七星瓢虫雌成虫卵巢发育不同阶段体内保幼激素的含量

本文以大蜡螟Galleria mellonella(L.)为生测昆虫,应用蜡测定法(Wax test)测定了取食天然食物及人工饲料的七星瓢虫雌成虫在不同卵巢发育阶段体内保幼激素(JH)的含量。取食蚜虫者羽化后8日左右(卵巢管内出现第三卵母细胞,卵黄大量沉积即将排卵),雅虫JH含量达到高峰(593.3G.U.),但一经开始排卵(羽化后约10日左右)保幼激素的含量猛然下降。直至持续产卵达10次的雌虫(羽化后约25日)JH含量仍保持在比较平稳的状态。取食人工饲料者卵巢发育缓慢,羽化30日后不产卵个体的JH水平仍很低,仅及取食蚜虫组高峰的1/6。这一结果证实了JH对七星瓢虫雌成虫卵巢发育及排卵的调控,也指出了取食人工饲料的雌虫产卵率及产卵量明显偏低的重要原因。 在应用蜡测法的过程中肯定了JH浓度与大蜡螟蛾中胸背板保持的部分蛹皮面积之部的关系。     

鼠抗人B血型物质单克隆抗体结合部位的特异性

应用ELISA定量结合试验和ELISA定量抑制试验,测定出三株鼠抗人B血型物质单克隆抗体3-3-D9(IgGl),3-5-D12(IgGl)和6-1-G11(IgA)结合部位的结构和特异性。研究发现三株抗B血型单克隆抗体仅结合B血型物质,而不结合A,H和L_e~a血型物质,表现出对B血型的高度特异性。同时这些单抗对B血型物质TijⅡ phenol-insoluble有较高亲和力,与另一B血型物质Beach phenol-insoluble亲和力较低,尽管Beach phenol-insoluble是6-1-G11免疫用抗原。3-3-D9和3-5-D12结合部位互补于含有双分子岩藻糖残基的。这一发现在世界上尚属首次。6-1-G11结合部位互补于含有单分子岩藻糖残基的02E.Glα1。这些单克隆抗体结合部位结构和特异性的揭示,为在临床血液分型试验中广泛应用这些抗B血型单克隆抗体,取代沿用已久的人多克隆抗血清奠定了基础。     

神农架川金丝猴粪便和尿液中类固醇激素的检测

灵长类动物类固醇激素的研究已经在很多物种间展开(Cariso et al.,1999;Lutz et al.,2000;He et al.,2001;Yan and Jiang,2006;Brandon et al.,2008;Lu et al.,2010;Kim et al.,2012)。特别是对于没有明显发情特征的灵长类动物,类固醇激素的变化可以为它们的繁殖状态提供更多可靠的评估(Fujita et al.,2001)。自然状态下野生动     

直接法测定低密度脂蛋白胆固醇

为了提高血脂检验技术,探讨直接法测定低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C),选用市售的两种直接测定LDL-C的试剂盒进行方法学的实验评价,结果表明：直接法具有简便、快速、准确和适合自动分析等特点.两种试剂盒的测定结果都能满足建立分析方法要求的目标,不精密度＜４％,两法显著相关r=0.994, y=1.0572x－0.1052, S_y/x=0.1913,且各种方法学检验结果相近,使用者可结合实际选作常规测定之用.     

百日咳菌苗免疫力水平测定两种统计方法的比较

利用生物统计软件对兰州生研所１２年间生产的１４７批百日咳菌苗原液的免疫力进行质反应平行线测定分析（平行线法）,并与《中国生物制品规程》９５版中Ｗｉｌｓｏｎ Ｗｏｒｃｅｓｔｅｒ法（Ｗ－Ｗ）比较,结果表明,质反应平行线测定法的各剂量反应百分率落在经验区间内;ＥＤ５０可信限区间为０．０１６～０．０１４;相对效价９５％可信限区间为０７７５～０．６５５。按合格、不合格、复试三个水平对１４７批百日咳菌苗的免疫力进行了分析与评价。并以中国百日咳菌苗免疫力试验用参考品为对照,对待检菌苗的稳定性及实验一致性进行了质量检测,计得总体回归系数分别为１．５８７９（ｘ２＝６０．９０）和１．３８４９（ｘ２＝１６３．２４）;总体ＥＤ５０分别为０．０１４和０．０１５;待检菌苗总体相对效价０７１４,两法的ＥＤ５０值间及相对效价值间存在很好的相关性（ｒ＝０．８３７６及ｒ＝０．９９４０）。     

