化后经直接PCR扩增得到其对应的ITS序列并测序。运用NCBI Gen Bank数据库进行序列比对与进化树分析。根据比对与分析结果,结合植物形态学特征显示,HBB-01为Pinellia ternata,为《中国药典》中规定的半夏类药材品种;HBD-02为P.tripartita,为药用半夏的混淆品;HBF-03的结果较为复杂,其不仅与芋属(Colocasia)天南星属(Arisaema)、半夏属(Pinellia)等植物ITS序列的同源性高达80%以上,而且在进化关系上,它们也有一定关联。所以推测HBF-03可能为天南星科不同属但亲缘关系较近的植物产生的变种,具体种属来源有待进一步论证。通过三种半夏种属来源及其亲缘关系的分析,鉴定了荆州地区的半夏人工种植的主要品种,对其当地药农种植符合《中国药典》规范的半夏药材具有指导意义,为后续优质半夏资源的保护与选育提供了参考依据。     

半夏miR167及其靶基因响应大豆花叶病毒胁迫的表达

MicroRNAs(miRNAs)是一类小的非编码RNA,在植物逆境及生物胁迫中通过调节靶基因来发挥重要的调控作用。半夏内源miR167是否参与了大豆花叶病毒(soybean mosaic virus,SMV)的胁迫及相互作用关系尚不清楚。本研究利用茎环法扩增半夏内源miR167基因，命名为pt-miR167,采用生物信息学软件对其进行保守性分析，系统进化性分析及靶基因预测。在此基础上，采用qRT-PCR技术检测病毒积累量、miR167及其潜在的靶基因的表达水平，分析miR167及靶基因响应病毒侵染的表达模式。结果表明，病毒积累量在5～15 d时迅速增加，其中10 d时增加最快，随后呈现缓慢上升趋势。病毒侵染后，pt-miR167相比对照组，表达量呈下调，并且在10 d时表达量最低。进化树分析表明，pt-miR167与番茄(Solanum lycopersicum)中的sly-miR167a聚为一族，高度同源。预测的潜在主要靶基因ARF6表达量与pt-miR167表达量呈现正好相反的趋势，其在10 d时表达量达到最高。本研究表明，miRNA167参与了寄主半夏与病毒SMV的相互作用关系...