转pGH基因猪血清pGH含量的分析

用ELISA方法分别测定了 3头F0 代成年阳性猪和 8头F1代幼年阳性猪血清pGH的水平 ,发现阳性个体间在激素含量及变化趋势上有很大差别 ,其中F1代个体pGH变化趋势与阴性对照较为一致。研究结果表明阳性个体本身性别及生理状况与外源基因表达有关 ,同时也反映出外源pGH基因的表达状况与该基因在宿主基因组中的插入位点不同有着密切的联系。     

Comparison of two in vitro angiogenesis assays for evaluating the effects of netrin-1 on tube formation

Netrin-1 is a neural guidance cue that also regulates vascu- lar development. Controversial results, however, have been obtained concerning the roles of netrin-1 in vascular devel- opment both in vivo and in vitro. In the present study, two in vitro angiogenesis assays were compared to evaluate the effects of netrin-1 secreted by retrovirally transduced mel- anoma cells （Mel2a-netrinl） on tube formation. The results showed that there was no obvious difference in tube forma- tion induced by conditioned media （CM） from the control, Mel2a-netrinl and Mel2a cells in a matrigel assay. The results of another in vitro assay, in which endothelial cells were co-cultured with human fibroblasts, however, showed that Mel2a-netrinl CM inhibited the tube formation, sup- posedly through blocking the elongation and coalescence of human umbilical vein endothelial cells （HUVECs）. These results confirmed that the matrigel assay is not able to demonstrate the anti-angiogenic roles of netrin-1.     

Antitumor effect of the antimicrobial peptide GLI13-8 derived from domain of the avian β-defensin-4

We previously reported that GLII3-8, one of cationic anti- microbial peptides from linear avian β-defensin-4 （RL38） analogs, exhibited high antimicrobial activities against both Gram-negative and Gram-positive bacteria. In the present study, we reported the in vitro cytotoxicity of GLI13-8 using the 3-（4,5-dimethylthiazol-2-yl）-2,5-diphe- nyltetrazolium bromide assay. Results showed that the cytotoxicity of GLI13-8 in three human carcinoma cells （HepG2, SGC7901, and A375） was in a dose-dependent manner. When the concentration of GLI13-8 is 〈128/xM, it had no toxicity towards the normal human fibroblasts （MRC-5）. The Annexin-V-FITC/PI staining assay, the Hoechst 33258/PI staining assay, the permeability of fluor- escein macromolecules and scanning electron microscope assays, mitochondrial membrane potential assay, caspases- 3 and poly ADP-ribose polymerase （PARP） assays have been carried out. Results indicated that apoptosis was induced by GLI13-8 in HepG2 cells, and demonstrated that GLI13-8 induced loss of mitochondriai membrane poten- tial, disruption of HepG2 cell membranes, and activation of caspase-3 and PARP. These findings suggested that GLI13-8 may be an effective agent for HepG2 cells.     

抗体夹心酶联免疫吸附法测定重组溶葡萄球菌酶研究

用重组溶葡萄球菌酶免疫家兔获得抗血清,经亲和层析纯化后用HRP标记,以双向免疫扩散法确定抗血清效价,以Westernblot鉴定抗体的特异性,建立双抗夹心法标准曲线,鉴定其最小检出限、精确度、回收率。实验显示多克隆抗体能与溶葡萄球菌酶特异性结合,双抗夹心ELISA法检测抗原的最小检出限为0·98ng/mL,标准曲线在0·98~500ng/mL范围内线性良好。3份同批样本分别重复6次测定,平均批内变异系数为6·4%;3份不同批样本分别重复6次测定,平均批间变异系数为6·5%。血清中加入已知量的标准抗原,测得平均回收率为98·6%。此法检测重组溶葡萄球菌酶的可测范围广,灵敏度和精密度高,变异系数较小。结果证实建立的检测血清中重组溶葡萄球菌酶含量的双抗夹心酶联免疫吸附测定法(Enzyme-linkedimmunosorbentassay,ELISA)灵敏、准确、可靠。     

