Gluconobacter oxydans NH-10中短链D-阿拉伯糖醇脱氢酶的研究

以氧化葡萄糖酸杆菌(Gluconobacter oxydans)NH-10基因组DNA为模板,扩增得到D-阿拉伯糖醇脱氢酶基因arDH,将其克隆到大肠杆菌表达载体JM109(DE3)中进行诱导表达。SDS-PAGE电泳分析ArDH的分子量约为30 kDa,是一个短链脱氢酶,既能催化D-阿拉伯糖醇氧化为D-木酮糖,又能催化D-木酮糖还原为D-阿拉伯糖醇。催化氧化反应时,对D-阿拉伯糖醇的K_m为60.67 mmol/L,V_max为0.803 U/mg;它能同时依赖于NAD⁺和NADP⁺,但是更加偏好辅酶NAD⁺;最适pH为12.0。还原反应对D-木酮糖的 K_m为36.39 mmol/L,V_max为1.71 U/mg;最优pH为7.0,最适温度均为30℃。     

肠道病毒71型灭活疫苗免疫恒河猴在攻毒实验中的感染动力学

本文旨在根据前期研究建立的恒河猴感染动物模型,对同期研制的肠道病毒71型(EV71)实验性灭活疫苗免疫动物进行全面的免疫保护性评价。评价指标包括病毒攻击后动物体内病毒载量及病理学变化,根据所得结果进行实验性疫苗免疫后动物在病毒攻击中的感染动力学分析。3个疫苗剂量(20、80、320EU)免疫的恒河猴均出现不同效价的中和抗体,80EU和320EU剂量组在二次免疫后第6周抗体效价达1∶128～1∶256,经104.5CCID50病毒鼻腔攻击后均未检出阳性病毒载量。20EU剂量组中,淋巴器官、中枢神经系统及其他主要脏器均出现比对照组低但仍为阳性的病毒增殖现象。病理学方面,各剂量组免疫恒河猴的中枢神经系统以及肺等器官均未出现相关病理损伤。本实验在确定该疫苗对恒河猴有效保护性的同时,亦为明确EV71灭活疫苗免疫剂量提供了直接的实验依据。     

利用HSV1α-基因启动子构建真核表达载体phIE

以pcDNA3质粒为骨架,构建由1型单纯疱疹病毒(Herpes simplex virus I,HSVI)立即早期基因启动子指导外源蛋白转录的phIE真核表达载体,该质粒为外源蛋白的表达提供了更为广泛的选择,通过插入us1编码序列,phIE-Us1被用于分析ICP22蛋白在病毒感染早期的功能;在多克隆位点插入氯霉素乙酰转移酶编码基因构建phIE-CAT检测载体,应用于检测HSVI病毒蛋白Vp16及ICP22的功能,明确显示该质粒对于研究单纯疱疹病毒的基因转录调控具有重要的应用价值.     

磁场对血浆和胃粘膜内胃肠激素及胃动力效应的实验研究

目的:探讨腹部恒磁场作用,对大鼠急性胃损伤模型的治疗效应及其作用机制。方法:10只健康SD大鼠,以indomethacin胃灌注法复制急性胃损伤模型,以表面磁强度为1300-1600GS,钡铁氧体恒磁场作用大鼠腹部3小时,观察胃损伤指数及病理损伤积分,同时对血浆中内皮素(endothelin,ET)、一氧化氮(nitricoxide,NO)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)及超氧化物岐化酶(SOD)水平进行比较。结果:恒磁场腹部作用后,大鼠胃损伤指数及病理损伤积分较对照组均显著减轻(p均<0.05);血浆ET-1和NO水平却无无明显改变(p均>0.05),血GSH-Px和SOD含量较对照组均明显升高(p均<0.05)。结论:腹部1300-1600GS恒磁场作用3小时,对大鼠急性胃损伤具有明显的治疗效应,磁场的这一效应可能与其增加血浆中清除氧自由基的GSH-Px和SOD活性有关。     