Effects of cations on small fragment of DNA polymerase I using a novel FRET assay

DNA polymerase I （Poll） digested by protease produces a small fragment （SF） containing 5~--~3~ exonuclease activity. The 5~-~3＇ exonuclease activity of poll cleaves the down- stream RNA primer strands during DNA replication in vivo. Previous in vitro studies suggested its capability of cleaving duplex from 5＇ terminal and a flap-structure-spe- cific endonuclease activity. From the crystal structures of other nucleases and biochemical data, a two-metal-ion mechanism has been proposed but has not been deter- mined. In this study, we cloned, expressed, and purified the SF protein, and established a novel fluorescence resonance energy transfer （FRET） assay to analyze the catalytic activ- ity of the SF protein. The effects of several metal ions on its catalytic capability were analyzed using this FRET assay. Results showed that Mg2＋, Mn2＋, and Zn2＋ were able to activate the cleavage of SF, while Ca2＋, Ni2＋, and Co2＋ were not suitable for SF catalysis. The effects of K＋, Na＋, and dNTP were also determined.     

专一识别甲酯化赤霉素7，4的单克隆抗体的制备

合成Gas－3-O－HAS免疫原的同时,往往产生Gaa－7－CONH—HAS等其它成分,从而有可能通过特定的ELISA分步筛选法,在一次单抗研制流程中兼得两类针对不同Gas抗原决定簇的单克隆抗体(Mabs)。交叉反应结果表明,其中的Mab BG2对GA_7/4甲酯具有高亲和力和专一性,它与GA7me的亲和力比GA3me与GA1me分别高出100与200倍。7位羧基的甲酯化可显著增加Gas与该抗体的结合,而A环上双键或3β基的缺失,19,10－r-内酯环的破坏及D环上13位羟基的存在却严重降低Gas．与它的结合。这种高专一性的单抗将可用于高等植物和真菌体内早期非羟化途径中的GA7与GA4的免疫定量与定位研究。用该抗体建立的GA4me与GA7me ELlSAs具有极高的灵敏度,两者的检测范围分别为1．0×10^-14～1．O×1O^-13mol与2．0×10^-15～2．0×10^-13mol。     

抗玉米素核苷的单克隆抗体制备及内源玉米素核苷的酶联免疫吸附测定

通过二次成功的细胞融合,共获得三株分泌抗玉米素核苷(ZR)单克隆抗体的稳定杂交瘤系F_2E_6、F_3G_6和F_1B_9。其中F_2E_6分泌的单抗属IgG_1、F_3G_6、F_1B_9分泌的单抗均属IgM。以F_2E_6、F_3G_6单抗为基础的ELISA对ZR的检测灵敏度为0.05pmol(—18pg),线性检测范围为0.05—50pmol。除玉米素(Z)外,F_2E_6、F_3G_6单抗与IPA、6-BA、KT和腺苷几种ZR类似物的交叉反应值都小于0.18％。用ELISA测定F_2E_6单抗与ZR反应的亲和常数为2.36±0.99×10~(-8)M。本文还报道了包埋抗原的ELISA在植物内源细胞分裂素测定中的应用,并用此方法测定了黄化玉米(Zea mays L.)幼苗中ZR的含量。     

干燥失重测定法的实践体会

干燥失重是指药物在规定的条件下经干燥后所减失的重量,以百分率表示.干燥失重的内容物主要是水分、结晶水及其它挥发性物质如乙醇等.用于检查干燥失重测定的方法有烘箱干燥法、干燥器干燥法及恒温减压干燥法[1].药品干燥失重测定是评价某些药品质量的指标之一,其检验数据是否准确、可靠,检验过程能否顺利、安全,受诸多条件的影响,如天平室的环境及设施、仪器与用具的选择及准备,药检人员检验操作的规范化、标准化程度等.广大药检工作者只有在操作中对与之相关的因素进行全面综合考虑,加以规范运用,才能避免或减少实验失误,提高工作质量和工作效率.