林木蒸腾作用测定和估算方法

蒸散是陆地生态系统降水量输入后生态系统水分消耗和大气之间水分交换重要的生态过程,包括土壤蒸发过程和植物蒸腾作用,对于区域水分平衡和全球水分循环有着重要的意义.其中,林木蒸腾作用是森林生态系统水分平衡的重要部分,受到冠层结构及其发展变化、土壤特性和自然环境因子等多种因素的影响.针对不同的植被覆盖类型,国内外许多研究通过各种手段和方法,如快速称量(RM)、稳态气孔计(SSP)、光合作用测定(PS)、整树容器(WP)、风调室(VC)、盆栽称量(WPP)、液流测定法(SPM)、蒸渗仪(L)、水量平衡(WB)、能量平衡(EB)、波文比(BR)、涡动相关(EC)、彭曼联合法(PMM)和遥感(RS)等来估算林木蒸腾作用.本文介绍了林木蒸腾研究中主要测定手段和方法的基本原理、具体技术、适用范围及优缺点,为森林生态系统林木蒸腾作用研究中可靠的手段和合适的方法选择提供依据.     

南方人工林叶面积指数的摄影测量

利用CI-110冠层分析仪、鱼眼镜头数码照片分析,结合胸径-叶片半表面积模型对千烟洲不同森林类型(20年生)的叶面积指数进行了测定,并对3种方法进行了比较.共调查74块样地.研究对象主要为湿地松(Pinus elliottii)林、马尾松(Pinus massoniana)林、杉木(Cunninghamia lanceolata)林.针对上述3种林型,CI-110观测值分别为1.355(0.38～2.85)、1.265(0.62～2.55)和2.140(0.76～3.31);鱼眼镜头测定值依次为1.339(0.71～1.79)、1.491(1.11～1.92)和1.984(1.26～2.59).利用胸径-叶片半表面积模型测定的叶面积指数(范围)依次为4.53(2.24～6.34)、3.88(1.19～6.28)和6.63(3.5～8.37).间接仪器法测定的值明显小于实测值,但具有一定的相关性.胸径-叶片半表面积模型测定叶面积指数最为可靠,而鱼眼镜头测定法比冠层分析仪测定精度高.     

花粉生活力的测定

在农业和林业的常规育种中,为了进行人工辅助授粉或杂交授粉,需要早期采集和储藏花粉。尤其是在杂交育种工作中,为解决亲本花期不一致或进行远距离杂交的困难,则更需要保存花粉的活力。当使用采集和贮存的花粉之前,通常要做花粉     

抗茉莉酸甲酯单抗制备及小麦和黑麦草颖花中茉莉酸含量的测定

本文报道了识别茉莉酸甲酯(MeJA)的单克隆抗体的制备.该抗体源于以茉莉酸的C-1位羧基为偶联位点,钥孔(虫戚)血蓝蛋白为载体合成的免疫原.该抗体对甲酯化茉莉酸的识别力明显强于对茉莉酸(JA)的;JA分子中戊烯侧链的完整性对该抗体的识别力有很大影响.于该侧链的C-9和C-10位加氢(形成Dihydro-JA),或除去C-12(形成JAS-25),都会大幅度降低该抗体的结合活性.该抗体对亚麻酸、南瓜酸、冠毒素及Theobroxide均无识别力.用该抗体建立了定量检测JA的固相抗体型酶联免疫吸附定量测定法,检测范围为2.06-500 pmol MeJA.并探查了小麦及黑麦草开颖前后颖花的JA含量.发现随着开颖时间的临近,JA含量显著升高;颖花开放时达到最大值,随后急剧下降.     

完整弓形虫P35重组蛋白IgM-酶联免疫吸附测定法检测弓形虫急性感染

为利用重组的完整弓形虫表面抗原P35 GST蛋白对弓形虫感染进行血清学诊断 ,构建了可表达P35 GST的JM10 9细胞株 .采用亲和层析对融合蛋白进行分离和纯化 ,用SDS 聚丙烯酰胺凝胶电泳 (SDS PAGE)和蛋白质印迹 (Westernblot)分析所表达的蛋白质 ,并用纯化的重组蛋白进行IgM 酶联免疫吸附测定法 (IgM ELISA)检测不同病人血清中的抗 P35抗体 .SDS PAGE分析发现P35 GST重组蛋白的大小约 6 0ku ,为一亲水性蛋白 ,蛋白质印迹分析表明该蛋白与弓形虫阳性感染病人的血清有特异性反应 .利用P35 GST为抗原 ,对 6 0例血清进行IgM ELISA分析 ,发现P35 GST可明显区分近期感染和既往感染 ,在弓形虫的诊断上有很大的应用前景 .