应用4种方法检测结核分枝杆菌临床分离株对链霉素的耐受性

通过DNA测序、SSCP、RFLP和反向斑点杂交技术分析167株结核分枝杆菌临床分离株的耐药基因型,评价结核分枝杆菌rpsL或rrs基因突变与链霉素（SM）耐受性之间的关系,比较4种分子方法检测SM耐受性的临床价值。98株耐SM分离株中,78株（79．6％）rpsL 43位或88位密码子错义突变导致赖氨酸置换为精氨酸,6株（6．1％）rrs 513位碱基A突变为C或T或516位C突变为T,14株（14．3％）未发现突变;69株SM敏感的分离株未发现这两个基因突变。应用SSCP、RFLP和RDBH方法分析上述突变和野生序列的结果与DNA测序完全一致,RDBH方法可从98株耐SM分离株中正确鉴定出84株（85．7％）分离株的5种突变基因型。结果表明,应用分子技术分析rpsL和rrs基因突变可快速检测大多数结核分枝杆菌对SM的耐受性,反向斑点杂交方法是一个快速、简便和可靠地检测药物耐受性的分子方法。     

用阳离子铵型树脂分离苯丙氨酸

应用铵型阳离子交换树脂分离L 苯丙氨酸 ,确定了溶液在pH 1.0的条件下上铵型柱 ,用 0 .15mol L氨水解析 ,解析液对上柱液的苯丙氨酸收率为 95 %。     

一株产木聚糖酶链霉菌的鉴定及发酵产酶*

以木聚糖为唯一碳源,筛选出一株高产木聚糖酶生产菌株。该菌株经形态特征、 培养特征、生理生化和细胞壁组分分析等实验,鉴定为卷须链霉菌（Streptomyces cirratus).摇瓶发酵产酶实验表明：培养基最佳初始pH值为6．0;玉米芯水不溶木聚糖和蛋白胨分别是最佳的碳源和氮源;添加0．5％吐温80使得木聚糖酶活力提高到原来的2．5倍,发酵液最高酶活达到623u／mL。     

对CIMMYT小麦品种抗白粉病的鉴定简报

1999～2001年连续2年,对 CIMMYT 提供的165份小麦品种进行成株期田间人工诱发抗白粉病鉴定。鉴定病圃设在本院试验农场,面积为200m~2。人工诱发鉴定圃的接种菌源,以上年度采集并保存的当地白粉病菌菌株,先在温室的感病品种8017-2上繁殖,2月下旬将带有大量分生孢子堆的病株移植到病圃的二个诱发行中间,每距33cm 种植2株病株。由于病株上有大量分生孢子,使诱发行麦株迅速受侵染且严重发病,形成充分接种菌源,保证对供鉴品种的重复侵染,以诱发供试小麦材料成株期感染发病。     

Influence of silicon on microdistribution of mineral ions in roots of salt-stressed barley as associated with salt tolerance in plants

Two contrasting barley (Hordeum vulgare L.) cultivars: Kepin No.7 (salt sensitive), and Jian 4 (salt tolerant) were grown hydroponically to investigate the microdistribution of mineral ions in roots as affected by silicon (Si) with respect to salt tolerance. The experiment was undertaken consisting of two treatments with 3 replicates: (i) 120 mmol · L-1 NaCl alone (referred to as Si-NaCl+), (ii) 120 mmol·L-1 NaCl + 1.0 mmol · L-1 Si (as potassium silicate) (referred to as Si+NaCl+). Plant root tips were harvested for microanalysis using an energy dispersive X-ray microanalyzer (EDX) 30 d after transplanting. Higher Cl and Na X-ray peaks were recorded in the root epidermal, cortical and stelar cells of roots for the treatment Si-NaCl+ with the majorities of Na and Cl being accumulated in epidermal and cortical cells, while relatively low K peaks were observed regardless of the barley cultivars used. By contrast, considerably higher K peaks were detected in the epidermal, cortical and stelar cells of th     

硅对大麦根系中离子的微域分布的影响及其与大麦耐盐性的关系

运用X射线电子探针研究了硅对盐胁迫下两个耐盐性不同的大麦品种根系中离子微域分布的影响及其与大麦耐盐性的关系. 结果表明, 不管是盐敏感品种还是耐盐品种, 盐胁迫(120 mmol/L NaCl)处理的根系表皮、皮层和中柱细胞中钠、氯离子的X 射线峰均较高, 且主要集中分布在表皮和皮层细胞中, 而钾峰较低; 盐胁迫处理加入1.0 mmol/L硅后, 根系表皮、皮层和中柱细胞中钠、氯离子的X射线峰显著降低, 且钠、氯离子在根系表皮、皮层和中柱细胞中呈现均匀分布, 而钾峰则大幅度提高. 这一结果为作者先前得到的结果, 即硅降低盐胁迫大麦对钠离子的吸收, 提高对钾离子的吸收提供了有力的证据, 表明硅对根系中离子含量及其微域分布的影响是硅提高大麦对盐胁迫抗性的机制之一.